一种钩吻的快速繁殖方法技术

本发明专利技术公开了一种钩吻的快速繁殖方法，包括无菌芽的获得，腋芽的诱导，丛生芽的增殖，生根诱导，炼苗训化，大田移栽等步骤。本发明专利技术方法可以快速获得大量的钩吻幼苗，有效降低生产成本。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，包括无菌芽的获得，腋芽的诱导，丛生芽的增殖，生根诱导，炼苗训化，大田移栽等步骤。本专利技术方法可以快速获得大量的钩吻幼苗，有效降低生产成本。【专利说明】
本专利技术涉及植物组织培养的快繁方法，属于植物
。
技术介绍
钩吻，又名大茶药、断肠草等，钩吻是马钱子科植物胡蔓藤，多年生常绿藤本植物。主要分布在广西、云南、贵州、湖南、福建、江西及浙江等地；性温，味苦、辛；有大毒。外用具有祛风散疾、消肿止痛、攻毒杀虫的功能,主治疥傲、湿疹、疲疲、痈肿、疗疮、体癣、跌打损伤、风湿痹痛、神经痛，抑制肿瘤细胞生长、局部用于扩陇、免疫调节等方面。中国钩吻已分离出17种单体，其中以钩吻素己毒性最强。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供，由该方法所制备得到的钩吻组培幼苗生长周期短，成活率高，可控性好，可以规模化的进行生产。本专利技术所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的: 选用钩吻生长健壮的茎段，用洗衣粉浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净工作台上用75%酒精处理30秒，0.1 %的升汞消毒12分钟，无菌水冲洗4-5次，接种在B5+PP3330.5mg/L腋芽诱导培养基上，将诱导出来的腋芽接入增殖培养基B5+IBAlmg/L+赤霉素0.6mg/L上进行增殖培养，培养条件为光照20001x，光期12h，暗期12h，温度25°C，湿度50%~60%，30天后转入生根培养基MS+NAA0.21 mg/L中诱导生根，培养条件为光照40001x,光期14h，暗期10h，温度27°C，湿度50%~60%，试管苗生根后长约5cm进行炼苗移栽，大田大规模生产。采用本专利技术培养出来的试管苗长势好，生长速度快，成活率达95%，周期短，操作可控，可进行工业扩大化生产。下面将结合【具体实施方式】对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。【具体实施方式】实施例1 选用钩吻生长健壮的茎段，用洗衣粉浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净工作台上用75%酒精处理30秒，0.1%的升汞消毒12分钟，无菌水冲洗4-5次，接种在B5+PP333 0.3mg/L腋芽诱导培养基上，将诱导出来的腋芽接入增殖培养基B5+IBA0.5mg/L+赤霉素lmg/L上进行增殖培养，培养条件为光照20001x，光期12h，暗期12h，温度25°C，湿度50%~60%，30天后转入生根培养基MS+NAA0.2mg/L中诱导生根，培养条件为光照40001x,光期14h，暗期10h，温度27°C，湿度50%~60%，试管苗生根后长约5cm进行炼苗移栽，大田大规模生产，成活率达80%。实施例2选用钩吻生长健壮的茎段，用洗衣粉浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净工作台上用75%酒精处理30秒，0.1%的升汞消毒12分钟，无菌水冲洗4-5次，接种在B5+PP333lmg/L腋芽诱导培养基上，将诱导出来的腋芽接入增殖培养基B5+IBA1.5mg/L+赤霉素lmg/L上进行增殖培养，培养条件为光照2000lx，光期12h，暗期12h，温度25°C，湿度50%~60%，30天后转入生根培养基MS+NAA1 mg/L中诱导生根，培养条件为光照40001x，光期14h，暗期10h，温度27°C，湿度50%~60%，试管苗生根后长约5cm进行炼苗移栽，大田大规模生产，成活率达85%。实施例3 选用钩吻生长健壮的茎段，用洗衣粉浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净工作台上用75%酒精处理30秒，0.1%的升汞消毒12分钟，无菌水冲洗4-5次，接种在B5+PP333 0.5mg/L腋芽诱导培养基上，将诱导出来的腋芽接入增殖培养基B5+IBAl.5mg/L+赤霉素lmg/L上进行增殖培养，培养条件为光照20001x，光期12h，暗期12h，温度25°C，湿度50%~60%，30天后转入生根培养基MS+NAA0.2 mg/L中诱导生根，培养条件为光照40001x,光期14h，暗期10h，温度27°C，湿度50%~60%，试管苗生根后长约5cm进行炼苗移栽，大田大规模生产，成活率达90%。