一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法技术

本发明专利技术涉及一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法，其包括以下步骤：一）黑根霉菌丝脂质体转化：1）将幼嫩黑根霉湿菌丝与甘露醇水溶液混合后研磨，得菌悬液，备用；2）将脂质体2000与质粒pEGFP-C1混匀，于-5－5℃放置15－60min，然后转入到菌悬液中，混匀，于-5－5℃放置15－60min；3）将步骤2）所得混合液涂抹PDA平板，25－30℃培养1－5天；二）传代培养：4）挑取步骤3）经荧光显微镜检测带有荧光的转化子接种于PDA平板上25－30℃培养1－5天，共传代培养5－8次。该方法简便、快捷、转化率高、转化子遗传稳定，不需要制备原生质体，不需要复杂装置。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于脂质体转化
，具体涉及。
技术介绍
目前，丝状真菌遗传转化方法主要有原生质体电转化法、基因枪转化法、醋酸锂介导转化法、农杆菌介导转化法、PEG介导的原生质体转化法和原生质体脂质体转化法等。这些方法普遍存在操作繁琐、装置复杂、转化率低、转化子不稳定等缺点。如有些需要制备原生质体，制备过程复杂，包括原生质体电转化法、PEG介导的原生质体转化法和原生质体脂质体转化法。有些方法不需要制备原生质体，但装置复杂、转化成本高，如基因枪转化法。有的仅仅限于少数种类丝状真菌的转化，如醋酸锂介导转化法。有的转化率不稳定，转化效率受多种因素的影响，如农杆菌转化法转化效率受农杆菌菌株类型、质粒载体类型及两者间的匹配情况、培养基成分及诱导条件等多种因素的影响。
技术实现思路
本专利技术目的在于克服现有技术不足，提供， 该方法简便、快捷、转化率高、转化子遗传稳定，不需要制备原生质体，不需要复杂装置。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案，其包括以下步骤一)黑根霉菌丝脂质体转化1)将幼嫩黑根霉湿菌丝与甘露醇水溶液混合后研磨，得菌悬液，备用；2)将脂质体2000与质粒pEGFP-Cl混匀，于_本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法，其特征在于，包括以下步骤：一）黑根霉菌丝脂质体转化：1）将幼嫩黑根霉湿菌丝与甘露醇水溶液混合后研磨，得菌悬液，备用；2）将脂质体2000与质粒pEGFP?C1混匀，于?5－5℃放置15－60min，然后转入到菌悬液中，混匀，于?5－5℃放置15－60min；3）将步骤2）所得混合液涂抹PDA平板，25－30℃培养1－5天；二）传代培养：4）挑取步骤3）经检测带有荧光的转化子接种于PDA平板上25－30℃培养1－5天，共传代培养5－8次。

【技术特征摘要】
1.一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法，其特征在于，包括以下步骤 一)黑根霉菌丝脂质体转化 1)将幼嫩黑根霉湿菌丝与甘露醇水溶液混合后研磨，得菌悬液，备用； 2)将脂质体2000与质粒pEGFP-Cl混匀，于_5— 5°C放置15 — 60min，然后转入到菌悬液中，混勻，于_5 — 5°C放置15 — 60min ； 3)将步骤2)所得混合液涂抹PDA平板，25- 30°C培养I 一 5天； 二)传代培养 4)挑取步骤3)经检测带有荧光的转化子接种...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱立友，孙强，崔继红，柴冉，高玉千，戚元成，申进文，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：