GLP-1类似物的反相HPLC纯化制造技术

本发明专利技术包括应用反相高效液相层析（RP-HPLC）来纯化GLP-1肽类似物的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及人胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)类似物的纯化，特别涉及用于纯化具有SEQ ID N0.1 的氨基酸序列的 GLP-1 类似物的方法:His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser_Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-1Ie-Ala-Trp-Leu-Val-LyS-Aib-Arg-NH2,其中，这些氨基酸中的26个氨基酸是天然L构型，而4个氨基酸是非手性构型。Aib表示通过反相高效液相层析(RP-HPLC)纯化的人胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)的α-氨基异丁酸类似物。该肽也称为(Aib8，35)GLP-1(7-36)NH2，并在PCT公布TO 2000/34331 中描述了其药物用途及其通过固相肽合成(SPPS)的制备。
技术介绍
可遵循这样的混合方法合成GLP-1类似物，所述混合方法包括固相肽合成(SPPS)和溶液中的片段偶联。例如，PCT公布WO 2007/147816描述了通过制备三条片段并在溶液中偶联这些片段来制备(Aib8’35)GLP-1 (7-36)NH2。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.06.21 EP 10166602.21.应用反向高效液相层析(RP-HPLC)纯化GLP-1肽类似物的方法，所述方法包括用水性缓冲液和有机溶剂的混合物进行洗脱的第一个和第二个层析步骤，其特征在于用于第二个层析步骤的有机溶剂为乙腈并且使用pH在8.0至11.0之间的碱性缓冲液进行第二步层析。2.权利要求1的方法，其特征在于乙腈还与甲基叔丁基醚混合作为有机改性剂。3.权利要求2的方法，其特征在于使用99/1(v/v)至80/20(v/v)的乙腈/甲基叔丁基醚的混合物。4.权利要求1至3中任一项的方法，其特征在于所述碱性缓冲液选自乙酸铵或碳酸氢铵。5.权利要求1至4中任一项的方法,其特征在于以IOmMol至25mMol的浓度使用所述碱性缓冲液。6.权利要求1的方法，其特征在于第一个层析步骤的水性有机溶剂为乙腈并且使用pH在1.0至4.0之间的酸性缓冲液进行第一步层析。7.权利要求6的方法，其特征在于所述酸性缓冲液为磷酸铵。8.权利要求1至7中任一项的方法，其特征在于使用硅胶吸着剂作为固定相进行所述RP-HPLC。9.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述GLP-1肽类似物选自由GLP-1 (7-3...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·卡尔，M·罗特，C·萨拉丁，D·斯特鲁布，F·维克斯，
申请(专利权)人：益普生制药股份有限公司，
类型：
国别省市：