一种Thermus脂肪酶的固定化方法技术

本发明专利技术公开了一种Thermus脂肪酶的固定化方法：将氨基化纳米磁性载体Fe3O4/SiO2与pH8.0的缓冲溶液混合，加入质量浓度25%的戊二醛水溶液，室温下磁力搅拌4h，再加入以所述Tris-HCl缓冲溶液溶解的Thermus脂肪酶（Thermus?thermophilus?WL）的缓冲溶液，室温下磁力搅拌3.5h，磁分离，弃去上清液a，将沉淀a用缓冲溶液洗涤，冷冻干燥，获得固定化的Thermus脂肪酶；本发明专利技术所述固定化Thermus脂肪酶耐热范围40-100℃，pH值适应范围4.0-9.0，对金属离子，酶抑制剂及去污剂有较强的耐受性；具有极好的超顺磁性，易磁分离回收，较好的操作稳定性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种脂肪酶的固定化方法，特别涉及。
技术介绍
脂肪酶(lipase，EC3.1.1. 3)是一类特殊的酰基水解酶，能够在油-水界面上催化酯水解、酯合成、酯交换、内酯合成、多肽合成、高聚物合成及立体异构体拆分等化学反应。 迄今为止已分离提纯了来源于动植物和微生物的各种脂肪酶，目前被广泛研究的一种酶催化剂，被广泛地应用于洗涤剂、油脂与食品加工、有机合成、表面清洗、医药、化妆品、香料、 皮革与造纸工业、生物柴油的制备、油脂改性等方面的研究。Thermus脂肪酶是从深海热液口等高温环境中的嗜热微生物(>55°C )中分离得到的一类嗜热性脂肪酶，具有常规中温酶(20°C飞5°C )及低温酶(<20°C )无法比拟的优点， 由于嗜热酶的高温反应活性，以及对有机溶剂、去污剂和变性剂的较强抗性，使它在食品、 医药、制革、石油开采及生物柴油等方面都有广泛的应用潜力。但由于酶的价格昂贵、难以回收且在反应过程中易失活等原因，很大程度上限制了它在工业化生产中的应用。所谓酶的固定化，就是用固体材料将酶束缚或限制于一定区域内，仍能进行其特有的催化反应、并可回收及重复利用的一类技术。酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种Thermus脂肪酶的固定化方法，其特征在于所述方法为：将氨基化纳米磁性载体Fe3O4/SiO2与pH8.0的缓冲溶液混合，加入质量浓度25%的戊二醛水溶液，室温下磁力搅拌4h，再加入以所述Tris?HCl缓冲溶液溶解的Thermus脂肪酶（Thermus?thermophilus?WL）的缓冲溶液，室温下磁力搅拌3.5h，磁分离，弃去上清液a，将沉淀a用缓冲溶液洗涤，冷冻干燥，获得固定化的Thermus脂肪酶；所述Thermus脂肪酶按下述方法获得：将序列号为AAS81965.1的Thermus脂肪酶基因以大肠埃希氏杆菌为宿主细胞进行重组，获得含有Thermus脂肪酶基因的大肠埃希氏杆菌...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：章晓波，宋崇富，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：