一种新型人胎盘屏障体外模型制造技术

本发明专利技术公开了一种新型人胎盘屏障体外模型，本模型模拟胎盘在母体内的环境，具备体内胎盘完整的绒毛结构，分泌功能和物质转运功能；本模型持续灌流5小时仍与在体胎盘保持了相似的功能活性，本模型的建立为研究胎盘的结构、功能、物质代谢及妊娠相关疾病提供了一种新的快速筛选方法，在毒理学、靶向治疗以及妊娠期应用药物的安全性评价领域具有广泛的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种新型人胎盘屏障体外模型。
技术介绍
目前胎盘屏障体外模型有胎盘灌流模型和滋养层细胞模型两类。胎盘灌流模型是对完整胎盘小叶中的胎儿动静脉进行插管，以建立胎儿循环，可用于外源及内源性物质的胎盘转运机制研究，为胎盘代谢、内源性物质在母儿间的循环，以及致畸作用的风险评估提供了最直接的证据。但该技术的局限性在于，妊娠早、中期脐血管狭窄，插管困难，无法通过该模型对药物的胎盘透过性进行准确评价，胎盘制备和灌流过程中操作复杂，易损伤组织，影响结果的准确性。胎盘滋养层细胞培养模型的原代培养和滋养层细胞系(BeWo，、Jar和JEG-3)具备胎盘的激素合成和一定的胎盘滋养层细胞形态学特点，可接种于体外通透性支持物上，如Transwell等，但该模型不能摸拟人胎盘屏障结构在孕期呈现的动态变化过程，通常用细胞模型得到的实验结果往往需要用胎盘灌流方法进一步证实。
技术实现思路
为了克服上述方法的缺陷，本专利技术人通过大量实验后，以胎盘组织培养技术和Ussing扩散池方法为基础，建立了一种新型人胎盘屏障体外模型。与胎盘灌流模型相比，本模型操作简便，可对各孕期胎盘组织取材研究；与胎盘滋养层细胞培本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新型人胎盘屏障体外模型，其特征在于通过如下方法建立，包括步骤：1)制备胎盘组织薄片●收集胎盘：选择25？30岁，孕36？40周足月分娩的健康产妇胎盘，胎盘娩出后，在无菌条件下，用冰冷的含肝素的生理盐水充分冲洗胎盘，之后浸于冰冷的含肝素的KRBB中；●用冰冷的含肝素的生理盐水充分冲洗胎盘，之后浸于冰冷的含肝素的KRBB中备用；●切取胎盘组织块：在胎盘终末绒毛部位，取2块组织块，用KRBB漂洗；●玻璃化冷冻法冷冻胎盘组织：在室温下将组织块移至冷冻保护液A中平衡5min，然后移入冷冻保护液B中快速清洗至少10次，时间控制在50s内；之后迅速将组织块移至冷冻的叶片上，将载有组织块的冷冻叶片立即投入...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：宋殿荣，郭洁，韩芳，张崴，王雅楠，王玉华，
申请(专利权)人：天津中医药大学第二附属医院，
类型：发明
国别省市：