【技术实现步骤摘要】
本专利技术关于一种提供高于传统光学衍射极限分辨率(200nm)的随机光学重建突光显微镜及其实现方法,特别是涉及一种利用宽谱光源作为荧光分子活化光源,基于单荧光分子检测和中心定位技术的超高分辨率的。
技术介绍
传统荧光显微镜在生物和医学研究中发挥着重要的作用,是生命科学研究的必备工具。但是,传统光学显微镜的分辨率受光学衍射极限的限制,难以实现高于200nm的分辨率。近年来,哈佛大学及其它大学的几位学者提出可以将荧光分子活化与单分子中心定位技术相结合,突破光学衍射极限,实现纳米尺度的分辨率(20-50nm)。这种技术的核心是通过特定波长的光照射使荧光分子发光并且进入暗态,然后用另一波长的活化光使暗态的荧光分子活化重新具备发光的能力,通过控制活化光的功率密度,使得成像区域中随机恢复的荧光分子之间的距离大于光学衍射极限,从而能被传统光学显微镜分辨。连续记录这些单个荧光分子的图像,并进行单分子中心精确定位,最后通过重建获得具有纳米尺度分辨率的荧光图像。对于传统的商业或研究用随机光学重建显微镜(STORM), —般的激发光光源和活化光光源都用激光器,通过声光可调滤光器(AO ...
【技术保护点】
一种随机光学重建荧光显微镜,包括用于放置样品的载物台、CCD图像传感器及紧挨该载物台下方设置的物镜,其特征在于,该显微镜还包括:双滤光片层,设置于该载物台下方,包含两层电动转换的滤光片盒,一层用于走活化光路,一层用于走激光光路;活化光光源产生模块,用于产生活化光,产生的活化光经扩束、聚焦后,经该双滤光片层的一层电动滤光片盒的二向色镜及该物镜后照在该载物台的样品表面进行照明,提供活化光;以及激发光光源产生模块,包括激光产生器、扩束装置及聚焦装置,该激光产生器产生的激发光,经过该扩束装置扩束、该聚焦装置聚焦后,经该双滤光片层的另一电动滤光片盒的二向色镜及物镜后照在该载物台的样品 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:邵志峰,李小卫,袁志伟,翟人宽,孙洁林,
申请(专利权)人:上海交通大学,
类型:发明
国别省市:
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