一种制备苍毛金发藓素A的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备苍毛金发藓素A的方法，该方法的步骤是：将苍毛金发藓药材粉碎，用乙醇溶液进行超高压提取，合并提取液，浓缩后用正丁醇萃取，萃取液上氧化镁柱，石油醚-丙酮混合溶液梯度洗脱，洗脱液浓缩后采用制备高效液相色谱进一步纯化，获得苍毛金发藓素A。该方法操作简单、制备量大、得率高、产品纯度高，适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药化学
，涉及一种制备苍毛金发藓素A的方法。
技术介绍
苍毛金发藓素A (Pallidisetin A)，分子式为C23H18O3，分子量为342.39，为无色片状结晶，mp.233°C。主要存在于金发藓科(Polytrichaceae)签毛金发横■ Po Iytr i chumpalIidiseturn Funoh.中。药理学研究表明，苍毛金发藓素A具有细胞毒活性。对人黑色素癌细胞RPM1-7951和多形恶性胶质瘤U-251MG的ED50皆为1.0 μ g/mL。目前对苍毛金发藓素A的研究较少，因此提供一种苍毛金发藓素A的制备方法对含有苍毛金发藓素A的苍毛金发藓药材资源开发及药理研究具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种操作简单、制备量大、纯度高，适合工业化生产的制备苍毛金发藓素A的方法。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案: 一种制备苍毛金发藓素A·的方法，其特征在于包括以下步骤: (1)提取:取富含苍毛金发藓素A的苍毛金发藓药材粉碎，加入乙醇溶液，采用超高压法进行提取，控制粒径为60目，乙醇浓度为75-95%，固液体积比为1:10-1:18，压力为400MPa，保压3-5min，重复2_3次，合并提取液，浓缩成浸膏； (2)萃取:将上述提取液浸膏用正丁醇萃取，萃取液进行浓缩得浸膏； (3)柱层析:将上述浸膏用中性氧化镁拌样上柱，石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液； (4)制备液相纯化:将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩干燥，用制备液相色谱分离纯化，流速为20-50ml/min，流动相为甲醇-乙腈-水(20:35:45)。所述步骤(3)中，氧化镁目数为100-200目，氧化镁柱为中低压柱，柱压为5-7.5bar，柱径高比为 1:7-12。本专利技术的有益效果是:采用本专利技术方法，操作简单、制备量大、得率高、产品纯度高，适合工业化生产。下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施方式: 实施例1: 取苍毛金发藓药材粉碎，控制粒径为60目，称取500g，以固液体积比为1:10加入85%乙醇溶液，采用超高压法进行提取，提取压力为400MPa，保压时间为3.5min,重复3次，合并提取液，减压浓缩得提取浸膏，用正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，浓缩得萃取浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至100目的中性氧化镁低压柱(柱压为6bar,柱径高比为1:7)，用石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液，将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩、干燥，得粗品。将粗品用制备高效液相色谱分离纯化，流速为20ml/min，流动相为甲醇-乙腈-水(20:35:45)，紫外检测器在线监测，针对性收集苍毛金发藓素A的流分溶液，减压回收试剂得苍毛金发藓素A，含量为96.7%。实施例2: 取苍毛金发藓药材粉碎，控制粒径为60目，称取500g，以固液体积比为1:18加入85%乙醇溶液，采用超高压法进行提取，提取压力为400MPa，保压时间为5min，重复3次，合并提取液，减压浓缩得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，浓缩得萃取浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至200目的中性氧化镁低压柱(柱压为5bar,柱径高比为1:12)，用石油醚-丙酮按体积比20:1_3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液，将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩、干燥，得粗品。将粗品用制备高效液相色谱分离纯化，流速为40ml/min，流动相为甲醇-乙腈-水(20:35:45)，紫外检测器在线监测，针对性收集苍毛金发藓素A的流分溶液，减压回收试剂得苍毛金发藓素A，含量为95.5%。