用于刚地弓形虫感染和弓形体病的诊断和治疗的方法和蛋白抗原组合物技术

描绘了对来自病原体刚地弓形虫(T.gondii)的各种抗原所涉及的组合物、装置和方法，及其在各种诊断检验、疫苗和治疗剂中的用途。在特别优选的方面，抗原为免疫显性的，并且已定量和知道对于感染病原体群体的血清的相对反应性，和/或与疾病参数具有已知的关联。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于刚地弓形虫感染和弓形体病的诊断和治疗的方法和蛋白抗原组合物本申请要求于2010年12月23日提交的编号为61/426902的美国临时专利申请的优先权，其通过引用结合到本文中。专利
本专利
为涉及所选刚地弓形虫{Toxoplasma gondii)抗原的组合物和方法，特别是当其涉及它们在诊断和治疗组合物和方法中的用途时。专利技术背景 弓形体病是一种由胞内原生动物刚地弓形虫感染引起的流行病。该生物体具有复杂的生命周期，涉及第一宿主和第二宿主两者。第一宿主为猫科(Felidae)家族成员，包括家猫，其可经由在第一宿主的排泄物中释放的刚地弓形虫卵母细胞将该生物体传递给人。除了人外，该生物体还感染广泛的各种第二宿主，并且这些宿主可经由摄食包含速殖子的组织包囊将刚地弓形虫传递给人。Tenter和Weiss (Tenter, A.Μ., Heckeroth, A.R.和Weiss, L.Μ.2000.Toxoplasma gondi1: from animals to humans (刚地弓形虫:从动物到人)〃.International Journal for Parasitology.30:1217-1258)估算，约三分之一的世界人口暴露于该寄生虫中。感染从急性阶段开始，其可引起流感样症状，并且在一些个体中可发展至慢性阶段，在该阶段该生物体逃避宿主免疫系统的检查。尽管感染刚地弓形虫可为基本无症状的，但免疫功能低下个体的感染可导致严重疾病和死亡。此外，孕妇感染可导致严重的出生缺陷。存在对刚地弓形虫进行有限分析的测定法，并且通常涉及对该生物体的宿主抗体而非直接检测寄生虫本身。一个实例为Sabin-Feldman Dye Test检验,其间接地检验宿主对寄生虫的抗体的存在。然而，由于对培养生物体和高水平技术能力的需求,该检验仅用于少数专门的诊断实验室。CA1206904描述了利用用源自寄生虫的抗原制备物划破患者的迟发型超敏反应检验。US3914400`、EP72319B1和EP328588B1描述了针对对刚地弓形虫的宿主抗体的基于凝集的测定法。这样的测定法通常依赖于高技术的个人进行检验和人工评估结果。用于诊断目的，还使用针对刚地弓形虫特异性抗体的更迅速、用户友好和客观的ELISA，但针对适当抗原的提供急性和慢性弓形体病灵敏而精确的检测的抗体的鉴定仍旧是个挑战。EP353111A1公开了刚地弓形虫抗原P30，其具有用于该生物体的诊断效用。US6326008B1、EP748815B1、EP748816B1、EP751147B1 和 EP431541B1 同样描述了用于鉴定该生物体感染的特异性抗原。JP11225783A和EP2062913B1公开了可用于诊断弓形体病和允许区分急性和慢性感染的特异性抗原。相似地，US20030119053A1公开了多组特异的刚地弓形虫抗原，宿主IgG和IgM对其的反应可用于鉴别该寄生虫的急性和慢性感染。测定指示急性或慢性感染的刚地弓形虫抗原的努力已利用来自感染个体的抗体作为特异探针。US6326008B1和EP301961B1描述了应用使用免疫血清的免疫沉淀法鉴定与急性和慢性弓形体病有关的刚地弓形虫抗原。EP2062913B1描述了使用来自患有急性感染的个体的血清鉴定有限数目的携带通过刚地弓形虫cDNA的噬菌体展示所产生的抗原的噬斑。W02011084044A1公开了通过使用2D电泳分离随后通过使用免疫血清的蛋白质印迹鉴定具有不同类型感染的个体的宿主和刚地弓形虫蛋白特征。然而，当前允许快速筛查大量潜在抗原的高通量蛋白组学研究方法还未用于分析刚地弓形虫。不幸地是，当前的检验方法仅产生部分有用的结果，检验性能有很大差异，并且结果太开放从而引起误解。例如，其可指示暴露于刚地弓形虫，但不提供关于所述暴露为当前还是过去的信息。此外，刚地弓形虫-特异性的IgM可持续长达最初感染日期后两年。最后，大多数当前的检验还需要复杂的次级检验程序以提供有用的诊断信息。免疫功能低下个体中的刚地弓形虫感染提供甚至更多的挑战，这是因为其对感染的抗体反应可与一般群体显著不同。例如，IgG (在许多当前的检验中检测的免疫球蛋白种类)的浓度在ADIS个体中常常很低以致其经常落在检测的界限以下。此外，在妊娠期间怀疑急性刚地弓形虫感染的情况下准确的确定尤为重要，这是因为是否终止妊娠的决定将依靠准确的诊断。还应指出的是，研究者并未忽略引起宿主免疫反应的刚地弓形虫抗原可具有治疗用途。US6902926B1、EP748816B1、EP751147B1和EP431541B1描述了使用免疫血清鉴定可在对该寄生虫的疫苗中具有效用的刚地弓形虫抗原。所以，仍然存在巨大的、未满足的需要，为刚地弓形虫相关的诊断和治疗应用提供抗原和抗体检测和监测的改进组合物和方法。专利技术简述 使用蛋白质组-微阵列方法描绘感染期间对数千种不同的刚地弓形虫蛋白的抗体反应，其目的为鉴定(I)区分非感染和感染病例的新型IgG和IgM靶抗原、(2)在急性感染中高但其后下降的IgM靶抗原和(3)在急性感染中低但在具有持久IgM的慢性感染中高的IgG靶抗原。