抗CGRP抗体和抗体片段用于在有需要的受试者、尤其是偏头痛患者中预防或抑制畏光或厌光的用途制造技术

本发明专利技术涉及使用抑制畏光、尤其是CGRP相关畏光的抗CGRP抗体或抗体片段在有需要的受试者中抑制或预防畏光的方法。这些抗体和片段可用于治疗不同的与畏光相关的病症如偏头痛、丛集性头痛等。本发明专利技术还提供使用转基因巢蛋白/Ramp1啮齿动物的测定法，其利用CGRP模型厌光行为模型来鉴定在有需要的受试者中抑制或预防畏光的治疗上有效的对CGRP具有结合特异性的抗CGRP抗体和其片段。本发明专利技术明确地涉及用于鉴定可用于治疗CGRP相关病症如偏头痛的治疗上有效的对CGRP具有结合特异性的抗体和其片段的方法。明确地说，本发明专利技术涉及使用本文所述用于抑制或预防畏光的抗体和其结合片段的测定法和疗法，所述抗体包含本文所述的VH、VL和CDR多肽的序列，以及编码其的多核苷酸。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CGRP抗体和抗体片段用于在有需要的受试者、尤其是偏头痛患者中预防或抑制畏光或厌光的用途相关申请本申请要求了 2011年6月14日提交的名称为“抗CGRP抗体和抗体片段用于在有需要的受试者、尤其是偏头痛患者中预防或抑制畏光的用途(USE OF ANT1-CGRPANTIBODIES AND ANTIBODY FRAGMENTS TO PREVENT OR INHIBIT PHOTOPHOBIA IN SUBJECTSIN NEED THEREOF, ESPECIALLY MIGRAINE) ” 的美国临时申请 N0.61/496，860 (代理人备案N0.67858.760000)以及2011年5月20日提交的名称为“抗CGRP组合物及其用途(ANT1-CGRPC0MP0SITIONS AND USE THEREOF) ”的美国临时申请 N0.61/488，660 (代理人备案N0.67858.730300)的权益，所述临时申请各自特此以全文引用的方式并入。本申请包含通过EFS-Web以ASCII格式提交的序列表并且特此以全文引用的方式并入。所述ASCII副本创建于2012年5月21日，命名为67858o730305.txt并且大小为203，941 字节。专利技术背景专利
本专利技术涉及以下发现:抑制CGRP/CGRP受体相互作用的多肽和/或特异性结合CGRP或CGRP受体的抗体和抗体片段当施用于有需要的受试者时可用于抑制CGRP诱发的畏光。用于本专利技术中的抑制CGRP/CGRP受体相互作用的多肽包括例如抑制CGRP与CGRP受体相互作用的对CGRP或CGRP受体以及CGRP或CGRP受体的片段或变体具有特异性的抗体和抗体片段。因为畏光为经常与包括例如偏头痛(有和无先兆)和其他头痛病状(以及下文公开的其他适应症)在内的许多病症相关的不良副作用，所以这些CGRP受体抑制剂，例如对CGRP或CGRP受体具有特异性的`抗体和抗体片段，应完全适于抑制经常与偏头痛和其他头痛病状相关的畏光以及适于治疗其他与畏光相关的病状。结果还表明，如果预防性地施用所述抗体，则这些抗体和抗体片段可用于在有需要的受试者、例如由于偏头痛(有或无先兆)、其他头痛病状、抑郁症、广场恐怖症或其他倾向于畏光的病状而具有慢性畏光病史的个体中预防畏光的发作。本专利技术涵盖这些抗CGRP抗体和抗体片段以单一疗法或与其他活性剂(例如，止痛剂、阿片类、抗抑郁剂或其他活性剂，取决于所治疗的病状和个体)一起的治疗方式的使用。本专利技术进一步提供在特定动物模型中筛选CGRP受体抑制剂、例如对人类降钙素基因相关肽(Calcitonin Gene Related P印tide，下文为“CGRP”)或CGRP受体具有结合特异性的抗CGRP或抗CGRP受体抗体和其片段(包括Fab片段)以测定其体内作用、最尤其是其拮抗CGRP的畏光副作用以及治疗涉及畏光的病状(包括例如偏头痛)的能力的方法。相关技术描述降钙素基因相关肽(CGRP)是以长度为37个氨基酸的多功能神经肽形式产生。两种形式的CGRP，即CGRP-α和CGRP-β形式，存在于人类中并且具有类似的活性。CGRP-a与CGRP-β在人类中相差三个氨基酸，并且是源自不同的基因。