一种鹰嘴豆抑菌肽的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种鹰嘴豆抑菌肽的制备方法，包括：步骤1，将鹰嘴豆蛋白粉与水混合制成3～8重量%的悬浮液；步骤2，调整鹰嘴豆蛋白粉悬浮液的pH值为6.0～7.5，按每克鹰嘴豆蛋白粉加入3000-4000U复合酶形成酶解体系；步骤3，酶解体系在45～50℃的温度条件下反应1.0～1.5h，反应结束后立即将酶解体系温度升高至≥95℃灭酶10～15min，获得酶解产物；步骤4，对酶解产物离心分离，用超滤膜对上清液进行肽段截留，获得分子量在2kDa-6kDa之间的肽段体系；对肽段体系进行喷雾干燥得到鹰嘴豆抑菌肽。本发明专利技术的有益效果在于：生产成本较低、工艺操作简单，同时可使酶解产物中抑菌肽段产量提高。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，包括：步骤1，将鹰嘴豆蛋白粉与水混合制成3～8重量%的悬浮液；步骤2，调整鹰嘴豆蛋白粉悬浮液的pH值为6.0～7.5，按每克鹰嘴豆蛋白粉加入3000-4000U复合酶形成酶解体系；步骤3，酶解体系在45～50℃的温度条件下反应1.0～1.5h，反应结束后立即将酶解体系温度升高至≥95℃灭酶10～15min，获得酶解产物；步骤4，对酶解产物离心分离，用超滤膜对上清液进行肽段截留，获得分子量在2kDa-6kDa之间的肽段体系；对肽段体系进行喷雾干燥得到鹰嘴豆抑菌肽。本专利技术的有益效果在于：生产成本较低、工艺操作简单，同时可使酶解产物中抑菌肽段产量提高。【专利说明】
本专利技术涉及植物蛋白提取
，特别是涉及。
技术介绍
随着广大消费者对食品传统防腐剂抑菌效力、呈味特征及安全性的普遍认识，安全性与稳定性高、抑菌性与溶解性强并且抑菌范围广的天然防腐剂的发掘与开发引起了广大学者的广泛关注，尤其是抑菌肽类防腐剂。将鹰嘴豆蛋白粉作为营养滋补及药物配伍资源，已得到了广大消费者尤其是新疆少数民族居民的认可，以安全性普遍认知的鹰嘴豆蛋白作为肽源进行抑菌肽开发，可为鹰嘴豆蛋白副产物的应用及精深加工提供基础依据，辅助于防腐类食品添加剂市场开拓与品质升级。作为纯天然食品配料的植物蛋白，其水解液富含多种氨基酸和肽，可为食品带来不同的功能特征。目前应用于食品保鲜领域的抑菌肽主要以乳酸链球菌素为主，日本、韩国将多聚赖氨酸作为食品添加剂用于食品贮藏保鲜。基于天然防腐剂抑菌的广谱性能考虑，多种抑菌肽的开发与应用已得到广大学者的普遍关注，采用化学合成及基因工程的方法实施抑菌肽的制备最为常见，然而由于化学合成高成本低效率、基因工程表达系统不确定等问题的存在，限制了食品添 加剂类抑菌肽在食品加工中的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提出，以克服现有抑菌肽制备方法的不足，提高抑菌肽段的富集效果。为了解决上述技术问题，本专利技术采用了如下技术方案:一种鹰嘴豆(Cicerarietinum Linn.)抑菌肽的制备方法,包括以下步骤:步骤I，将过50~65目筛的鹰嘴豆蛋白粉与水混合制成3~8重量％的鹰嘴豆蛋白粉悬浮液，于35 °C下静置浸泡20~40min ；步骤2，调整鹰嘴豆蛋白粉悬浮液的pH值为6.0~7.5，按每克鹰嘴豆蛋白粉加入3000-4000U复合酶形成酶解体系，所述复合酶为胰蛋白酶与风味蛋白酶复合按重量比1:1~3混合形成的复合酶；步骤3，所述酶解体系在45~50°C的温度条件下密闭反应1.0~1.5h，反应结束后立即将酶解体系温度升高至> 95°C灭酶10~15min，获得酶解产物；步骤4，对所述酶解产物离心分离10~15min获得上清液和未水解蛋白沉淀，用截留量分别为6kDa和2kDa的超滤膜对上清液进行不同分子量肽段截留，获得分子量在2kDa-6kDa之间的肽段体系；对肽段体系进行喷雾干燥得到鹰嘴豆抑菌肽。如上所述的鹰嘴豆抑菌肽的制备方法，进一步，步骤2，调整鹰嘴豆蛋白粉悬浮液的pH值为6.3~7.0。如上所述的鹰嘴豆抑菌肽的制备方法，进一步，按每克鹰嘴豆蛋白加入粉3500-3800U复合酶形成酶解体系。如上所述的鹰嘴豆抑菌肽的制备方法，进一步，所述复合酶为胰蛋白酶与风味蛋白酶复合按重量比1:2混合形成的复合酶。如上所述的鹰嘴豆抑菌肽的制备方法，进一步，步骤3，所述酶解体系在45~50°C的温度条件下密闭反应1.2h。如上所述的鹰嘴豆抑菌肽的制备方法，进一步，反应结束后立即将酶解体系温度升高至95°C灭酶12min，获得酶解产物。如上所述的鹰嘴豆抑菌肽的制备方法，进一步，步骤4，对所述酶解产物离心分离的离心速度为1900~2200r/min。