为了达到这样的目的，利用蛋白质微阵列用来自弓形体病病例和对照的106个良好表征的血清筛查1，357个优先的刚地弓形虫外显子产物。鉴定了使用常规方`法不能识别的众所周知的抗原和新型抗原。令人惊讶地是，不只鉴定出与刚地弓形虫感染特异性相关的IgG和IgM靶抗原，还选出了可区分I)急性感染宿主、2)具有持久IgM的慢性感染宿主和3)真正的慢性感染宿主的刚地弓形虫抗原。鉴定出的靶抗原包括:TGME49_000470_1、TGME49_001390_1、TGME49_004130_13、TGME49_005300_6、 TGME49_005360_14、 TGME49_005740_9、 TGME49_012300_5、TGME49_013340_4、TGME49_014610_11、TGME49_014760_2、TGME49_016180_1、TGME49_016380_13、 TGME49_016380_5、 TGME49_021310_9、 TGME49_023540_10、TGME49_023540_5、 TGME49_024190_10、 TGME49_024920_4、 TGME49_025320_5、TGME49_026020_8、 TGME49_026I10_4、 TGME49_026730_9、 TGME49_027620_2、TGME49_031430_2、 TGME49_033710_4、 TGME49_034410_17、 TGME49_035020_9、TGME49_035160_2、 TGME49_035660_1、 TGME49_037150_5、 TGME49_040870_16、TGME49_042790_18、 TGME49_043580_U TGME49_044040_8、 TGME49_044080_3、TGME49_044280_1、 TGME49_045500_3、 TGME49_046330_5、 TGME49_046340_2、TGME49_047370_4、 T本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗原组合物，其包含：与载体联合的抗体反应性抗原；其中所述抗原已定量并且知道对于刚地弓形虫感染群体的血清的相对抗体反应性；其中所述抗原与疾病参数具有已知的关联；并且其中所述抗原选自：TGME49_000470_1、TGME49_001390_1、TGME49_004130_13、TGME49_005300_6、TGME49_005360_14、TGME49_005740_9、TGME49_012300_5、TGME49_013340_4、TGME49_014610_11、TGME49_014760_2、TGME49_016180_1、TGME49_016380_13、TGME49_016380_5、TGME49_021310_9、TGME49_023540_10、TGME49_023540_5、TGME49_024190_10、TGME49_024920_4、TGME49_025320_5、TGME49_026020_8、TGME49_026110_4、TGME49_026730_9、TGME49_027620_2、TGME49_031430_2、TGME49_033710_4、TGME49_034410_17、TGME49_035020_9、TGME49_035160_2、TGME49_035660_1、TGME49_037150_5、TGME49_040870_16、TGME49_042790_18、TGME49_043580_1、TGME49_044040_8、TGME49_044080_3、TGME49_044280_1、TGME49_045500_3、TGME49_046330_5、TGME49_046340_2、TGME49_047370_4、TGME49_047370_9、TGME49_048200_3、TGME49_048670_5、TGME49_048840_2、TGME49_048840_3、TGME49_054370_11、TGME49_054570_6、TGME49_057080_5、TGME49_057080_9、TGME49_057520_1、TGME49_058390_1、TGME49_058980_1、TGME49_059200_2、TGME49_061740_1、TGME49_062920_5、TGME49_063560_6、TGME49_064740_4、TGME49_066760_1、TGME49_067350_1、TGME49_068590_4、TGME49_068590_9、TGME49_070220_3、TGME49_070250_1、TGME49_070250_2、TGME49_072290_1、TGME49_073380_3、TGME49_074060_5、TGME49_074190_2、TGME49_078660_9、TGME49_085240_1、TGME49_085240_3、TGME49_086120_1、TGME49_086450_1、TGME49_088400_9、TGME49_088500_5、TGME49_089380_3、TGME49_089730_4、TGME49_090580_5、TGME49_090870_5、TGME49_090950_5、TGME49_092220_1、TGME49_095650_4、TGME49_097240_6、TGME49_099060_4、TGME49_099060_6、TGME49_100060_2、TGME49_100310_7、TGME49_101270_10、TGME49_105020_9、TGME49_105270_2、TGME49_105510_3、TGME49_105510_5、TGME49_109910_2、TGME49_112600_3、TGME49_113020_8、TGME49_114850_4、TGME49_118460_3、TGME49_16180_1、TGME49_PP2C?hn、TGME49_TLN_1及其片段。