本发明专利技术属中药制药领域，涉及卡巴唑型吲哚生物碱在制备抗补体药物中的用途。本发明专利技术从青黛粉末中分离得到新型卡巴唑型吲哚生物碱化合物，结构新颖独特，为自然界首次发现且6位引入取代基团的卡巴唑型吲哚生物碱，包括化合物(1)1-(5,7-二羟基吡啶并[3,2-b:5,6-b']双吲哚基-6-乙烷-2-酮和化合物(2)N-(2-羟基苯基)-5,7-二羟基吡啶并[3，2-b:5，6-b']-双吲哚基-6-甲酰胺，采用现代药理研究方法证实所述化合物对补体系统经典途径和旁路途径激活均有较强的抑制作用，其中化合物1和2的CH50值分别为0.024±0.007mg/ml、0.032±0.009mg/ml，AP50值分别为0.056±0.010mg/ml、0.072±0.014mg/ml。所述化合物可用于制备补体抑制剂。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属中药制药领域，涉及卡巴唑型吲哚生物碱及其在制备抗补体药物中的用途。具体涉及青黛中两种卡巴唑型吲哚生物碱1-(5,7-二羟基吡啶并[3,2-b:5,6-b']双吲哚基-6-乙烷-2-酮(1)、N-(2-羟基苯基)-5,7-二羟基吡啶并[3，2-b:5，6-b']-双吲哚基-6-甲酰胺(2)
技术介绍
现有技术公开了补体系统的过度激活会引发系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)等多种重大疾病。抗补体药物研究多年来一直是世界药学研究的热点和重点。然而目前对此类疾病尚缺乏较为理想的治疗药物，因此临床上急需高效、低毒、专一的新型补体抑制剂。从天然产物中研究开发补体抑制剂是近年来一个受到越来越多关注的重要研究领域，其具有成本低、毒性低等特点。国内外学者已从包括海洋生物在内的多种天然产物中分离得到多种具有补体系统抑制作用的单体化合物，为抗补体药物的研究与开发提供了广阔的前景。青黛(Indigo Naturalis)为爵床科植物马蓝Baphicacanthus cusia(Nees)Bremek.、蓼科植物蓼蓝Polygonum tinctorium Ait.或十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的叶或茎叶经加工制得的干燥粉末或团块。其性咸味寒，归肝经。可清热解毒、凉血消斑、泻火定惊。用于温毒发斑、血热吐衄、胸痛咳血、口疮、痄腮、喉痹、小儿惊痫。现有药理研究表明，青黛具有抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化、治疗银屑病等作用，其活性成分主要是生物碱类成分，结构以吲哚生物碱二聚体靛玉红、靛蓝等为主。本申请的专利技术人拟提供结构新颖独特，并具有药理活性的抗补体的卡巴唑型吲哚生物碱。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供卡巴唑型吲哚生物碱及其在制备抗补体药物中的用途。本专利技术所述的卡巴唑型吲哚生物碱从中药青黛中提取获得，包括卡巴唑型吲哚生物碱1-(5,7-二羟基吡啶并[3,2-b:5,6-b']双吲哚基-6-乙烷-2-酮(1)和N-(2-羟基苯基)-5,7-二羟基吡啶并[3，2-b:5，6-b']-双吲哚基-6-甲酰胺(2)。本专利技术应用现代药理筛选方法，对中药青黛中抗补体活性物质进行研究，从青黛的乙醇提取物中分离得到2个卡巴唑型吲哚生物碱类化合物(1,2)并证实它们对补体系统的经典途径和旁路途径激活均有较强的抑制作用。本专利技术所述的卡巴唑型吲哚生物碱类化合物具有以下化学结构：当R为甲基时，化合物1为1-(5,7-二羟基吡啶并[3,2-b:5,6-b']双吲哚基-6-乙烷-2-酮；当R为邻羟基苯胺基时，化合物2为N-(2-羟基苯基)-5,7-二羟基吡啶并[3,2-b:5,6-b']-双吲哚基-6-甲酰胺。本专利技术所述的化合物1、2可通过下述方法制备：取青黛粉末，乙醇回流提取，合并提取液并浓缩得浸膏，加水混悬，分别以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，合并萃取液并浓缩至干。将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、反相HPLC等手段分离纯化而得。所述化合物1:1-(5,7-二羟基吡啶并[3,2-b:5,6-b']双吲哚基-6-乙烷-2-酮,黄色粉末,分子式C19H13N3O。ESI-MS m/z:300[M+H]+。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δH:11.57(2H,s),8.31(2H,d,J＝7.7Hz),7.79(1H,d,J＝8.1Hz),7.52(2H,dd,J＝8.1Hz,7.1Hz),7.33(2H,dd,J＝7.7Hz,7.1Hz),3.08(3H,s).13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δC:119.8(C-1),120.5(C-2),127.0(C-3),112.9(C-4),141.9(C-4a),130.4(C-5a),108.6(C-6),130.4(C-6a),141.9(C-7a),112.9(C-8),127.0(C-9),120.5(C-10),119.8(C-11),121.9(C-11a),138.5(C-11b),138.5(C-12a),121.9(C-12b),