CGRP肽家族包括胰淀素(amyl in)、肾上腺髓质素(adrenomedullin)以及降钙素，但各自具有不同的受体和生物活性。Doods, H., Curr.0p.1nvest.Drugs, 2 (9): 1261-78 (2001)。CGRP是从众多组织如三叉神经中释放，当被活化时在脑膜中释放神经肽，从而介导神经源性炎症，其特征为血管舒张、血管渗漏以及肥大细胞退化。Durham, P.L.，New Eng.J.Med.，350(11):1073-75(2004)。CGRP 的生物作用是通过 CGRP 受体(CGRP-R)介导，该CGRP受体由七次跨膜成分结合受体相关膜蛋白(RAMP)组成。CGRP-R进一步需要受体成分蛋白(RCP)的活性，该受体成分蛋白(RCP)对于通过G蛋白与腺苷酸环化酶有效偶联以及cAMP 的产生是必要的。Doods, H.，Curr.0p.1nvest.Drugs, 2 (9): 1261-78(2001)。偏头痛构成影响美国约10%成年群体的神经血管病症，并且典型地伴随着剧烈的头痛。约20-30%的偏头痛患者经历先兆，包括先于事件和/或伴随事件的局灶性神经现象。认为CGRP在偏头痛发展中起到显著作用。例如，在偏头痛的头痛期间在颈静脉血中鉴定出血浆CGRP浓度升高，排除其他神经肽。此外，根据Arulmozhi等人，在偏头痛患者中鉴定出下列:⑴血浆CGRP浓度与偏头痛之间存在强相关性；(2)输注CGRP产生类偏头痛的头痛；(3)基线CGRP水平升高；以及(4)在偏头痛发作期间血浆CGRP水平的变化与头痛强度显著相关。Arulmozhi, D.K.等人，Vas.Pharma.，43:176-187 (2005)。另外，在 2011 年 6月06日在线公布的国际疼痛研究协会杂志(Journal of the International Associationfor the Study of Pain)PI1:S0304-3959(11)00313-7;do1:10.1016/j.pain.2011.04.033中，Hou等人报道了降钙素基因相关肽β的角化细胞表达对于神经性和炎症性疼痛机制有影响。一种有效的偏头痛治疗是施用曲坦类(triptans)，它们是基于色胺的药物家族，包括舒马曲坦(su matriptan)和利扎曲坦(rizatriptan)。这个家族的成员对包括5-HT1B、5-HT1D以及5-HT1f在内的多种5-羟色胺受体具有亲和力。这个家族成员的药物选择性地收缩脑血管，但也对冠状血管造成血管收缩作用。Durham，P.L.，New Eng.J.Med.，350(11): 1073-75(2004)。在确定患有心脏病的患者中在施用后存在冠状动脉痉挛的理论风险，并且在服用曲坦类后心脏事件可能很少发生。应注意，冠状动脉血管疾病患者 田类似地，通常可能通过施用某些麻醉剂或非留体抗炎药物(NSAID)来解决疼痛问题。然而，这些治疗的施用可能以某些负面后果为代价。NSAID有可能造成肾衰竭、肠道出血以及肝功能障碍。麻醉剂有可能造成恶心、呕吐、精神功能受损以及成瘾。因此，期望鉴定出替代的疼痛疗法以避免这些负面后果中的某些。除偏头痛以外，认为CGRP在包括但不限于其他头痛病状以及疼痛在内的许多疾病和病症中起作用。由于察觉到这些疾病和病症中涉及CGRP，因此本领域中需要可用于预防或治疗与CGRP相关的疾病和病症并且同时避免不良副作用的组合物和方法。本领域中特别需要降低或抑制与CGRP相关的疾病或病症如偏头痛、头痛以及疼痛中的畏光的组合物或方法。偏头痛患者当暴露于光时典型地产生疼痛和偏头痛恶化的症状，这种现象称为畏光。畏光在眼部病症如虹膜炎和葡萄膜炎以及颅内病症如脑膜炎中也是常见的。在经典的视觉通路中，光激活视网膜中的视杆细胞和视锥细胞，所述细胞激活视网膜神经节细胞，其通过视神经投射到外侧膝状核、上丘、然后视觉皮层。这本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在有需要的受试者中抑制畏光或厌光或阻止畏光或厌光的发作的方法，其包括施用有效量的抗CGRP抗体或抗体片段、抗CGRP受体抗体或片段、或包含CGRP或CGRP受体的片段的多肽，其中所述抗体或抗体片段或CGRP或CGRP受体的片段减少或预防CGRP相关的畏光或厌光。