实施例4 选用钩吻生长健壮的茎段，用洗衣粉浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净工作台上用75%酒精处理30秒，0.1%的升汞消毒12分钟，无菌水冲洗4-5次，接种在B5+PP333 lmg/L腋芽诱导培养基上，将诱导出来的腋芽接入增殖培养基B5+IBA0.5mg/L+赤霉素lmg/L上进行增殖培养，培养条件为光照20001χ，光期12h，暗期12h，温度25°C，湿度50%~60%，30天后转入生根培养基MS+NAA0.2mg/L中诱导生根，培养条件为光照40001x,光期14h，暗期10h，温度27°C，湿度50%~60%，试管苗生根后长约5cm进行炼苗移栽，大田大规模生产，成活率达92%。【权利要求】1.，其步骤如下: (1)外植体的处理:采用常规的组织培养方法对钩吻带芽茎段进行消毒处理； (2)诱导培养:取步骤(I)获得的无菌带芽茎段接种在B5+PP3330.5mg/L腋芽诱导培养基上丛生芽诱导； (3)增殖培养:取步骤(2)诱导出来的丛生芽接入增殖培养基B5+IBAlmg/L+赤霉素.0.6mg/L上进行增殖培养； (4)生根诱导:取步骤(3)培养30天的丛生芽转入生根培养基MS+NAA0.2-1 mg/L中诱导生根； (5)炼苗移栽到大田进行大规模培养。2.根据权利要求1所述的，其特征是:钩吻的芽经消毒处理，接种在B5+PP3330.3-lmg/L腋芽诱导培养基上，将诱导出来的腋芽接入增殖培养基Β5+ΙΒΑ0.5-1.5mg/L+赤霉素lmg/L上进行增殖培养30天，转入生根培养基MS+NAA0.2-Img/L中诱导生根，试管苗生根后长约5cm进行炼苗移栽，大田大规模生产。3.根据权利要求1所述的，其特征是:所述的消毒处理为:选用钩吻生长健壮的茎段，用洗衣粉浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净工作台上用75%酒精处理30秒，0.1%的升汞消毒12分钟，无菌水冲洗4-5次。4.根据权利要求1所述的，其特征是:诱导增殖的条件为光照20001x，光期12h，暗期12h，温度25°C，湿度50%-60% ;生根的条件为光照40001x，光期14h,暗期10h，温度270C，湿度50%-60%。5.根据权利要求1所述的，其特征是:培养基中加入的PP333和GA3均为过滤灭菌。6.根据权利要求1所述的，其特征是:炼苗移栽过程中，首先在室内培养，去掉封口膜，敞口放置在培养室培养一周，然后使用无菌沙质黄土在光照培养箱中培养两周，光照强度80001x，温度27°C，光期12h，暗期12h，湿度40%_60%，从光照培养基中取出的小苗，洗取根部的培养基，定植于铺好的苗床上，盖上薄膜和阴网，一周后去掉薄膜，两周后去掉阴网，组培苗移栽25天以上就可以移栽大田或推广应用。【文档编号】A01H4/00GK103444544SQ201310423647【公开日】2013年12月18日 申请日期:2013年9月17日 优先权日:2013年9月17日 【专利技术者】杨存 申请人:南京通泽农业科技有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种钩吻的快速繁殖方法，其步骤如下：?（1）外植体的处理：采用常规的组织培养方法对钩吻带芽茎段进行消毒处理；（2）诱导培养：取步骤（1）获得的无菌带芽茎段接种在B5+PP3330.5mg/L腋芽诱导培养基上丛生芽诱导；（3）增殖培养：取步骤（2）诱导出来的丛生芽接入增殖培养基B5+IBA1mg/L+赤霉素0.6mg/L上进行增殖培养；（4）生根诱导：取步骤（3）培养30天的丛生芽转入生根培养基MS+NAA0.2~1?mg/L中诱导生根；（5）炼苗移栽到大田进行大规模培养。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨存，
申请(专利权)人：南京通泽农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：