与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于:通过本专利技术方法制备抑菌肽，生产成本较低、工艺操作简单、设备及人力投资小、重复性好，减少了水资源的浪费与污染，同时可使酶解产物中抑菌肽段产量提高。通过本专利技术制得的抑菌肽不仅具有较为显著的抑菌效果而且安全营养，为天然保鲜剂的开发提供可靠的基料或配料，可以提高我国防腐剂产品的重量和安全性，适应天然食品添加剂市场发展的要求。此外，通过本专利技术方法制备的抑菌肽分子量分布集中，抑菌活性较强，食用安全性高。【具体实施方式】下面结合具体实施例对本专利技术作进一步详细描述，但不作为对本专利技术的限定。实施例1 将过60目筛的鹰嘴豆脱脂蛋白粉50g与950g水混合制成蛋白粉悬浮液，35°C下静置浸泡30min ;搅拌调整混合溶液的pH值为7.2，每克鹰嘴豆蛋白粉加入复合酶3500U(为胰蛋白酶与风味蛋白酶复合重量比为1:2的复合酶)，在50°C的温度条件下密闭反应1.5h，反应结束后立即将酶解体系温度升高至95°C灭酶15min终止反应；在2000r/min的条件下离心分离，获得上清液并弃除未水解蛋白沉淀，用截留量分别为6kDa和2kDa的超滤膜对上清液进行不同分子量肽段截留，获得分子量在2kDa_6kDa之间的肽段体系；对肽段体系进行喷雾干燥得到鹰嘴豆抑菌肽15.lg。实施例2将过60目筛的鹰嘴豆脱脂蛋白粉50g与950g水混合制成蛋白粉悬浮液，35°C下静置浸泡30min ;搅拌调整混合溶液的pH值为6.5，每克鹰嘴豆蛋白粉加入复合酶3500U(为胰蛋白酶与风味蛋白酶复合重量比为1:2的复合酶)，每克鹰嘴豆蛋白粉加入复合酶4000U(为胰蛋白酶与风味蛋白酶复合重量比为1:2的复合酶)，在45°C的温度条件下密闭反应1.0h，反应结束后立即将酶解体系温度升高至95°C灭酶IOmin终止反应；在2000r/min的条件下离心分离，获得上清液并弃除未水解蛋白沉淀，用截留量分别为6kDa和2kDa的超滤膜对上清液进行不同分子量肽段截留，获得分子量在2kDa_6kDa之间的肽段体系；对肽段体系进行喷雾干燥得到鹰嘴豆抑菌肽13.3g。实施例3将过60目筛的鹰嘴豆脱脂蛋白粉50g与950g水混合制成蛋白粉悬浮液，35°C下静置浸泡30min ;搅拌调整混合溶液的pH值为7.5，每克鹰嘴豆蛋白粉加入复合酶4000U(为胰蛋白酶与风味蛋白酶复合重量比为1:2的复合酶)，在48°C的温度条件下密闭反应1.5h，反应结束后立即将酶解体系温度升高至95°C灭酶IOmin终止反应；在2000r/min的条件下离心分离，获得上清液并弃除未水解蛋白沉淀，用截留量分别为6kDa和2kDa的超滤膜对上清液进行不同分子量肽段截留，获得分子量在2kDa_6kDa之间的肽段体系；对肽段体系进行喷雾干燥得到鹰嘴豆抑菌肽17.6g。实施例4将过60目筛的鹰嘴豆脱脂蛋白粉50g与950g水混合制成蛋白粉悬浮液，35°C下静置浸泡30min ;搅拌调整混合溶液的pH值为8.0，每克鹰嘴豆蛋白粉加入复合酶3800U(为胰蛋白酶与风味蛋白酶复合重量比为1:2的复合酶)，在50°C的温度条件下密闭反应1.0h,反应结束后立即将酶解体系温度升高至95°C灭酶IOmin终止反应；在2000r/min的条件下离心分离，获得上清液并弃除未水解蛋白沉淀，用截留量分别为6kDa和2kDa的超滤膜对上清液进行不同分子量肽段截留，获得分子量在2kDa_6kDa之间的肽段体系；对肽段体系进行喷雾干本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鹰嘴豆抑菌肽的制备方法，包括以下步骤：步骤1，将过50～65目筛的鹰嘴豆蛋白粉与水混合制成3～8重量%的鹰嘴豆蛋白粉悬浮液，静置浸泡20～40min；步骤2，调整鹰嘴豆蛋白粉悬浮液的pH值为6.0～7.5，按每克鹰嘴豆蛋白粉加入3000?4000U复合酶形成酶解体系，所述复合酶为胰蛋白酶与风味蛋白酶复合按重量比1:1～3混合形成的复合酶；步骤3，所述酶解体系在45～50℃的温度条件下密闭反应1.0～1.5h，反应结束后立即将酶解体系温度升高至≥95℃灭酶10～15min，获得酶解产物；步骤4，对所述酶解产物离心分离10～15min获得上清液和未水解蛋白沉淀，用截留量分别为6kDa和2kDa的超滤膜对上清液进行不同分子量肽段截留，获得分子量在2kDa?6kDa之间的肽段体系；对肽段体系进行喷雾干燥得到鹰嘴豆抑菌肽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：田洪磊，詹萍，程卫东，朱新荣，颜海燕，
申请(专利权)人：石河子大学，
类型：发明
国别省市：