仙茅多糖及其衍生物的一种新用途制造技术

本发明专利技术仙茅多糖及其衍生物的一种新用途，是将仙茅多糖及其衍生物用于制备抗癌化疗药物的增效药剂和抗癌化疗药物的减毒药剂。在与抗癌化疗药物同时使用时，能延长癌症患者的生命和减少病人的痛苦，为仙茅多糖及其衍生物的应用开辟了一个新的途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及仙茅科植物仙茅根茎的提取物专利技术，将仙茅多糖及其衍生物用于制备抗癌化疗药物的增效药剂和抗癌化疗药物的减毒药剂。
技术介绍
恶性肿瘤严重危害人类生命及健康，其死亡率位居人类疾病死亡人数的第二位。外科手术、化疗和放疗是肿瘤的三大手段。外科手术仅仅用于某些局部肿瘤的切除，但手术易引起肿瘤的复发。化疗是目前肿瘤治疗主要手段之一，然而化疗常引起如骨髓抑制、免疫力低下等毒副反应，使患者难以坚持治疗。如何增加药物抗肿瘤活性，同时降低其毒副作用是提高化疗效果的关键。目前，临床上采用的肿瘤化疗辅助药包括钙离子通道阻滞剂，免疫抑制剂等，这些成分虽能不同程度提高化疗药物疗效，但也存在较大毒副作用。而一些多糖类成分，由于它们具有一定抗肿瘤作用，同时相对毒性较低，被认为是较好的化疗辅助药物。因此，研究中药多糖在抗肿瘤和增效减毒方面作用有广阔的发展前景。中药多糖无毒副作用，是一类有很大开发潜力的免疫调节剂。仙茅orchioides Gaertn),为仙茅科仙茅属植物仙茅的根莖，民间用于跌打损伤。风湿关节炎、急性肾炎、水肿、结石等。是临床常用的中药，临床常用于治阳萎精冷，小便失禁，崩漏，心腹冷痛，腰脚冷痹，痈疽，瘰疬，阳虚冷泻等。关于仙茅多糖的文献报道不多(季春.仙茅多糖COPb-1和COPf-1的分离纯化及结构研究.贵州化工，2005，30 (I): 17-19;周勇，张丽，赵离原，等.仙茅多糖对小鼠免疫功能调节作用实验研究.上海免疫学杂志，1996，16 (6): 336-338 ;余晓红.仙茅多糖对小鼠免疫功能影响的实验研究.海峡药学，2011，23 (3): 33-35)。我们课题组在前期抗肿瘤药物的筛选中发现仙茅多糖与化疗药物联用，具有抗肿瘤作用增强和较强的减毒、增效作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于研究仙茅多糖对抗癌化疗药物的增效和减毒作用，从而制备一种辅助药剂，为癌症患者延长生命和减少痛苦做贡献，并为仙茅多糖及其衍生物的应用开辟一个新的途径。本专利技术是这样构成的:仙茅多糖及衍生物的制备方法:从植物仙茅中提取、分离和精制得到的粗多糖，以及组成它的COP-1 C0P-3 二种纯多糖物质。具体的制备方法是，由仙茅的根茎中提取分离仙茅多糖，其步骤如下:a.粗多糖的提取制备:仙茅根茎用酒精回流除杂，经蒸馏水热提，提取物醇沉后可得仙茅粗多糖。b.多糖的纯化和精制:将步骤a中提取制备得到的粗多糖经DEAE-纤维素柱层析以及Sephacryl S-300 HR柱层析后得仙茅多糖的纯物质C0PfC0P-3。本专利技术中，将得到的仙茅多糖进行硫酸化、羧甲基化和降解，从而得到仙茅多糖的衍生物。所述仙茅多糖及其衍生物与抗癌化疗药配合使用，具有对抗肿瘤药物作用增强和较强的减毒、增效作用。所述仙茅多糖及其衍生物的应用:将仙茅多糖及其衍生物制备成适宜的给药剂型，应用在制备对抗癌化疗药物具有增效减毒作用的药物中。本专利技术中:对化疗药物具有增效减毒作用的仙茅多糖及其衍生物，包括仙茅粗多糖、纯多糖组份及其硫酸化、羧甲基化和降解产物。 将仙茅多糖经硫酸化、羧甲基化和降解后可得其相应衍生物。将仙茅多糖及其衍生物应用在对抗癌化疗药物具有增效减毒作用的药物制备中。其使用方式可以是口服、静脉注射、输液等，可以是片剂、胶囊、粉针、注射液、大输液等适宜的给药剂型，其中也可使用惰性辅加剂和赋形剂。本专利技术，其特征是指仙茅多糖及其衍生物用于制备抗癌化疗药物的增效药剂和抗癌化疗药物的减毒药剂，所指仙茅多糖衍生物是指仙茅多糖硫酸化、羧甲基化及降解而得到的化合物。上述所指抗癌化疗药物是指环磷酰胺CTX，五氟尿嘧啶5-FU，阿霉素ADM，顺钼或斑蝥酸钠。上述所指药剂是将仙茅多糖及其衍生物制备成任何一种药剂学上所述的剂型。如将仙茅多糖及其衍生物制备成糖浆、片剂、胶囊、粉针、注射液或大输液，其中可使用惰性辅助剂和赋形剂。