实施例3: 取苍毛金发藓药材粉碎，控制粒径为60目，称取500g，以固液体积比为1:15加入95%乙醇溶液，采用超高压法进行提取，提取压力为400MPa，保压时间为3 min，重复3次，合并提取液，减压浓缩得提取浸膏，用正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，浓缩得萃取浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至200目的中性氧化镁低压柱(柱压为7.5bar,柱径高比为1:10)，用石油醚-丙酮按体积比20:1_3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液，将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩、干燥，得粗品。将粗品用制备高效液相色谱分离纯化，流速为50ml/min，流动相为甲醇-乙腈-水(20:35:45)，紫外检测器在线监测，针对性收集苍毛金发藓素A的流分溶液，减压回收试剂得苍毛金发藓素A，含量为96.2%。实施例4: 取苍毛金发藓药材粉碎，控制粒径为60目，称取800g，以固液体积比为1:15加入75%乙醇溶液，采用超高压法进行提取，提取压力为400MPa，保压时间为4min，重复2次，合并提取液，减压浓缩得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，浓缩得萃取浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至200目的中性氧化镁低压柱(柱压为7bar，柱径高比为1:8)，用石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液，将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩、干燥，得粗品。将粗品用制备高效液相色谱分离纯化，流速为30ml/min，流动相为甲醇-乙腈-水(20:35:45)，紫外检测器在线监测，针对性收集苍毛金发藓素A的流分溶液，减压 回收试剂得苍毛金发藓素A，含量为95.8%。权利要求1.一种制备苍毛金发藓素A的方法，其特征在于包括以下步骤 (1)提取取富含苍毛金发藓素A的苍毛金发藓药材粉碎，加入乙醇溶液，采用超高压法进行提取，控制粒径为60目，乙醇浓度为75-95%，固液体积比为1:10-1:18，压力为400MPa，保压3-5min，重复2_3次，合并提取液，浓缩成浸膏； (2)萃取将上述提取液浸膏用正丁醇萃取，萃取液进行浓缩得浸膏； (3)柱层析将上述浸膏用中性氧化镁拌样上柱，石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液； (4)制备液相纯化将石油醚-丙酮(3:1)洗脱液浓缩干燥，用制备液相色谱分离纯化，流速为20-50ml/min，流动相为甲醇-乙腈-水(20:35:45)。2.如权利要求I所述的一种制备苍毛金发藓素A的方法，其特征在于所述步骤(3)中，氧化镁目数为100-200目，氧化镁柱为中低压柱,柱压为5-7. 5bar,柱径高比为1:7-12。全文摘要本专利技术公开了一种制备苍毛金发藓素A的方法，该方法的步骤是将苍毛金发藓药材粉碎，用乙醇溶液进行超高压提取，合并提取液，浓缩后用正丁醇萃取，萃取液上氧化镁柱，石油醚-丙酮混合溶液梯度洗脱，洗脱液浓缩后采用制备高效液相色谱进一步纯化，获得苍毛金发藓素A。该方法操作简单、制备量大、得率高、产品纯度高，适合工业化生产。文档编号C07D307/79GK103254162SQ20131018894公开日2013年8月21日 申请日期2013年5月21日 优先权日2013年5月21日专利技术者刘东锋, 万冬梅 申请人:南京泽朗医药科技有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备苍毛金发藓素A的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）提取：取富含苍毛金发藓素A的苍毛金发藓药材粉碎，加入乙醇溶液，采用超高压法进行提取，控制粒径为60目，乙醇浓度为75?95%，固液体积比为1:10?1:18，压力为400MPa，保压3?5min，重复2?3次，合并提取液，浓缩成浸膏；（2）萃取：将上述提取液浸膏用正丁醇萃取，萃取液进行浓缩得浸膏；（3）柱层析：将上述浸膏用中性氧化镁拌样上柱，石油醚?丙酮按体积比20:1?3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液；（4）制备液相纯化：将石油醚?丙酮（3:1）洗脱液浓缩干燥，用制备液相色谱分离纯化，流速为20?50ml/min，流动相为甲醇?乙腈?水（20:35:45）。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，万冬梅，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：