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.12.23 US 61/426,9021.一种抗原组合物，其包含: 与载体联合的抗体反应性抗原； 其中所述抗原已定量并且知道对于刚地弓形虫感染群体的血清的相对抗体反应性； 其中所述抗原与疾病参数具有已知的关联；并且其中所述抗原选自: TGME49_000470_1, TGME49_001390_1、 TGME49_004130_13、 TGME49_005300_6、TGME49_005360_14、 TGME49_005740_9、 TGME49_012300_5、 TGME49_0I3340_4、TGME49_014610_11、 TGME49_014760_2、 TGME49_016180_1、 TGME49_016380_13、TGME49_016380_5、TGME49_021310_9、TGME49_023540_10、TGME49_023540_5、TGME49_024190_10、 TGME49_024920_4、 TGME49_025320_5、 TGME49_026020_8、TGME49_026110_4、 TGME49_026730_9、 TGME49_027620_2、 TGME49—031430_2、TGME49_033710_4、 TGME49_034410_17、 TGME49_035020_9、 TGME49_035I60_2、TGME49_035660_U TGME49_037I50_5、 TGME49_040870_16、 TGME49_042790_18、TGME49_043580_1、TGME49_044040_8、TGME49_044080_3、TGME49_044280_1、TGME49_045500_3、 TGME49_046330_5、 TGME49_046340_2、 TGME49_047370_4、TGME49_047370_9、 TGME49_048200_3、 TGME49_048670_5、 TGME49_048840_2、TGME49_048840_3、 TGME49_054370_11、 TGME49_054570_6、 TGME49_057080_5、TGME49_057080_9、 TGME49_057520_1、 TGME49_058390_1、 TGME49_058980_1、TGME49_059200_2、 TGME49—06I740_1、 TGME49_062920_5、 TGME49_063560_6、TGME49_064740_4、 TGME49_066760_1、 TGME49_067350_1、 TGME49_068590_4、TGME49_068590_9、 TGME49_070220_3、 TGME49_070250_1、 TGME49_070250_2、TGME49_072290_1、 TGME4 9_073380_3、 TGME49_074060_5、 TGME49_074I90_2、TGME49_078660_9、 TGME49_085240_1、 TGME49_085240_3、 TGME49_086I20_1、TGME49_086450_1、 TGME49_088400_9、 TGME49_088500_5、 TGME49_089380_3、TGME49_089730_4、 TGME49_090580_5、 TGME49_090870_5、 TGME49_090950_5、TGME49_092220_1、 TGME49_095650_4、 TGME49_097240_6、 TGME49_099060_4、TGME49_099060_6、TGME49_100060_2、TGME49_100310_7、TGME49_101270_10、TGME49_105020_9, TGME49_105270_2, TGME49_105510_3、 TGME49_105510_5、TGME49_109910_2、 TGME49_112600_3、 TGME49_1I3020_8、 TGME49_114850_4、TGME49_118460_3、TGME49_16180_1、TGME49_PP2C_hn、TGME49_TLN_1 及其片段。2.权利要求1的抗原组合物，其中所述已知的反应性通过免疫原性的强度表征。3.权利要求1的抗原组合物，其中所述已知的反应性通过疾病的活性状态表征。4.权利要求1的抗原组合物，其中所述参数选自先前对病原体的暴露、对病原体暴露的持续时间、急性感染、慢性感染、无感染、对病原体感染的至少部分免疫以及对治疗的期望结果。5.权利要求1的抗原组合物，其中所述抗原在至少40%的暴露于所述抗原的群体中存在，并且任选其中在患者中针对所述抗原产生的抗体的平均结合亲和力和平均数量的至少一个在所述患者所产生的抗体的结合亲和力和数量的前四分之一中。6.