一种分离培养内皮克隆形成细胞的方法技术

本发明专利技术涉及一种分离培养内皮克隆形成细胞的方法，具体涉及一种从脐带中分离得到内皮克隆形成细胞的方法，其包括以下步骤：(1)用消化酶消化脐静脉血管内膜；(2)冲洗消化后的脐静脉，收集冲洗液；(3)取冲洗液进行细胞培养，得到内皮克隆形成细胞。本发明专利技术分离得到的脐带源内皮克隆形成细胞，其细胞形态、细胞周期、免疫表型、成管能力和吞噬能力等符合内皮祖细胞生物学特征，证明了脐带可以作为内皮祖细胞的新来源，为实验研究和临床应用提供了保障。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，具体涉及一种从脐带中分离培养内皮克隆形成细胞的方法。
技术介绍
内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)是血管内皮细胞的前体细胞，亦是具有向成熟血管内皮细胞分化能力的祖细胞。许多研究表明EPCs参与胚胎血管和出生后血管发生过程，具有新生血管、修复血管损伤、分泌多种促进新生血管生长因子的作用，在靶向治疗缺血性疾病、炎症性疾病、恶性肿瘤、防止血管再狭窄、血管创伤愈合、促进造血恢复等过程中有着重要临床应用前景。目前EPCs主要来源于外周血、骨髓和脐带血，其获得主要存在以下问题:循环血中的EPCs数目非常低，骨髓取材不便，脐带血取材及操作困难等。内皮祖细胞分离培养的难度和数量的稀少成为未来临床应用的一个瓶颈，因此，如何有效获得EPCs成了实验研究和临床应用急需解决的难题，从新的来源寻找EPCs，以克服骨髓等来源的不足成为必要。EPCs有早期EPCs及晚期EPCs两种亚型，晚期EPCs又称内皮克隆形成细胞(endothelial colony forming cells, ECFCs),或内皮外向生长细胞,而ECFCs作为内皮祖细胞的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从脐带中分离培养内皮克隆形成细胞的方法，其包括以下步骤：(1)用消化酶消化离体脐带的脐静脉血管内膜；(2)冲洗消化后的脐静脉，收集冲洗液；(3)取冲洗液进行细胞培养，得到内皮克隆形成细胞。

【技术特征摘要】
1.一种从脐带中分离培养内皮克隆形成细胞的方法，其包括以下步骤: (1)用消化酶消化离体脐带的脐静脉血管内膜； (2)冲洗消化后的脐静脉，收集冲洗液； (3)取冲洗液进行细胞培养，得到内皮克隆形成细胞。2.权利要求1的方法，其中所述消化酶为胶原酶、透明质酸酶或脱氧核糖核酸酶I型。3.权利要求1的方法，其中所述用消化酶消化脐静脉血管内膜前还包括冲洗脐带外周及脐静脉腔内残留血液的步骤。4.权利要求1的方法，其中所述用消化酶消化脐静脉血管内膜的方法为将消化酶注入脐静脉腔内；任选地，在将消化酶注入脐静脉腔内之前还包括结扎脐静脉一端的步骤。5.权利要求1的方法，其中所述取冲洗液进行细胞培养之前还包括将冲洗液进行浓缩的步骤；所述浓缩的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈虎，张颢，张斌，扈江伟，汤永永，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院附属医院，
类型：发明
国别省市：