198.6(C-13),32.8(C-14).。所述化合物2:N-(2-羟基苯基)-5,7-二羟基吡啶并[3，2-b:5，6-b']-双吲哚基-6-甲酰胺：黄色粉末,分子式C24H16N4O2,ESI-MS m/z:393[M+H]+。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δH:8.32(2H,d,J＝7.7Hz),8.09(1H,d,J＝7.9Hz),7.67(2H,d,J＝8.1Hz),7.50(2H,dd,J＝8.1Hz,7.1Hz),7.30(2H,dd,J＝7.7Hz,7.1Hz),7.09(1H,dd,J＝7.7Hz,7.1Hz),7.00(1H,d,J＝8.0Hz),6.94(1H,dd,J＝7.9Hz,7.2Hz).13C-NMR(100MHz,CDCl3)δC:120.0(C-1),120.0(C-2),126.9(C-3),112.5(C-4),142.0(C-4a),130.2(C-5a),106.8(C-6),132.0(C-6a),142.0(C-7a),112.5(C-8),126.9(C-9),120.0(C-10),120.0(C-11),122.2(C-11a),138.0(C-11b),138.0(C-12a),122.2(C-12b),164.1(C-13),126.9(C-1'),149.1(C-2'),116.4(C-3'),125.7(C-4'),119.4(C-5'),123.6(C-6').。本专利技术所述的卡巴唑型吲哚生物碱1和2，经体外抗补体经典途径试验，以及体外抗补体旁路途径试验，结果证实，对补体系统的经典途径和旁路途径激活均有较强的抑制作用，可作为活性成分用于制备抗补体药物，其CH50值分别为0.024±0.007mg/ml、0.032±0.009mg/ml，AP50值分别为0.056±0.010mg/ml、0.072±0.014mg/ml，阳性对照肝素的CH50和AP50值分别为0.026±0.005mg/ml、0.054±0.016mg/ml。附图说明图1是青黛中卡巴唑型吲哚生物碱1和2的提取分离流程图。具体实施方式实施例1 卡巴唑型吲哚生物碱1和2的制备取青黛粉末5kg，95％乙醇回流提取3次(50L×3)，每次2h，合并提取液并浓缩得浸膏0.25kg，加水(4L)混悬，分别以等体积石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取5次，合并萃取液并浓缩至干，得乙酸乙酯萃取物50g；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶(200-300目)柱色谱分离，依次以二氯甲烷-甲醇(50:1-0:1)梯度洗脱，得到8个流份(Fr.1-8)，其中流份Fr.7(3g)再经硅胶柱色谱(二氯甲烷-甲
醇,10:1,5:1,3:1,1:1)、Sephadex LH-20柱色谱(氯仿-甲醇,1:1)和反相HPLC(甲醇-水，20:80-80:20梯度洗脱)等手段纯化，分离得到卡巴唑型吲哚生物碱1和2。实施例2 体外抗补体经典途径试验取补体(豚鼠血清)0.04ml，加入巴比妥缓冲本文档来自技高网...
【技术保护点】
具有如下化学结构的卡巴唑型吲哚生物碱：其中，R为甲基时，化合物1为1‑(5,7‑二羟基吡啶并[3,2‑b:5,6‑b']双吲哚基‑6‑乙烷‑2‑酮；R为邻羟基苯胺基时，化合物2为N‑(2‑羟基苯基)‑5,7‑二羟基吡啶并[3,2‑b:5,6‑b']‑双吲哚基‑6‑甲酰胺。
【技术特征摘要】
1.具有如下化学结构的卡巴唑型吲哚生物碱：其中，R为甲基时，化合物1为1-(5,7-二羟基吡啶并[3,2-b:5,6-b']双吲哚基-6-乙烷-2-酮；R为邻羟基苯胺基时，化合物2为N-(2-羟基苯基)-5,7-二羟基吡啶并[3...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈道峰，范明松，黄成钢，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海;31
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