一种GLP-1类似物、制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种GLP-1类似物、制备方法及其应用。所述GLP-1类似物具有下列通式A：7HAEX10TFTSX15VSSYLEX22QAAKEFIX30WLX33KGRG37n1X1Cn2X2。本发明专利技术的GLP-1类似物能够有效增加GLP-1的血液半衰期，克服其因为半衰期短而无法在临床上使用的现状，在糖尿病、肥胖症治疗药物领域较有应用前景。本发明专利技术还公开了所述GLP-1类似物的制备方法及其应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及糖尿病相关的药物领域，具体而言，本专利技术涉及一种具有延长的胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)类的体内半衰期的GLP-1类似物。本专利技术还涉及该GLP-1类似物的制备方法以及其在制备糖尿病药物中的应用。
技术介绍
本专利技术涉及的GLP-1 (glucagon-likepeptide-Ι,以下简称GLP_1)是主要由小肠L细胞分泌的一种37个氨基酸组成的多肽，其活性形式为GLP-1 (7-37) OH和GLP-1 (7-36)NH2 (Mojsov S，J Clin Invest. 1987 Feb; 79(2) : 616-9)。GLP-1 明显减低人用餐后的血糖，能刺激胰岛素的产生，同时还能起到一定减肥效应，并且不会引起低血糖症(DruckerD J, Diabetes. 1998 Feb; 47(2) : 159-69)。近期研究还表明GLP-1有胰腺再生作用(Drucker D J, 2003Dec; 144 (12) : 5145-8)。此外，因为GLP-1为完全人源化多肽，作为临床药物在安全上具有较大优势。然而，GLP-1 (7-37)的血清半衰期仅仅为3-5分钟，每天多次注射给药在临床使用中非常不方便。目前已经有不少研究采用GLP-1类似物融合蛋白技术解决GLP-1类似物在体内的存留时间(CN9010 1167. 3、CN200710018734. 2、CN200410054397. 9、CN01820232. 2、CN200380110152. 7、CN200510039265. 3、CN200610127237.1、CN200910009642. 7)，然而，现有的技术与临床理想的目标还有很大距离，普遍都还没有达到临床标准，最近NovoNorisk生产的利拉鲁肽为GLP-1类似物，其对GLP-1进行了棕榈酸的修饰，并于2009年于美国上市。但是利拉鲁肽也存在半衰期短的问题，其剂型仍需每日注射。因此，目前存在对解决GLP-1体内半衰期短的方法的需求。
技术实现思路
除非另外指出，本文所述的“Fmoc策略”是指以聚合物树脂作为固相反应基质，将氨基端Fmoc保护的氨基酸在偶联试剂的存在下依次缩合，从而合成多肽的合成方法。其具体方法参见 Fmoc solid phase peptide synthesis: a practical approach, 2000,Oxford University Press. 本专利技术的一个目的是针对临床上GLP-1类似物在体内存留时间较短，需要每天注射给药的缺限，提供一种半衰期较长的GLP-1的类似物。本专利技术的另一个目的是提供一种GLP-1类似物在制备治疗糖尿病的药物中的应用，以及该GLP-1类似物在制备治疗和/或预防肥胖症的药物中的应用。本专利技术的又一个目的是提供一种以GLP-1类似物作为有效成分的药用组合物，其包含上述GLP-1类似物。其中，所述的药物组合物还包含一种或多种药学上可接受的辅料，并且所述药物组合物优选为注射剂，进一步优选为冻干粉针或溶液注射剂。用于实现上述目的的技术方案如下 一方面，本专利技术提供一种GLP-1类似物，所述GLP-1类似物具有下列通式A 7HAEX10T FTSDVS X18YLEX22QA X25K EFIX30W LX33KGR G37H1X1 n2X2通式A， 其中，X10为甘氨酸或半胱氨酸，X18为丝氨酸或半胱氨酸，X22为甘氨酸或者半胱氨酸，X25为丙氨酸或半胱氨酸，X30为丙氨酸或半胱氨酸，X33为缬氨酸或半胱氨酸，并且Χ1(ι、Χ 8>X25> X30和X33中有且只有两个为半胱氨酸W1X1表示有II1个X1, H1=O^O,且X1为丝氨酸、谷氨酸或谷氨酰胺；η2χ2表示有η2个Χ2，η2=(Γ30，且X2为丝氨酸、谷氨酸或谷氨酰胺；nl、η2不同时为0，以及通式A中含有的两个半胱氨酸均形成二硫键。优选地，所述的GLP-1类似物所述GLP-1类似物具有下列通式1:7HAEX10T FTSDVS X18YLEGQA X25K EFIX30W LX33KGR G37H1X1 η2Χ2 通式I, 其中 Ii1=I 30, η2=1 30。所述具有通式I的GLP-1类似物如SEQ ID NO1: HAECT FTSDVS CYLEGQA AK EFIAff LVKGR GSS ；SEQ ID NO 2: HAECT FTSDVS CYLEGQA AK EFIAff LVKGR GSSSSSSSSSSSS ；SEQ ID NO 3: HAECT FTSDVS CYLEGQA AK EFIAff LVKGR GSSSSSSSSSSSSSSS ;或SEQ ID NO 4:HAECT FTSDVS CYLEGQA AK EFIAff LVKGR GSSSSSSSSSSSSSSSSSSSSSSSSSSSSSS。优选地，所述GLP-1类似物具有下列通式II 7HAEGT FTSDVS X18YLEGQA X25K EFIAff LVKGR G37H1X1 n2X2通式II， Ii1=I 20，n2=l 20，并且其中X1为丝氨酸、谷氨酸或谷氨酰胺，X2为丝氨酸、谷氨酸或谷氨酰胺； 优选地，Ii1=I 20, n2=l 20 ； 进一步优选地，所述Ii1=I 10, n2=l 10 ；nl=n2; 进一步优选地，所述GLP-1类似物为SEQ ID NO 5: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GSS ；SEQ ID NO 6: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GSSSS ；SEQ ID NO 7: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GSSSSSS ； SEQ ID NO 8: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GSSSSSSSSSS ；SEQ ID NO 9: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GSSSSSSSSSSSS ；SEQ ID NO 10: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GSSSSSSSSSSSSSS ；SEQ ID NO 11: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GSSSSSSSSSSSSSSSS ；SEQ ID NO 12: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GSSSSSSSSSSSSSSSSSSSS ；SEQ ID NO 13: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GEE ；SEQ ID NO 14: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GEEEE ；SEQ ID NO 15: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GEEEEEE ；SEQ ID NO 16: HAEGT FTSDVS CYLEGQACK EFIAff LVKGR GEEEEEEEE ；SEQ本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种GLP?1类似物，所述GLP?1类似物具有下列通式A：7HAEX10T?FTSDVS?X18YLEX22QA?X25K?EFIX30W?LX33KGR?G37n1X1?n2X2????通式A，???其中，X10为甘氨酸或半胱氨酸，X15为天冬氨酸或半胱氨酸，X22为甘氨酸或半胱氨酸，X30为丙氨酸或半胱氨酸，X33为缬氨酸或半胱氨酸，并且X10、X15、X22、X30和X33中至少有一个为半胱氨酸；n1X1表示有n1个X1，n1=1~30，且X1为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸；n2X2表示有n2个X2，n2=0~30，且X2为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸；以及通式A中含有的两个半胱氨酸均形成二硫键。

【技术特征摘要】
1.一种GLP-1类似物，所述GLP-1类似物具有下列通式A 7HAEX10T FTSDVS X18YLEX22QA X25K EFIX30W LX33KGR G37H1X1 n2X2 通式A， 其中，X10为甘氨酸或半胱氨酸，X15为天冬氨酸或半胱氨酸，X22为甘氨酸或半胱氨酸，X30为丙氨酸或半胱氨酸，X33为缬氨酸或半胱氨酸，并且Χ1(Ι、Χ15、Χ22、Χ3(Ι和X33中至少有一个为半胱氨酸； Ii1X1表示有Ii1个X1, ηι=Γ30,且X1为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸； Ii2X2表示有H2个Χ2，η2=(Γ30，且X2为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸；以及通式A中含有的两个半胱氨酸均形成二硫键。2.如权利要求1所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物具有下列通式I7HAEX10T FTSX15V SSYLE X22QAAK EFIX30W LX33KGR G37H1X1C η2Χ2通式I, 其中ηι=3 30，η2=3 30 ;优选地，所述GLP-1类似物为SEQ ID NO 82: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37 GGGGG GGGGG C GGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 83: 7HAEGT FTSDV SSYLE CQMK EFIAff LVKGR G37 GGGGG C GGGGG GGGGG ；或 SEQ ID NO 84: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37 GGG C GGGGGGGGGGGGGGGGGGGG。3.如权利要求1所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物具有下列通式II7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G3S1X1C η2Χ2通式II， Ii1=I 20，η2=0 25，并且其中X1为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸，X2为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸； 优选地，1^=3 20, η2=3 25 ;进一步优选地,所述1^=5 15, η2=3 9。4.如权利要求3所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物为SEQ ID NO1: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG C GGG ；SEQ ID NO 2: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG GGGGGC GGG ；SEQ ID NO 3: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG GGGGGGGGGGC GGG ；SEQ ID NO 4: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG C GGGGG G ；SEQ ID NO 5: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG C GGGGG GGGG ；SEQ ID NO 6: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG GGGGGC GGGGG G ；SEQ ID NO 7: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG GGGGGC GGGGGGGGG ；SEQ ID NO 8: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG GGGGGGGGGGC GGGGGG ；SEQ ID NO 9: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37GGGGG