一种白芨环菠萝蜜烷型三萜的提取工艺及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种白芨环菠萝蜜烷型三萜的提取工艺及其应用。以白芨为原料，主要经过醇浸提，超声处理，渗漉，蒸发浓缩，石油醚萃取，硅胶柱层析分离，薄层层析检测以及结晶和重结晶等步骤，得到白芨环菠萝蜜烷型三萜的纯白色产物，纯度可高达99%。本发明专利技术的提取工艺简单，提取率高，可大规模生产。本发明专利技术首次公开了白芨环菠萝密烷型三萜的提取工艺，有助于进一步研究白芨胶作为血管栓塞剂的抗肿瘤机理。本发明专利技术提取的环菠萝密烷型三萜极有可能是一种潜在的抗癌小分子或血管生成抑制剂。

【技术实现步骤摘要】
一种白芨环菠萝蜜烷型三萜的提取工艺及其应用
本专利技术涉及一种以白芨为原料提取成分工艺，尤其涉及一种白芨环菠萝蜜烷型三萜的提取工艺及其应用，属于中医药
。
技术介绍
白芨(学名:Bletilla striata)是一种多年生草本球根植物，主要有收敛止血功效。在国内，多年来，白芨的主要用途是作为血管栓塞剂在肿瘤介入疗法中的应用，对于治疗原发性肝癌、移植性肝癌具有明显疗效并大量应用于临床实践。想要在分子水平上阐明白芨作为血管栓塞剂抑制肿瘤的分子机理，对白芨的生物学功能的研究最终必须深入到白芨化学组成的研究。但是，由于白芨的化学组成很复杂，目前在白芨及白芨胶中仍然存在还未被揭示新的化合物，对已发现的化合物的研究也不够深入。如果能够在白芨和白芨胶中找到抑制肿瘤生长和血管生成的小分子化合物，这将有助于在分子水平上阐明白芨及白芨胶作为血管栓塞剂在肿瘤介入疗法中的分子基础。白芨及白芨胶中抗肿瘤或抑制血管生成的的小分子化合物的研究，集中于白芨天然化学产物的研究。白芨天然化学产物的研究始于1983年，经历了三十年，国内外学者发现了众多的天然产物。由于白芨中含有大量多糖，在白芨天然化合物组成研究中，最引人关注的是白芨多糖的生物活性研究。但是，有研究表明，白芨多糖可促进人脐静脉内皮细胞粘连及生长，以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达,促进诱导性一氧化氮合酶(inducible nitricoxide synthase)。因此，白友多糖不是作为血管栓塞剂的白友胶中抑制肿瘤的天然小分子。那么，白芨及白芨胶中抑制肿瘤生长及血管生成的天然小分子化合物是什么呢？这是迄今为止一直没有解决的课题。白友三職类化合物的发现始于日本学者于1997年在Natural medicines (J NatMed)上发表的 I 篇简短论文 Yamaki M et al.The steroids and triterpenoids fromBletilla striata.Natural medicines, 1997，51 (5):493。论文仅有短短的 I 页，报道了白芨中有2种留体(steroids)类化合物和5种环菠萝密烷(又名:环阿屯烷，环阿尔廷烷等)型三職(triterpenoids),但未见对这5种三職化合物分离纯化及功能研究的详细报告
