The invention discloses a fluorescence detection method, a real-time fluorescence quantitative PCR instrument includes: LED light source emits light; the light incident filter filter after the formation of the excitation light; the excitation light enters the incident incident light emitted by the optical fiber; optical fiber directly onto the sample to be measured in the sample cell; the measured fluorescence sample be excited by the transmitting fiber, through the prism, according to the size of the wavelength fluorescence channels are projected on the camera, the formation of spectral imaging. The utility model has the advantages that the realization of the fluorescence acquisition of all channels can be realized without switching the filter, thereby saving the switching between the filters when the multi-channel is detected. Through the optical fiber system, the mechanical movement between different holes and the edge effect of CCD acquisition mode are avoided. Thus, short time and high efficiency detection can be realized.
【技术实现步骤摘要】
一种实时荧光定量PCR仪的荧光检测方法及系统
本专利技术涉及一种实时荧光定量PCR仪的荧光检测方法及系统。
技术介绍
在分子生学领域,聚合酶链式反应技术(PolymeraseChainReaction,简称PCR)是常用的实验技术,其基本原理类似于DNA的天然复制过程,是体外酶促进合成特异DNA片段的一种方法,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR基本由变形、退火、延伸三个基本反应步骤构成,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等优点,不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,而且越来越广泛地应用于临床疾病的诊断。实现实时荧光定量PCR技术的仪器称为实时荧光定量PCR仪,其本质上就是一个温控设备,能对变性温度、复性温度、延伸温度进行准确控制。基本原理是:光源灯发出激发光,通过光学组件到达具有样本的反应管,样本被激发后发出荧光。被激发出的荧光再经过光学组件到达检测器。滤光镜是光学组件的一个部件,可以使特定波长的光通过,从而达到区分产物的目的。通过滤光镜的荧光经过光学组件后被检测器捕获,捕获后的荧光通过一系列光电转换后,输入计算机进行计算分析。荧光PCR常见的检测器有摄像头、PMT(光电倍增管)、光电二极管等。传统的荧光检测系统,通过光源发出激发光,激发光经过入射光滤光镜后进行激发,激发后的荧光再通过检测光滤光镜后到达检测器(如光电二极管、摄像头)。但无论采用光电二极管还是摄像头做为检测器,都是使用滤光镜来得到所需的波长的荧光。多通道荧光检测需要多种滤光镜,不同波长的荧光选择或者通过滤光轮转动滤光镜;或者各种滤光镜安装在一个光头上,通过光 ...
【技术保护点】
一种实时荧光定量PCR仪的荧光检测方法,其特征在于,包括:LED光源发出光;所述光入射滤光镜滤光后形成激发光;所述激发光进入入射光纤;入射光纤发出的光线直接投射到样品池中的被测样品;被测样品被激发的荧光再通过发射光纤,经过棱镜分光后,荧光通道按波长的大小依次投射在摄像头上,形成光谱成像。
【技术特征摘要】
1.一种实时荧光定量PCR仪的荧光检测方法,其特征在于,包括:LED光源发出光;所述光入射滤光镜滤光后形成激发光;所述激发光进入入射光纤;入射光纤发出的光线直接投射到样品池中的被测样品;被测样品被激发的荧光再通过发射光纤,经过棱镜分光后,荧光通道按波长的大小依次投射在摄像头上,形成光谱成像。2.根据权利要求1所述的实时荧光定量PCR仪的荧光检测方法,其特征在于,所述荧光的波长为510-750nm。3.根据权利要求2所述的实时荧光定量PCR仪的荧光检测方法,其特征在于,所述荧光通道的数目为120。4.根据权利要求1所述的实时荧光定量PCR仪的荧光检测方法,其特征在于,还包括:计算机将所述光谱成像进行计算,以得到光强度值的步骤。5.根据权利要求1所述的实时荧光定量PCR仪的荧光检测方法,其特征在于,所述滤光镜为500nm蓝光滤光镜。6.一种实时荧...
【专利技术属性】
技术研发人员:叶锋,刘明坤,张雪峰,
申请(专利权)人:北京旌准医疗科技有限公司,
类型:发明
国别省市:北京,11
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