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.05.20 US 61/488,660;2011.06.14 US 61/496,8601.一种在有需要的受试者中抑制畏光或厌光或阻止畏光或厌光的发作的方法，其包括施用有效量的抗CGRP抗体或抗体片段、抗CGRP受体抗体或片段、或包含CGRP或CGRP受体的片段的多肽，其中所述抗体或抗体片段或CGRP或CGRP受体的片段减少或预防CGRP相关的畏光或厌光。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述被施用的分子包含抗CGRP抗体或抗体片段。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述被治疗的受试者罹患下列中的一种或多种:慢性偏头痛、偏瘫性偏头痛、丛集性头痛、偏头痛性神经痛、慢性头痛、紧张性头痛、一般性头痛、潮热、慢性阵发性半侧颅痛、由于头或颈中的潜在结构问题而致的继发性头痛、脑神经痛、窦性头痛、过敏症诱发的头痛、更年期偏头痛、月经期偏头痛、或头痛、无头痛的偏头痛、腹型偏头痛或其他偏头痛病状。4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述受试者具有选自以下的与畏光相关的眼部病症:色盲、无虹膜、由抗胆碱能药物造成的畏光、无晶状体(眼睛不存在晶状体)、牛眼(角膜与虹膜之间的异常窄角)、白内障、视锥细胞营养不良、先天性眼睛异常、病毒性结膜炎(“红眼病”)、角膜擦伤、角膜营养不良、角膜溃疡、角膜上皮破坏、晶状体异位、眼内炎、由疾病、损伤或感染引起的眼外伤如睑板腺囊肿、巩膜外层炎、青光眼、圆锥角膜、或视神经发育不良、水眼、或先天性青光眼、虹膜炎、视神经炎、色素播散综合征、瞳孔扩张(自然或化学诱导)、视网膜脱离、角膜或巩膜的疤痕以及葡萄膜炎。5.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述受试者具有选自以下的与畏光相关的神经系统相关或泌尿道病状:自闭症谱系障碍、Chiari畸形、诵读困难、脑炎(包括肌痛性脑脊髓炎，也被称为慢性疲劳综合征)、脑膜炎、蛛网膜下腔出血、后颅窝肿瘤、强直性脊柱炎、白化病、核黄素缺乏症、苯二氮革类(苯二氮簟类的长期使用或戒断)、化学疗法、基孔肯雅病、胱氨酸症、埃勒斯-当洛综合征、宿醉、流感、传染性单核细胞增多症、镁缺乏、汞中毒、偏头痛、狂犬病以及II型酪氨酸血症(也被称为“里奇纳-汉哈特综合征”)。6.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述受试者具有选自以下的畏光相关病症:偏头痛(有或无先兆)、虹膜炎、葡萄膜炎、脑膜炎、抑郁症、双相情感障碍、丛集性头痛或另一种三叉自主神经性头痛或眼睑痉挛、抑郁症、广场恐怖症或双相情感障碍。7.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述受试者罹患偏头痛。8.一种评估候选抗CGRP抗体或抗体片段、抗CGRP受体抗体或抗体片段或者CGRP或CGRP受体的片段用于治疗可通过施用与畏光相关的CGRP拮抗剂而治疗的病状的潜在体内功效的方法，其包括与在所述候选抗CGRP抗体或抗体片段不存在的情况下施用了 CGRP的啮齿动物相比，在施用了 CGRP的巢蛋白/Rampl啮齿动物中测定所述抗体或抗体片段是否抑制厌光行为。9.根据权利要求8所述的方法，其中这种测定法被用于评估所述抗体或抗体片段是否可用于治疗特征为CGRP水平增加的神经性病状。10.根据权利要求8所述的方法，其中这种测定法被用于评估所述抗CGRP抗体或抗体片段是否可用于治疗偏头痛、月经期偏头痛或慢性偏头痛。11.