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，一方面，本专利技术的目的在于提供一种上述白芨环菠萝密烷型三萜的提取工艺，为白芨三萜化合物的深入研究提供前提条件。本专利技术的目的可通过以下方案来实现:(I)取白芨块根，粉碎，加醇浸湿，超声处理0.5~2h ;(2)将醇浸湿的白芨粉置于渗漉器中，再加入1.5~2.5倍体积的醇浸提和渗漉，7~10天后，收集渗漉液，蒸发浓缩，获得浸膏；(3)浸膏用蒸馏水混悬，得提取物混悬溶液，加入石油醚萃取；(4)将步骤(3)所得的石油醚萃取物进行硅胶柱色谱法分离，以石油醚/乙酸乙酷混合液作为洗脱溶剂梯度洗脱；(5)将步骤(4)所得洗脱液再次进行硅胶柱色谱法分离，以纯石油醚作为洗脱溶剂洗脱，洗脱液经蒸发浓缩后，得到略带黄色的白色粉状物；(6)将粉状物置于干净的烧杯中，加少量石油醚溶解，静置I~2天，待观察到黄色固体物吸附于烧杯壁和白色粉状物的表面时，用干净的刀片将黄色固体物小心刮去；(7)重复步骤(6)多次，直到最后不出现黄色固体物为止，即得到纯白色的目标产物。作为对上述技术方案的改进，其中所述醇为70~95%的乙醇。作为对上述技术方案的改进，所述步骤(2)中的醇浸湿的白芨粉在置于渗漉器之前，还经过70~90°C水浴加热I~3个小时，以加速白芨粉中有效活性成分的溶解。作为对上述技术方案的改进，在进行所述步骤(3)中的萃取之前，对提取物混悬溶液70~90°C水浴保温I~3个小时，以进一步加速白芨粉中有效活性成分的溶解；所述石油醚与提取物混悬溶液体积比为1:3~3:1，萃取次数为3~5次。作为对上述技术方案的改进，步骤(4)中所述石油醚/乙酸乙酯混合液中石油醚与乙酸乙酯的体积比为95:5。纯化的白芨三萜经质谱和核磁共振检测，发现其中的主要成分为如式I所示的化合物:本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种白芨环菠萝蜜烷型三萜的提取工艺，其特征在于包括以下步骤：（1）取白芨块根，粉碎，加醇浸湿，超声处理0.5～2h；（2）将醇浸湿的白芨粉置于渗漉器中，再加入1.5～2.5倍体积的醇浸提和渗漉，7～10天后，收集渗漉液，蒸发浓缩，获得浸膏；（3）浸膏用蒸馏水混悬，得提取物混悬溶液，加入石油醚萃取；（4）将步骤（3）所得的石油醚萃取物进行硅胶柱色谱法分离，以石油醚/乙酸乙酷混合液作为洗脱溶剂梯度洗脱;（5）将步骤（4）所得洗脱液再次进行硅胶柱色谱法分离，以纯石油醚作为洗脱溶剂洗脱，洗脱液经蒸发浓缩后，得到略带黄色的白色粉状物；（6）将粉状物置于干净的烧杯中，加少量石油醚溶解，静置1～2天，待观察到黄色固体物吸附于烧杯壁和白色粉状物的表面时，用干净的刀片将黄色固体物小心刮去；（7）重复步骤（6）多次，直到最后不出现黄色固体物为止，即得到纯白色的目标产物。

【技术特征摘要】
1.一种白芨环菠萝蜜烷型三萜的提取工艺，其特征在于包括以下步骤: (1)取白芨块根，粉碎，加醇浸湿，超声处理0.5~2h ; (2)将醇浸湿的白芨粉置于渗漉器中，再加入1.5~2.5倍体积的醇浸提和渗漉，7~10天后，收集渗漉液，蒸发浓缩，获得浸膏； (3)浸膏用蒸馏水混悬，得提取物混悬溶液，加入石油醚萃取； (4)将步骤(3)所得的石油醚萃取物进行硅胶柱色谱法分离，以石油醚/乙酸乙酷混合液作为洗脱溶剂梯度洗脱； (5)将步骤(4)所得洗脱液再次进行硅胶柱色谱法分离，以纯石油醚作为洗脱溶剂洗脱，洗脱液经蒸发浓缩后，得到略带黄色的白色粉状物； (6)将粉状物置于干净的烧杯中，加少量石油醚溶解，静置I~2天，待观察到黄色固体物吸附于烧杯壁和白色粉状物的表面时，用干净的刀片将黄色固体物小心刮去； (7)重复步骤(6)多次，直到最后不出现黄色固体物为止，即得到纯白色的目标产物。2.如权利要求1所述的白芨环菠萝蜜烷型三萜的提取工艺，其特征在于:所...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘明志，
申请(专利权)人：惠州学院，
类型：发明
国别省市：