一种甘草酸衍生物的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种甘草酸衍生物的检测方法，属于物理分析检测领域范畴。本发明专利技术所建立的高效液相色谱梯度洗脱法同时检测甘草次酸、乙酰甘草次酸、甘草酸酯等，具有良好的精密度、重现性、可靠性，方法先进简单，可以同时测定多种甘草酸衍生物的纯度，能够安全、有效、全面的控制甘草酸衍生物的质量。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术提供了，属于物理分析检测领域范畴。本专利技术所建立的高效液相色谱梯度洗脱法同时检测甘草次酸、乙酰甘草次酸、甘草酸酯等，具有良好的精密度、重现性、可靠性，方法先进简单，可以同时测定多种甘草酸衍生物的纯度，能够安全、有效、全面的控制甘草酸衍生物的质量。【专利说明】
本专利技术涉及一种甘草酸衍生物多种成分的高效液相色谱检测方法，属于物理分析检测领域范畴。
技术介绍
甘草为多年生草本植物甘草(Glycyrrhiza urlensis Fisch.)的根及根莖,性味甘平，归心、肺、脾、胃经，是临床上常用的药材之一，具有“十方九草”的美称。药理研究表明甘草具有补脾益气、润肺止咳、通经脉、利气血、清热解毒、止血祛痰润肺的功效，临床上被广泛地用于治疗胃溃疡和十二指肠溃疡、咽喉肿痛、支气管炎、咳嗽、关节炎、过敏等疾病及用于保肝、降血脂、抗癌、抗干扰素诱生及增强细胞免疫调节等。甘草酸(glycyrrhizicacid,GA)是甘草中最重要的有效成分之一，具有解毒、消炎、抗氧化、抗过敏、抗肿瘤以及增强免疫等多种药理活性。但游离GA的水溶性较差，需制成有关衍生物后药用。而由GA制得的衍生物主要包括甘草甜素(glycyrrhizic,GL)、甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GAS)以及酸化甘草次酸(acyl glycyrrhetinic acid, AGA)。本实验室在研究过程中，对甘草酸进行处理，获得了甘草酸衍生物:甘草酸单糖苷、甘草次酸、乙酰甘草次酸以及甘草酸酯。本专利技术在甘草酸甜素的液相色谱条件的基础上进行改进，建立的一种甘草酸衍生物通用的高效液相色谱检测方法，用于检测区别不同的甘草酸衍生物和含量。本方法简便快捷，精密度好，重现性好，具有很强的实用性。在已经公开的文献与专利中，都是关于甘草酸及其衍生物的制备与应用、研究进展和药理活性研究的描述，未发现与本专利技术相关或类似的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种测定多种甘草酸衍生物纯度的方法，本方法相对简单，具有良好的精密度、重现性和可靠性，通用于测定多种甘草酸衍生物成分的纯度及含量，可用于甘草酸衍生物的质量控制。本专利技术提供一种甘草酸衍生物的高效液相检测方法，该方法包括以下步骤:(I)色谱条件:室温，相对湿度25?40% ;以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以30?90%乙腈溶液为流动相A，以0.0lmol/L磷酸水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速:0.8?1.2ml/min，柱温25?40°C，检测波长250?257nm。【权利要求】1.，其特征在于该方法如下: 色谱条件:室温，相对湿度25~40% ;以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以30~90%乙腈溶液为流动相A，以0.01mol/L磷酸水为流动相B ;按下表中的规定进行梯度洗脱；流速:0.8 ~1.2ml/min,柱温 25 ~40°C。 称取甘草酸衍生物适量，加入适量甲醇，制成每Iml含0.5~2mg的溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图。2.根据权利要求1所述的的检测方法，其特征在于梯度洗脱过程为--第0.01分钟，流动相A乙腈为30~40%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为60~70% ;第10~15分钟，流动相A乙腈为40~50%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为50~60 第15~25分钟，流动相A乙腈为50~55%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为45~50% ;第25~35分钟，流动相A乙腈为55~65%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为35~45%;第35~50分钟，流动相A乙腈为65~85%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为15~35%;第50~60分钟，流动相A乙腈为85~90%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为10~15%。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于供试品溶液的制备方法为:称取甘草酸衍生物适量，加入适量甲醇，超声溶解5~20分钟，放冷，配制成每Iml含0.5~2mg的溶液。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于高效液相色谱的进样量为10或20 μ 1，优选为 20 μ I。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于色谱条件中室温优选为20°C，相对湿度优选为35%，柱温为30°C。6.根据权利要求2所述的的检测方法，其特征在于梯度洗脱过程为:第0.01分钟，流动相A乙腈为35%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为65% ;第15分钟，流动相A乙腈为45%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为55% ;第25分钟，流动相A乙腈为55%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为45%;第35分钟，流动相A乙腈为65%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为35% ;第50分钟，流动相A乙腈为85%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为15% ；第60分钟，流动相A乙腈为90%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为10%。7.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于供试品溶液制备中的超声处理为10分钟，制成每Iml含Img的溶液。【文档编号】G01N30/36GK103529151SQ201210228702【公开日】2014年1月22日 申请日期:2012年7月4日 优先权日:2012年7月4日 【专利技术者】易铭, 杨永安, 钟慧, 金显友, 袁继文, 魏元刚, 黄全书, 季浩 申请人:江苏天晟药业有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甘草酸衍生物的检测方法，其特征在于该方法如下：色谱条件：室温，相对湿度25～40％；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以30～90％乙腈溶液为流动相A，以0.01mol/L磷酸水为流动相B；按下表中的规定进行梯度洗脱；流速：0.8～1.2ml/min，柱温25～40℃。称取甘草酸衍生物适量，加入适量甲醇，制成每1ml含0.5～2mg的溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：易铭，杨永安，钟慧，金显友，袁继文，魏元刚，黄全书，季浩，
申请(专利权)人：江苏天晟药业有限公司，
类型：发明
国别省市：