根据权利要求8所述的方法，其中这种测定法被用于评估所述抗CGRP抗体或抗体片段是否可用于治疗偏头痛(有或无先兆)、体重减轻、癌症或肿瘤、与癌症或肿瘤生长相关的血管生成、与癌症或肿瘤存活相关的血管生成、偏瘫性偏头痛、丛集性头痛、偏头痛性神经痛、慢性头痛、紧张性头痛、一般性头痛、无头痛的偏头痛、腹型偏头痛、潮热、慢性阵发性半侧颅痛、由于头或颈中的潜在结构问题而致的继发性头痛、脑神经痛、窦性头痛、过敏症诱发的头痛或偏头痛、疼痛、炎性疼痛、手术后切口疼痛、复杂区域性疼痛综合征、癌症疼痛、原发性或转移性骨癌疼痛、骨折疼痛、骨质疏松性骨折疼痛、由灼伤产生的疼痛、骨质疏松症、痛风性关节疼痛、与镰状细胞危象相关的疼痛和其他伤害性疼痛，以及肝细胞癌、乳腺癌、肝硬化、神经源性疼痛、神经性疼痛、伤害性疼痛、三叉神经痛、带状疱疹后神经痛、幻肢痛、纤维肌痛、经痛、卵巢痛、反射性交感神经营养不良、神经源性疼痛、骨关节炎或类风湿性关节炎疼痛、下背痛、糖尿病性神经病变、坐骨神经痛，或与以下相关的内脏疼痛:胃-食管反流、消化不良、肠易激综合征、炎症性肠病、克罗恩病、回肠炎、溃疡性结肠炎、肾绞痛、痛经、膀胱炎、月经期、分娩、更年期、前列腺炎或胰腺炎。12.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其包括施用用于治疗偏头痛的活性剂。13.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗CGRP抗体或抗体片段是以单一疗法施用。14.根据权利要求12所述的方法，其中所述抗体与另一种活性剂一起于相同或不同的组合物中施用。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述受试者为偏头痛患者并且所述疗法包括止痛剂、曲坦类、托吡酯、双氢麦角胺或阿片类。16.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段为特异性结合于完整 CGRP 多肽或其片段上与选自 Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、AblO、Abl1、Abl2、Abl3或Ab l4的抗人类CGRP抗体相同或重叠的线性或构象表位和/或竞争结合于完整 CGRP 多肽或其片段上与选自 Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab 10、Abll、Abl2、Abl3或Abl4的抗人类CGRP抗体相同或重叠的线性或构象表位的抗人类CGRP抗体或抗体片段。17.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段特异性结合于完整人类CGRP多肽或其片段上与Ab2、Ab3、Ab5、Ab6、Abl3或Abl4相同或重叠的线性或构象表位和/或竞争结合于完整人类CGRP多肽或其片段上与Ab2、Ab3、Ab5、Ab6、Abl3或Ab 14相同或重叠的线性或构象表位。18.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段特异性结合于完整人类CGRP多肽或其片段上与Ab2、Ab3、Ab5或Ab6相同或重叠的线性或构象表位和/或竞争结合于完整人类CGRP多肽或其片段上与Ab2、Ab3、Ab5或Ab6相同或重叠的线性或构象表位。19.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体片段选自Fab片段、Fab’片段或F (ab’)2片段。20.根据权利要求19所述的方法，其中所述片段为Fab片段。21.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段包含包括SEQID NO:25 的 CDRl 序列、SEQ ID NO:26 的 CDR2 序列以及 SEQ ID NO:27 的 CDR3 序列的可变轻链，和/或包括SEQ ID NO:28的CDRl序列、SEQ ID NO:29的CDR2序列以及SEQ IDNO:30的⑶R3序列的可变重链。22.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段包含包括SEQID NO:55 的 CDRl 序列、SEQ ID NO:56 的 CDR2 序列以及 SEQ ID NO:57 的 CDR3 序列的可变轻链，和/或包括SEQ ID NO:58的CDRl序列、SEQ ID NO:59的CDR2序列以及SEQ IDNO:60的⑶R3序列的可变重链。