一种以小分子水为原料生产富微药用菌菌丝体的方法技术

本发明专利技术公开了一种以小分子水为原料生产富微药用菌菌丝体的方法，该方法包括：(1)将菌株转接于斜面培养基上进行培养、活化，得到斜面菌种；(2)将斜面菌种制成孢子悬液，接于液体培养基中，摇瓶培养，得到液体菌种；(3)发酵培养基高温灭菌后冷却，再将液体菌种接入，摇瓶培养，得到含菌丝体的发酵液；(4)通过过滤将菌丝体及发酵液分离，纯净水冲洗菌丝，洗去培养基，收集菌丝体，烘至恒重，制得干菌丝体。技术关键是在发酵培养基中添加微量元素，同时整个培养过程使用的水均为小分子水(用核磁共振谱检测，半幅宽54.62Hz)。本方法可以增加药用菌菌丝体中微量元素的含量，其他的功效性成分也明显提高。本方法易操作，成本低，适于工业生产。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，该方法包括：(1)将菌株转接于斜面培养基上进行培养、活化，得到斜面菌种；(2)将斜面菌种制成孢子悬液，接于液体培养基中，摇瓶培养，得到液体菌种；(3)发酵培养基高温灭菌后冷却，再将液体菌种接入，摇瓶培养，得到含菌丝体的发酵液；(4)通过过滤将菌丝体及发酵液分离，纯净水冲洗菌丝，洗去培养基，收集菌丝体，烘至恒重，制得干菌丝体。技术关键是在发酵培养基中添加微量元素，同时整个培养过程使用的水均为小分子水(用核磁共振谱检测，半幅宽54.62Hz)。本方法可以增加药用菌菌丝体中微量元素的含量，其他的功效性成分也明显提高。本方法易操作，成本低，适于工业生产。【专利说明】
本专利技术涉及真菌发酵工程，具体而言涉及以小分子水为原料生产富微药用菌菌丝体的方法。
技术介绍
广义的药用菌指一切可以用于制药的菌物，狭义指用于医药的大型真菌(蕈菌)。野生有冬虫夏草、蝉花、雷丸、安络皮伞等；目前，人工栽培的有灵芝、茯苓、猪苓、天麻、桑黄、木耳、云芝等。这些药用菌在我国都有上千年的应用历史，它们虽功效不同，但最大的优点，也是它们的共同点就是无毒副作用。近代医学研究表明，它们不仅是传统的益气、强身、祛病、通经、益寿等功能，还具增强人体免疫力，抗肿瘤抗癌的功效。许多食用菌兼具有药用价值。人们对药用菌的药理作用进行了大量的研究，证实其具有广泛的药理学活性及临床作用。经大量的研究证明，药用菌液体发酵生产的菌丝体与天然药用菌的成份极相似，并证明了它与天然药用菌有相似的药理作用与临床效果。药用菌的使用，在我国有着悠久的历史。早在6000~7000年之前的仰韶文化时期，我们的祖先就采食蘑菇等食用菌了。2000年前的《礼记》、《吕氏春秋》和《齐民要术》等古籍文献中都有人类食用菇类的记载。东汉时的《神农本草经》记载药物365种，其中就有茯苓、猪苓、雷丸、木耳等10多种真菌。南北朝时期的陶弘景《本草经集注》和《名医别录》中增添了马勃和蝉花等。明代李时珍的《本草纲目》增加了六芝、桑耳、槐耳、柳耳、皂荚菌、香蕈、天花蕈、羊肚菜、鸡、鬼盖、鬼笔、竹荪、桑黄、蝉花、雪蚕以及茯苓、猪苓、雷丸及马勃等40余种。清代的汪昂《本草备要》首次明确记载了冬虫夏草并作为药用保健品。药用菌属的化学成分较为复杂，且因所用菌种、菌种产地、栽培方法、提取工艺、制剂方法不同而各异。药用菌属的子实体、菌丝体和孢子中含有多糖类、核苷类、呋喃类衍生物、甾酵类、生物碱类、蛋白质、多肽、氨基酸类、三萜类、倍半萜、有机锗、无机盐等。药用菌多糖是药用菌的主要有效成分之一，具有抗肿瘤、免疫调节、降血糖、抗氧化、降血脂与抗衰老作用。药用菌所含三萜类不下百余种，其中以四环三萜类为主，药用菌的苦味与所含三萜类有关。三萜类也是药用菌的有效成分之一，对人肝癌细胞具有细胞毒作用，也能抑制组织胺的释放，具有保肝作用和具有抗过敏作用等。人体总重量的万分之一以下的元素，如锌、铜、锰、铬、硒、钥、钴、氟等，称为微量元素。微量元素在人体内的含量真是微乎其微，如锌只占人体总重量的百万分之三十三。到目前为止，已被确认与人体健康和生命有关的必需微量元素有18种，即有铁、铜、锌、钴、猛、铬、硒、碘、镍、氟、钥、银、锡、娃、银、硼、铷、砷等。这每种微量元素都有其特殊的生理功能。