硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的制备方法以及用于多种肿瘤细胞检测的方法，涉及一种制备硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料及其方法。本发明专利技术利用化学沉积法实现了纳米阵列材料的制备，利用静电作用实现了纳米材料的修饰和组装，最后将合成的纳米阵列材料应用于癌细胞的生物传感器的制备，实现了对肝癌细胞的灵敏检测，具有操作简单、反应速度快、效果好、选择性强、成本低等优点。该方法还可以通过改变修饰的抗体种类实现对多种肿瘤细胞的检测，可用于科研方面和临床医学方面，尤其是在生物分析领域，肿瘤细胞检测等方面有很强的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】，涉及一种制备硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料及其方法。本专利技术利用化学沉积法实现了纳米阵列材料的制备，利用静电作用实现了纳米材料的修饰和组装，最后将合成的纳米阵列材料应用于癌细胞的生物传感器的制备，实现了对肝癌细胞的灵敏检测，具有操作简单、反应速度快、效果好、选择性强、成本低等优点。该方法还可以通过改变修饰的抗体种类实现对多种肿瘤细胞的检测，可用于科研方面和临床医学方面，尤其是在生物分析领域，肿瘤细胞检测等方面有很强的应用前景。【专利说明】
本专利技术涉及一种制备硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料及其方法，以及将该材料应用于检测H印G2肝癌细胞(或者其他目标肿瘤细胞)的方法。
技术介绍
氧化锌是一种重要的宽禁带半导体材料，具有良好的光学和电学性质，在传感器等高科技领域具有广泛的应用前景。有序氧化锌纳米阵列因其较高的比表面积及较快的电子传输能力，是理想的光学材料。硫化镉是另外一种常用的半导体材料，具有良好的光电性质，可用于电致化学发光免疫分析之中。癌症是威胁人类生命的重要疾病之一，而肝癌是癌症中较为常见的一种，因此如何早期检测和诊断肝癌成为全世界的研究热点之一。目前医院里面采取的检测手段多为酶联免疫分析方法，该方法通过检测肿瘤细胞标志物间接检测肿瘤细胞，因此灵敏度较低，难以早期发现并防治。国内外的科学家尝试多种方法检测癌细胞，希望实现提高灵敏度，达到早发现早治疗的目的，方法包括化学发光方法、融出伏安法和计时电流法等。然而，上述方法通常具有分析检测时间长、操作繁琐等缺点。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供一种硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的制备方法以及基于该纳米复合材料的高灵敏检测癌细胞的方法，该方法具有操作简单、反应速度快、效果好、选择性高和成本低等优点。本专利技术按照如下步骤制备硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料: (1)纳米氧化锌阵列材料的合成:以水热法制备ZnO纳米棒阵列修饰的ITO电极； (2)硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的合成:将清洗好的纳米氧化锌阵列材料分别依次浸入到1-1.5 mL的硫化钠溶液(浓度为0.2 mol/mL)和1-1.5mL氯化镉溶液(浓度为0.2 mol/mL)，每次加入试剂后反应时间为:1-5分钟，去离子水冲洗，备用，即得具有硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的ITO电极。本专利技术按照如下步骤检测癌细胞: (1)纳米氧化锌阵列材料的合成:以水热法制备ZnO纳米棒阵列修饰的ITO电极； (2)硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的合成:将清洗好的纳米氧化锌阵列材料分别依次浸入到1-1.5 mL的硫化钠溶液(浓度为0.2 mol/mL)和1-1.5mL氯化镉溶液(浓度为0.2 mol/mL)，每次加入试剂后反应时间为:1-5分钟，去离子水冲洗，备用，即得具有硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的ITO电极； (3)金纳米粒子的合成:将1.00-1.5 mL、1-2 wt.%的柠檬酸钠溶液滴加到100-150mL、0.01-0.02 wt.%的氯金酸的沸腾溶液中，回流搅拌反应10-30分钟后，停止加热，在密封条件下，继续搅拌至恢复到室温，备用；(4)生物传感器的组装:将步骤(2)中得到的具有硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的ITO电极用去离子水冲洗，用氮气将该电极吹干；在其表面上滴加5-10微升的3-氨基丙基-三こ氧基硅烷的水溶液，置于氮气氛围中，1(T30分钟后，将步骤(3)中制备好的金纳米粒子1(T20微升滴加到已被APTES修饰好的ITO电极表面，置于氮气氛围内，反应0.5-1小时左右，将肿瘤细胞抗体修饰到电极的表面，置于37°C孵育箱中备用； (5)采用电致化学发光技术对癌细胞进行检测。