虾类血细胞线粒体膜电位的流式细胞术检测方法技术

技术编号:8744243 阅读:198 留言:0更新日期:2013-05-29 21:37
本发明专利技术公开了虾类血细胞线粒体膜电位的流式细胞术检测方法,该方法包括以下步骤:制备虾血细胞悬液;取两份虾血细胞悬液制作成阳性对照组和阴性对照组,加入荧光染料JC-1与血细胞共孵育,利用该阳性对照组和阴性对照组,通过流式细胞仪确定虾类血细胞线粒体膜电位正常血细胞的区域和线粒体膜电位下降血细胞的区域;取一份虾血细胞悬液进行实验处理,或虾经过活体实验处理后制备血细胞悬液,作为实验组,加入荧光染料JC-1与血细胞共孵育,根据确定的线粒体膜电位正常血细胞的区域和线粒体膜电位下降血细胞的区域,利用流式细胞仪测定实验组线粒体膜电位下降血细胞的比例。本发明专利技术的方法无需进行细胞洗涤,避免对血细胞造成操作损伤,准确性高、重复性好、测定量大、操作简便快速,为虾类血细胞线粒体膜电位的测定提供了方法依据。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
虾类血细胞线粒体膜电位的流式细胞术检测方法,其特征在于包括以下步骤:?(1)制备虾血细胞悬液;?(2)取两份步骤(1)中的虾血细胞悬液制作成阳性对照组和阴性对照组,加入荧光染料JC?1与血细胞共孵育,利用该阳性对照组和阴性对照组,通过流式细胞仪确定虾类血细胞线粒体膜电位正常血细胞的区域和线粒体膜电位下降血细胞的区域;?(3)取一份步骤(1)中的虾血细胞悬液进行实验处理,或虾经过活体实验处理后制备血细胞悬液,作为实验组,加入荧光染料JC?1与血细胞共孵育,根据步骤(2)所确定的线粒体膜电位正常血细胞的区域和线粒体膜电位下降血细胞的区域,利用流式细胞仪测定实验组线粒体膜电位下降血细胞的比例;?步骤(2)所述的阳性对照组,是在虾血细胞悬液中加入终浓度为10μmol/L的α?羰基氰化氯苯腙,在室温下避光孵育30min后得到;?步骤(2)所述的阴性对照组,即虾血细胞悬液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王安利冼健安苗玉涛潘训彬李彬郭慧
申请(专利权)人:华南师范大学
类型:发明
国别省市:

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