权利要求1的抗原组合物，其中所述疾病参数为先前的刚地弓形虫感染，并且其中所述抗原选自:TGME49_000470_1、TGME49_001390_1、TGME49_004130_13、TGME49_005300_6, TGME49_005360_14、 TGME49_005740_9、 TGME49_0I2300_5、TGME49_013340_4、TGME49_014610_11、TGME49_014760_2、TGME49_016180_1、TGME49_016380_13、 TGME49_016380_5、 TGME49_021310_9、 TGME49_023540_10、TGME49_023540_5、 TGME49_024190_10、 TGME49_024920_4、 TGME49_025320_5、TGME49_026020_8、 TGME49_026I10_4、 TGME49_026730_9、 TGME49_027620_2、TGME49_031430_2、 TGME49_033710_4、 TGME49_034410_17、 TGME49_035020_9、TGME49_035160_2、 TGME49_035660_1、 TGME49_037I50_5、 TGME49_040870_16、TGME49_042790_18、 TGME49_043580_1、 TGME49_044040_8、 TGME49_044080_3、TGME49_044280_1、 TGME49_045500_3、 TGME49_046330_5、 TGME49_046340_2、TGME49_047370_4、 TGME49_047370_9、 TGME49_048200_3、 TGME49_048670_5、TGME49_048840_2、 TGME49_048840_3、 TGME49_054370_11、 TGME49_054570_6、TGME49_057080_5、 TGME49_057080_9、 TGME49_057520_1、 TGME49_058390_1、TGME49_058980_1、 TGME49_059200_2、 TGME49_06I740_1、 TGME49_062920_5、TGME49_063560_6、 TGME49_064740_4、 TGME49_066760_1、 TGME49_067350_1、TGME49_068590_4、 TGME49_068590_9、 TGME49_070220_3、 TGME49_070250_1、TGME49_070250_2、 TGME49_072290_1、 TGME49_073380_3、 TGME49_074060_5、TGME49_074190_2、 TGME49_078660_9、 TGME49_085240_1、 TGME49_085240_3、TGME49_086120_1、 TGME49_086450_1、 TGME49_088400_9、 TGME49_088500_5、TGME49_089380_3、 TGME49_089730_4、 TGME49_090580_5、 TGME49_090870_5、TGME49_090950_5, TGME49_092220_1、 TGME49_095650_4、 TGME49_097240_6、TGME49_099060_4、 TGME49_099060_6、 TGME49_100060_2、 TGME49_100310_7、TGME49_101270_10, TGME49_105020_9、 TGME49_105270_2、 TGME49_105510_3、TGME49_105510_5、 TGME49_109910_2、 TGME49_1I2600_3、 TGME49_1I3020_8、TGME49_114850_4、TGME49_118460_3、TGME49_16180_1、TGME49_PP2C_hn、TGME49_TLN_1 及其片段。7.权利要求1的抗原组合物，其中所述疾病参数为急性刚地弓形虫感染，并且其中所述抗原选自:TGME49_001390_1、TGM`E49_004130_13、TGME49_012300_5、TGME49_014760_2、TGME49_016380_13、 TGME49_023540_5、 TGME49_024190_10、 TGME49_024920_4、TGME49_026730_9、 TGME49_027620_2、 TGME49_031430_2、 TGME49_033710_4、TGME49_034410_17、 TGME49_037150_5、 TGME49_040870_16、 TGME49_042790_18、GME49_044080_3、 TGME49_044280_1、 TGME49_045500_3、 TGME49_046330_5、TGME49_047370_9、 TGME49_048840_2、 TGME49_048840_3、 TGME49_054570_6、TGME49_057080_5, TGME49_06I740_1、 TGME49_064740_4、 TGME49_068590_9、TGME49_070220_3、 TGME49_078660_9、 TGME49—086I20_1、 TGME49_086450_1、GME49_088500_5、 TGME49_...

【专利技术属性】
技术研发人员：DH戴维斯，梁小武，P费尔格纳，
申请(专利权)人：英珀特疗法有限公司，
类型：
国别省市：