一种分离乳酸杆菌的方法技术

本发明专利技术公开了一种分离乳酸杆菌的方法，其步骤是：A、将MRS固体培养基调节pH后装入生理盐水瓶，充入二氧化碳使培养基中氧气消耗殆尽，密封，灭菌，45度倾斜放置，培养基形成斜面，自然冷却；B、将待分离的样品用无菌双蒸水混合，涡旋后静置；C、移取上清进行稀释，分别取10-3、10-4、10-5三个稀释，分别用注射器注入到生理盐水瓶的斜面上，转动生理盐水瓶，使样品均匀分布在生理盐水瓶中的斜面培养基上；D、倒置于生化培养箱中培养，乳酸杆菌将在培养基表面被分离出来。方法易行，操作简便，该方法可以用于实验室乳酸杆菌的分离，同时适合在样品采集地点进行乳酸杆菌的野外分离，并显著减少工作量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物领域，具体涉及，方法易行，操作简便，不需常规分离方法中的厌氧设备。
技术介绍
乳酸杆菌属于乳酸杆菌科，拉丁学名为Lactobacillus，是指能使糖类发酵产生乳酸的细菌，其存在广泛，嗜酸，最适合PH5. 5 6，在无芽胞杆菌中其耐酸力最强，细胞呈杆状，革兰氏染色阳性，不运动，不产芽孢；肠道乳酸杆菌可分解糖产酸，抑制致病菌及腐败菌的繁殖，具有维护人体和动物健康和调节免疫的功能。中国农业部已经批准乳酸杆菌可以作为饲料添加剂中的微生物菌种用于饲料和养殖业中。现有技术中，一般常规分离乳酸杆菌的方法需要厌氧设备，比如厌氧操作台，厌氧罐等，但在很多地方，特别是企业，由于条件限制而没有这些设备；同时，乳酸杆菌离开机体后很快就会死亡，如果样品采集地点离乳酸杆菌分离地点很远，那么样品中的乳酸杆菌在运送过程中就可能已经死亡，现有技术不能把仪器设备运到样品采集地点进行乳酸杆菌分离，不能解决样品采集地点和分离地点距离太远这个问题。本专利技术方法通过向培养器皿中充入二氧化碳气体至培养基中氧气消耗殆尽，然后用封口膜密封，人为形成一个厌氧环境，与现有技术相比，本专利技术方法具有良好的优势，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离乳酸杆菌的方法，其步骤是：将配制的MRS固体培养基调节pH6.0?6.6后，装入100?150毫升培养基于250毫升生理盐水瓶中，充入二氧化碳气体至培养基中氧气消耗殆尽，将一细线的一端置于瓶内，另一端置于瓶外，用橡胶盖塞住瓶口，然后用封口膜密封，置于灭菌锅115?℃灭菌13?18分钟，拔掉细线，以45度角倾斜放置，使培养基形成斜面，自然冷却到培养基凝固；将待分离的样品用无菌双蒸水以体积比1:10混合，涡旋一分钟后静置3?6分钟；移取上清1毫升进行10倍倍比稀释，然后分别取10?3、10?4、10?5三个稀释度各200微升样品，用注射器注入A步中所制备的装有固体培养基的250毫升生理盐水...

【技术特征摘要】
1.一种分离乳酸杆菌的方法，其步骤是 将配制的MRS固体培养基调节pH6. 0-6. 6后，装入100-150毫升培养基于250毫升生理盐水瓶中，充入ニ氧化碳气体至培养基中氧气消耗殆尽，将ー细线的一端置于瓶内，另ー端置于瓶外，用橡胶盖塞住瓶ロ，然后用封ロ膜密封，置于灭菌锅115で灭菌13-18分钟，拔掉细线，以45度角倾斜放置，使培养基形成斜面，自然冷却到培养基凝固； 将待分离的样品用无菌双蒸水以体积比1:10混合，涡旋一分钟后静置3-6分钟； 移取上清I毫升进行10倍倍比稀释，然后分别取lO'lO'lO—5三个稀释度各200微升样品，用注射器注入A步中所制备的装有...

【专利技术属性】
技术研发人员：王升平，印遇龙，李丽立，熊霞，范觉鑫，刘惠知，周映华，胡新旭，高书峰，周小玲，缪东，舒燕，曾发姣，
申请(专利权)人：中国科学院亚热带农业生态研究所，
类型：发明
国别省市：