尽管它们在人体内含量极小，但它们对维持人体中的一些决定性的新陈代谢却是十分必要的。一旦缺少了这些必需的微量元素，人体就会出现疾病，甚至危及生命。小分子水，由3-6个水分子缔结而成，其运动速度快，具有极强的渗透力、扩散力、溶解力、代谢力，更容易通过细胞内外水的交换，清除自由基、有害酸性代谢物和各种废物，促进细胞的生长发育，保持细胞的生命活力。1991年诺贝尔医学奖和生理学奖获得者德国科学家Dr.Erwin Neher和Dr.Bert Sakmann研究结果表明:只有小分子团水才能通过2纳米的人体细胞离子通道，进入细胞核和DNA，活化细胞酶组织，激发生命活力，而其他自来水、纯净水都无法通过离子通道进入细胞内。目前针对药用菌富集微量元素研究已经很深入，就调节培养基的配方和培养条件，研究的都已经很透彻，为此，我们引入小分子水，以小分子水替代普通自来水，通过该工艺的改进，提高药用菌菌丝体中微量元素的含量和其他的功效性成分。人们长期食用可以促进机体新陈代谢，增进食欲，提高免疫力，保健美容，对防治结石、类风湿、高血压等疾病有明显作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，以克服现有技术药用菌菌丝体中微量元素和功效性成分含量低的缺陷。经过系统的研究和试验后，提出了通过引入小分子水和添加微量元素提高药用菌菌丝体中微量元素和其他的功效性成分的生产方法，方法包括:(I)将菌株转接于斜面培养基上进行培养、活化，得到斜面菌种； (2)将斜面菌种制成孢子悬液，接于液体培养基中，摇瓶培养，得到液体菌种；(3)发酵培养基高温灭菌后冷却，再将液体菌种接入，摇瓶培养，得到含菌丝体的发酵液；(4)通过过滤将菌丝体及发酵液分离，纯净水冲洗菌丝，洗去培养基，收集菌丝体，烘至恒重，制得干菌丝体。所述方法的第二步中，所用的液体菌种培养基配方为微量元素0.05% -0.5%，蛋白胨 1.5%，蔗糖 3%, KH2PO4 0.1-0.2%,7jC 1000mL, pH7.5-8。所述方法的第二步中，所用工艺条件是:液体菌种培养基装液量为60mL/250mL三角瓶；液体菌种于24°C、转速160r/min下培养4d。所述方法的第三步中，所用的培养基配方为微量元素0.1 % _1.6%，蛋白胨1.5%，蔗糖 3%, KH2PO40.1-0.2%,7jC 1000mL, pH7.5-8。所述方法的第三步中，所用工艺条件是:装液量200mL/500mL三角瓶，采用6%接种量将种子液接入发酵摇瓶中，在23°C下摇150r/min转速培养10d。所述微量元素及其比例为硒元素、铬元素、锌元素、锰元素和硼元素的比例为:10: 10: 3: 3:1。本专利技术的关键技术在于在发酵培养基中，同时加入硒元素、铬元素、锌元素、锰元素和硼元素。所述的小分子水半幅宽54.62Hz，用核磁共振谱检测。本专利技术提高了药用菌菌丝体中微量元素和功效性成分的含量，进而提高药用菌菌丝体的药效，具有重要意义，生产的菌丝可作为功能性食品、保健品，药品的原料；本方法易操作，成本低，适于工业生产。【具体实施方式】实施例1:将菌株转接于PDA斜面培养基上25°C下培养7d、活化2次，得到斜面菌种；轻轻刮洗斜面菌种并将之制成孢子悬液，然后用无菌纱布出层)过滤掉悬液里的菌丝，每瓶液体菌种接入浓度适中的药用菌孢子，使制作的液体中的菌丝球细小而均匀，发酵液澄清透明。液体菌种培养基配方为:微量元素0.05% -0.5%，蛋白胨1.5%，蔗糖3%，KH2P04 0.1-0.2%，水lOOOmL，pH7.5-8，液体菌种培养基装液量为60mL/250mL三角瓶；液体菌种于24°C、转速160r/min下培养4d,得到液体菌种。使用最优化的发酵培养基:微量元素0.1% -1.6%，蛋白胨1.5%，蔗糖3%，KH2P04 0.1-0.2%，水lOOOmL，pH7.5-8。所用工艺条件是:装液量200mL/500mL三角瓶，采用6%接种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：凌中鑫，
申请(专利权)人：凌中鑫，
类型：发明
国别省市：