本专利技术的方法重点在于利用化学沉积法实现了纳米阵列材料的制备，利用静电作用实现了纳米材料的修饰和组装，最后将合成的纳米阵列材料应用于癌细胞的生物传感器的制备，实现了对肝癌细胞的灵敏检测，具有操作简单、反应速度快、效果好、选择性强、成本低等优点。该方法还可以通过改变修饰的抗体种类实现对多种肿瘤细胞的检测，可用于科研方面和临床医学方面，尤其是在生物分析领域，肿瘤细胞检测等方面有很强的应用前【专利附图】【附图说明】图1为H印G2细胞检测曲线，其中:X轴细胞浓度的对数值，Y轴电致化学发光强度值。【具体实施方式】下面结合【具体实施方式】对本专利技术的技术方案作进ー步的说明，但并不局限如此，凡是对本专利技术技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的精神和范围，均应涵盖在本专利技术的保护范围中。以HepG2肝癌细胞为例，本专利技术的基于纳米复合阵列材料的高灵敏检测肝癌细胞的方法，包括如下步骤: (I)纳米氧化锌阵列材料的合成:以水热法制备ZnO纳米棒阵列，将ITO (氧化铟锡导电玻璃)基底浸入含有六水硝酸锌(0.05、.07 mol/L)和六次甲基四胺(0.05-0.07 mol/L)的混合溶液中(15-20 mL)(六水硝酸锌和六次甲基四胺溶液体积比为1:1)，在75、0°C反应2.5-4h后，取出基底，依次用去离子水和无水こ醇进行超声清洗3飞分钟，然后在250-350で温度下退火20-60 min,即可得到ZnO纳米棒阵列修饰的ITO电极。(2)硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的合成:将清洗好的氧化锌纳米阵列材料分别依次浸入到I-1.5 mL的硫化钠溶液(浓度为0.2 mol/mL)和I-1.5mL氯化镉溶液(浓度为0.2 mol/mL),姆次加入试剂后反应时间为:T5分钟,去离子水冲洗,备用。反应过程中毎次都要用去离子水冲洗除去未反应的离子，备用。以上反应均是在室温(25°C)条件下进行的。(3)金納米粒子的合成:先用0.45 Um的多孔滤膜将柠檬酸钠溶液和氯金酸溶液过滤，然后将1.00 mL、1% (质量浓度)柠檬酸钠溶液与100 mL 0.01% (质量浓度)氯金酸溶液混合于烧瓶中，回流(100°C)搅拌反应十至三十分钟后，停止加热。在密封条件下，继续搅拌至恢复到室温(25°C)，备用。具体回流搅拌时间取决于所需要的金納米粒子大小。(4)生物传感器的组装:将步骤(2)中得到的具有硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的ITO电极用去离子水冲洗，用氮气将该电极吹干。在其表面上滴加10微升的3-氨基丙基-三乙氧基硅烷的水溶液(APTES)(浓度为1%，体积分数)。置于氮气氛围中，十分钟后，将步骤(3)中制备好的金纳米粒子10-20微升滴加到已被APTES修饰好的ITO电极表面，置于氮气氛围内，半小时以上。将肿瘤细胞抗体(10_5 g/mL)修饰到电极的表面，置于37摄氏度孵育箱中备用。(5)对HepG2癌细胞的检测:采用电致化学发光技术对HepG2癌细胞进行检测，具体检测方法如下: 利用三电极体系，包括饱和甘汞电极作为参比电极，钼丝电极作为对电极，步骤2中得到的电极作为工作电极。三只电极同时置于含有0.1 M PBS磷酸缓冲溶液(pH 7.4),0.05M K2S2O8和0.1 M KCl的溶液中，在电压范围为0- -1.5V之间进行扫描。在电极表面，硫化镉包覆的氧化锌能够和溶液中的K2S2O8共反应，从而产生电致化学发光信号。根据步骤本文档来自技高网...
【技术保护点】
硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的制备方法，其特征在于所述制备方法步骤如下：（1）纳米氧化锌阵列材料的合成：以水热法制备ZnO纳米棒阵列修饰的ITO电极；（2）硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的合成：将清洗好的氧化锌纳米阵列材料分别依次浸入到1?~1.5?mL的硫化钠溶液和1?~1.5mL氯化镉溶液，每次加入试剂后反应时间为3~5?分钟，去离子水冲洗，备用，即得具有硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的ITO电极。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：韩晓军，王磊，马生华，刘丹青，王雪靖，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学，
类型：发明
国别省市：
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