GGGGGGGGGGC GGGGGGGGG ；SEQ ID NO 10: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37AAAAA C AAA ；SEQ ID NO 11: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37AAAAA AAAAAC AAA ；SEQ ID NO 12: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37AMM MAMMAMC AM ；SEQ ID NO 13: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37AAAAA C AAAAA A ；SEQ ID NO 14: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37AAAAA C AAAAA AAAA ；SEQ ID NO 15: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37AAMA MAAAC AMAA A ；SEQ ID NO 16: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37AAAAA AAAAAC AAAAAAAAA ；SEQ ID NO 17: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37AAAAA AAAAAAAAAACAAAAA A ；SEQ ID NO 18: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37AAAAA AAAAAAAAAACAAAAA AAAA ；SEQ ID NO 19: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37VVVVV C VVV ；SEQ ID NO 20: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37VVVVV VVVVVC VVV ；SEQ ID NO 21: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37VVVVV VVVVVVVVVVC VVV ；SEQ ID NO 22: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37VVVVV C VVVVV V ；SEQ ID NO 23: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37VVVVV C VVVVV VVVV ；SEQ ID NO 24: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37VVVVV VVVVVC VVVVV V ；SEQ ID NO 25: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37VVVVV VVVVVC VVVVVVVVV ；SEQ ID NO 26: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37VVVVV VVVVVVVVVVCVVVVV V ;或SEQ ID NO 27: 7HAEGT FTSCV SSYLE GQAAK EFIAff LVKGR G37VVVVV VVVVVVVVVVCVVVVV VVVV05.如权利要求1所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物具有下列通式III7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37 Ii1X1 C n2X2通式III, 其中，Ii1=I 10，n2=0 25，X1为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸，X2为甘氨酸、丙氨酸或缬氨酸；优选地，1^=3 10, n2=3 25 ;或者，Ii1=I 5, n2=10 20 ;进一步优选地，Ii1=S 5,n2=10 20。6.如权利要求5所述的GLP-1类似物，其特征在于，所述GLP-1类似物为SEQ ID NO 28: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37G C GGGGG GGGGG ；SEQ ID NO 29: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQMK EFICff LVKGR G37G C GGGGG GGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 30: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37G C GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 31: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37GG C GGGGG GGGGG ；SEQ ID NO 32: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQMK EFICff LVKGR G37GG C GGGGG GGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 33: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37GG C GGGGGGGGGGGGGGGGGGGG ；SEQ ID NO 34: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37GGGGG C GGGGG GGGGG ；SEQ ID NO 35: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37GGGGG C GGGGGGGGGGGGGGG ； SEQ ID NO 36: 7HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFICff LVKGR G37GGGGG C GGGGGGGGGGGGGGGGGGGG ；S...

【专利技术属性】
技术研发人员：李瑛，
申请(专利权)人：天津嘉宏科技有限公司，
类型：发明
国别省市：