上述所指制备抗癌化疗药物的增效药剂和减毒药剂是指仙茅多糖与抗癌化疗药物环磷酰胺CTX，五氟尿嘧啶5-FU，阿霉素ADM，顺钼或斑蝥酸钠同时使用时，能提高药物的抗肿瘤作用和降低药物的毒副作用。本专利技术为仙茅多糖及其衍`生物的应用开辟了一个新的途径。本专利技术研究发现仙茅多糖对抗癌化疗药物有增效和减毒作用，并制备成相应的辅助药剂，为癌症患者延长生命和减少痛苦做出贡献。本专利技术相对于目前临床上采用的肿瘤化疗辅助药包括钙离子通道阻滞剂、免疫抑制剂等，可以认为无任何毒副作用。本专利技术仙茅多糖及其衍生物相对于其他抗癌化疗增效减毒药剂更易提取、成本低。本专利技术通过动物试验，充分证明了仙茅多糖及其衍生物对抗癌化疗药物的增效和减毒作用。【具体实施方式】实施例一、仙茅粗多糖的制备 干燥仙茅根茎粉碎后，80%乙醇回流提取后的残渣挥去乙醇后，加入10倍蒸馏水沸水浴提取3次(每次2h)，合并提取液后浓缩(取少量提取液在200-800nm全波长扫描，样品在280nm处无吸收，说明不含蛋白，省去除蛋白步骤)。浓缩液加入95%乙醇至含醇量达80%，冰箱静置过夜。过滤，残渣先后用95%乙醇，无水乙醇，丙酮依次洗涤后，60°C真空干燥得仙茅粗多糖。实施例二、仙茅多糖纯组分的制备 取仙茅粗多糖10g，加入IOOmL蒸馏水溶解后，进行DEAE-纤维素柱层析，分别用蒸馏水、0.1mol/L、0.2mol/L、0.5molL、l.0mol/L的氯化钠溶液洗脱,洗脱液分部收集,硫酸-苯酚法检测。结果在蒸馏水及0.1 mOl/L、0.2mOl/L的氯化钠溶液洗脱部分检测到多糖。多糖高峰部分合并,浓缩,透析脱盐,进一步用Sepharose CL-6B和Sephacryl S-300 HR凝胶柱纯化，用0.2 mol 氯化钠溶液洗脱，检测方法同上。收集多糖高峰部分，真空干燥得到COP-1~C0P-3三个纯级分。实施例三、仙茅多糖衍生物的制备 1、仙茅多糖的硫酸化:在室温条件下，无水吡啶中，单一纯多糖与氯磺酸反应后，经碱中和，透析、冻干可得硫酸化仙茅多糖。2、仙茅多糖的羧甲基化:在NaOH水溶液中，单一纯多糖与氯乙酸反应后，经酸中和，透析、冻干可得羧甲基化仙茅多糖。3、仙茅多糖的降解产物:在仙茅多糖的水溶液中，加入酶或稀酸水解得到的产物。实施例四、仙茅多糖对环磷酰胺(CTX)的增效作用 昆明种小鼠72只，雌雄各半，体重18-22g，将小鼠适应性饲养3d后，接种S18tl实体瘤24h后将小鼠随机分为空白组(给予生理盐水)、CTX组(100mg/kg )、仙茅多糖组(IOOmg/kg)、CTX组+仙茅多糖低(50 mg/kg)、中(100mg/kg)、高(200 mg/kg)三个剂量组。仙茅多糖按体重0.2 mL/10g灌胃给药，I次/d，CTX腹腔注射给药0.1 mL/10g,注射一次。连续给药10 d，末次给药24 h后，取出肿瘤称重并计算抑瘤率: 抑瘤率=(空白组瘤重-给药组瘤重)/空白组瘤重X 100% 表1结果显示，空白组小鼠的平均`瘤重达1.23g，其余各组的平均瘤重极显著低于空白组(/X0.01)，说明模型建立成功。与单纯使用CTX组比较，CTX与仙茅多糖低、中剂量联用组的抑瘤率无统计学差异，而高剂量组抑瘤率显著高于单用CTX组，说明仙茅多糖具有提高CTX的抗肿瘤作用，且存在一定的本文档来自技高网...

【技术保护点】
仙茅多糖及其衍生物的一种新用途，其特征是指仙茅多糖及其衍生物用于制备抗癌化疗药物的增效药剂和抗癌化疗药物的减毒药剂，所指仙茅多糖衍生物是指仙茅多糖硫酸化、羧甲基化及降解而得到的化合物。

【技术特征摘要】
1.仙茅多糖及其衍生物的一种新用途，其特征是指仙茅多糖及其衍生物用于制备抗癌化疗药物的增效药剂和抗癌化疗药物的减毒药剂，所指仙茅多糖衍生物是指仙茅多糖硫酸化、羧甲基化及降解而得到的化合物。2.根据权利要求1所述的仙茅多糖及其衍生物的一种新用途，其特征是所指抗癌化疗药物是指环磷酰胺CTX，五氟尿嘧啶5-FU，阿霉素ADM，顺钼或斑蝥酸钠。3.根据权利要求1所述的仙茅多糖及其衍生物的一种新用途，其特征是将仙茅多糖及其衍生物制备成任何一...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨娟，姚佳，彭梅，张振东，
申请(专利权)人：贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，
类型：发明
国别省市：