23.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段在所述可变轻链区和所述可变重链区中各包含至少2个互补决定区(CDR)，所述CDR与选自以下的抗人类 CGRP 抗体中所含的 CDR 相同:Abl、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab 10, AblUAbl2、Abl3 或Abl4。24.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段在所述可变轻链区和所述可变重链区中各包含至少2个互补决定区(⑶R)，所述⑶R与Ab2、Ab3、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Abl3 或 Abl4 中所含的 CDR 相同。25.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段为完全未糖基化的或缺乏N-糖基化或仅包含甘露糖残基。26.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段包含已被修饰以改变效应功能、半衰期、蛋白水解和/或糖基化的Fe区。27.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段为人源化、单链或嵌合抗体。28.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段特异性结合于表达CGRP的人类细胞和/或结合于体内循环的可溶性CGRP分子。29.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段包含选自以下的 Vh 多肽序列:SEQ ID N0:3、13、23、33、43、53、63、73、83、93、103、113、123 或 133，或其变体；并且进一步包含选自以下的八多肽序列:SEQ ID ΝΟ:1、11、21、31、41、51、61、71、81、91、101、111、121或131，或与其具有至少90%序列同一性的其变体，其中所述Vh或'多肽中的一个或多个框架(FR)或CDR残基已经被另一个氨基酸残基取代，产生特异性结合CGRP的抗CGRP抗体。30.根据权利要求29所述的方法，其中一个或多个所述FR残基被亲本兔抗CGRP抗体中相应位点处存在的氨基酸取代，所述Vh*'多肽中所含的互补决定区(CDR)已经源自所述亲本兔抗CGRP抗体；或被保守性氨基酸取代。31.根据权利要求30所述的方法，其中所述抗体或抗体片段为人源化的。32.根据权利要求30所述的方法，其中所述抗体或抗体片段为嵌合的。33.根据权利要求30所述的方法，其中所述抗体包含单链抗体。34.根据权利要求32所述的方法，其中所述嵌合抗体包含人类F。。35.根据权利要求34所述的方法，其中所述人类F。是源自IgGl、IgG2、IgG3或IgG4。36.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体或抗体片段抑制CGRP与CGRP-R和/或其多聚体、一种或多种另外的蛋白质以CGRP-CGRP-R复合物形式的缔合，和/或拮抗其生物效应。37.根据权利要求29所述的方法，其中所述抗体或抗体片段包含与其中所述的多肽序列中的两者具有至少90%或更大的同源性的多肽序列。38.根据权利要求29所述的方法，其中所述抗体或抗体片段包含与其中所述的多肽序列中的任一者具有至少95%或更大的同源性的多肽序列。39.根据权利要求29所述的方法，其中所述抗体或抗体片段以小于或等于...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·F·拉索，E·A·凯泽，A·雷科伯，A·库布拉斯，A·C·拉丹特，B·R·科瓦切维奇，J·A·莱瑟姆，J·T·L·史密斯，L·F·加西亚马丁内斯，
申请(专利权)人：奥尔德生物控股有限责任公司， 衣阿华大学研究基金会，
类型：发明
国别省市：美国;US