一项DC和Treg细胞治疗红斑狼疮的技术制造技术

技术编号:9929653 阅读:227 留言:0更新日期:2014-04-16 22:35
一项DC和Treg细胞治疗红斑狼疮的技术,其特征是,包括以下步骤:(1)从红斑狼疮患者的非发病期采集100ml外周静脉血;(2)通过密度梯度分离法,从血液中分离得到单个核细胞;(3)将单个核细胞用培养液在培养容器中培养2h,之后将上清液倒入新的培养容器中,原培养容器中贴壁的细胞用来分化为DC,新容器中的悬浮细胞分化为Treg细胞;(4)在DC分化的培养液中加入特异抗原,进行DC功能化处理;向步骤(3)中的原培养容器中加入DC培养基和三种特异抗原CD20、BLyS/BAFF、CD40的混合液,然后对步骤(3)中的原培养容器中的细胞用DC培养基和三种特异抗原CD20、BLyS/BAFF、CD40的混合液进行半量换液,同时,对步骤(3)中的原培养容器中补加培养液;(5)将DC和Treg细胞混合培养扩增;向步骤(3)中的新培养容器中加入TNF?α,同时,将新培养容器中的Treg细胞转入培养袋中培养,补加培养液,然后,用细胞刮刀刮下原培养容器中的DC细胞,加入到新培养容器中的Treg细胞中,并补加培养液进行混合扩增培养;(6)扩增后的细胞用生理盐水清洗,最后进行静脉滴注回输治疗红斑狼疮将所有的DC和CIK细胞离心后,用生理盐水离心清洗两次,然后,加入到注射用生理盐水中,补加10%人血白蛋白后进行静脉滴注回输治疗红斑狼疮。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一项DC和Treg细胞治疗红斑狼疮的技术,其特征是,包括以下步骤:(1)从红斑狼疮患者的非发病期采集100ml外周静脉血;(2)通过密度梯度分离法,从血液中分离得到单个核细胞;(3)将单个核细胞用培养液在培养容器中培养2h,之后将上清液倒入新的培养容器中,原培养容器中贴壁的细胞用来分化为DC,新容器中的悬浮细胞分化为Treg细胞;(4)在DC分化的培养液中加入特异抗原,进行DC功能化处理;向步骤(3)中的原培养容器中加入DC培养基和三种特异抗原CD20、BLyS/BAFF、CD40的混合液,然后对步骤(3)中的原培养容器中的细胞用DC培养基和三种特异抗原CD20、BLyS/BAFF、CD40的混合液进行半量换液,同时,对步骤(3)中的原培养容器中补加培养液;(5)将DC和Treg细胞混合培养扩增;向步骤(3)中的新培养容器中加入TNF?α,同时,将新培养容器中的Treg细胞转入培养袋中培养,补加培养液,然后,用细胞刮刀刮下原培养容器中的DC细胞,加入到新培养容器中的Treg细胞中,并补加培养液进行混合扩增培养;(6)扩增后的细胞用生理盐水清洗,最后进行静脉滴注回输治疗红斑狼疮将所有的DC和CIK细胞离心后,用生理盐水离心清洗两次,然后,加入到注射用生理盐水中,补加10%人血白蛋白后进行静脉滴注回输治疗红斑狼疮。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:易银沙张万明朱海强邹义洲许澎李娜刘彩云袁炳秋吴小宁
申请(专利权)人:长沙赢润生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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