一种桑白皮总黄酮、总生物碱及总多糖生产工艺，其特征在于，包括下述工艺步骤：将桑白皮粉碎至10~40目，粉碎过细影响放料，第一次加入8倍桑白皮重量的60%的乙醇，微沸状态下保温1?h，第二次加入6?倍量60%?醇微沸状态下保温1?h，提取两次，然后合并提取液，将提取液减压回收乙醇至0.1~0.2?g生药/mL浓度。将此浓缩液过300~400目滤袋，将滤液通过装有PIPO-01号大孔树脂及732强酸型阳离子交换树脂的2节高压串联树脂。先用10?BV水洗脱2节串联树脂，后分别用6?BV?80%的乙醇洗脱大孔树脂柱、0.5mol/L氨水洗脱离子交换柱。再分别将乙醇、氨水洗脱液及通过2节高压串联树脂后的未吸附液减压回收得浓缩液后再冷冻干燥。分别得到桑白皮总黄酮、总生物碱及总多糖粗品。本发明专利技术工艺简单、快捷、廉价、无毒，是一种绿色生产方法。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术专利涉及到从桑白皮中提取桑白皮总黄酮、总生物碱及总多糖的方法，属于天然产物的提取分离纯化领域，包括提取、过滤、大孔树脂、离子交换树脂的分离等相关技术。
技术介绍
传统中医理论认为桑白皮具有泻肺平喘，利水消肿的功效，主治肺热咳喘、水肿胀满尿少、面目肌肤浮肿等。药理实验证实桑白皮具有降血糖、降血压、抗病毒、利尿等作用。古代本草如《名医别录》、《大明本草》均记载其治消渴，单用即有效。其主要活性成分是黄酮类、多糖和生物碱类化合物。桑白皮黄酮类化学成分结构中均连有异戊烯基，具有降血压、降血糖、抗HIV活性、抗菌、抗癌等作用。I-脱氧野尻霉素(DNJ)是存在于桑白皮中的一种多 羟基哌啶类生物碱，因其可以抑制α -葡萄糖苷酶抑制活性，进而具有降血糖、抗病毒等的活性。现代药理研究表明桑白皮的多糖类同样具有降血糖作用。目前，对桑白皮黄酮类、生物碱的制备方法的专利较多，如申请号为2006101116444. 3,01113191. 8,201110289949. 4、201210057847. 4的专利等，但本专利技术专利公开的一种采用稀醇提取，经树脂同时提取分离桑白皮总黄酮、总生物碱及总多糖，有效避免了单一提取所带来的资源浪费，提高了桑白皮的综合利用率，降低了桑白皮深加工的成本。同时制备方法更为简便，实用，易于工业化生产。
技术实现思路
本专利技术提供一种从桑白皮中提取制备的桑白皮总黄酮、总生物碱和总多糖提取物。本专利技术还提供一种同时提取、分离、制备桑白皮总黄酮、总生物碱和总多糖提取物的方法。本专利技术所述原料桑白皮来源桑科桑属植物桑(Morus alba L.)的干燥根皮。作为提取桑白皮总黄酮、总生物碱和总多糖的原料，可以是市售桑白皮饮片，也可以是此植物的茎、叶、根皮等任意部位，其中优选的药材部位为干燥根皮。通过用乙醇提取、稀醇上样、树脂串联分离、浓乙醇洗脱，简化工艺过程，提高产品总黄酮、总生物碱及总多糖含量，降低成本的一种大孔树脂、离子交换树脂纯化桑白皮总黄酮、总生物碱的方法。本专利技术是依次通过如下方法步骤来实现的(I)原料的制备净选新鲜桑白皮药材，将原料桑白皮粉碎至1(Γ40目待用；(2)原料的处理第一次加入8倍桑白皮重量的60%的乙醇先浸泡2 3 h，微沸状态下保温I h，第二次用6倍量60%醇微沸状态下保温I h，提取两次，合并提取液；(3)回收乙醇将提取液减压回收乙醇至O. Γ0. 2 g生药/mL浓度；(4)趁热过滤将浓缩至适当浓度的提取液过30(Γ400目滤袋，滤除部分杂质；(5)树脂分离将滤液通过装有ΡΙΡ0-01号大孔树脂及732强酸型阳离子交换树脂的2节高压串联树脂；(6)洗脱先用10 BV水洗脱2节串联树月旨，再分别用6BV 80%的乙醇洗脱大孔树脂柱、O. 5 mol/L氨水洗脱离子交换柱；(7)回收分别将乙醇、氨水洗脱液及通过2节高压串联树脂后的未吸附液减压回收得浓缩液；(8)冷冻干燥将减压回收的浓缩液置_20°C冷冻过夜后，冷冻干燥成粉末，可得含量为60%以上的总黄酮，40%以上的总生物碱及50%以上的总多糖；(9)成品入库将总黄酮、总生物碱及总多糖分装于双层塑料袋中，置于干燥处保存。本专利技术质量控制方法可包括以下含量测定方法中的一种或几种I.总黄酮精密称取桑根酮C对照品适量(约3mg),置于IOmL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密吸取桑根酮C对照品溶液0.0，1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL，置加有镁粉300 mg的具塞刻度试管中。将试管置冷水浴(15 °C左右)中，缓慢滴加浓HCL 3 mL,并不时振摇试管。最后加甲醇补足至10 mL,摇勻，置沸水浴中加热60 min,取 出，迅速冷却至室温，于481 nm处测定吸光度。以桑根酮C对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。精密称取桑白皮总黄酮提取物样品各3份，每份IOmg,置于10 mL容量瓶中，力口甲醇超声溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取上述样品溶液2 mL置加有镁粉300 mg的具塞刻度试管中。将试管置冷水浴(15 °C左右)中，缓慢滴加浓HCL 3 mL，并不时振摇试管。最后加甲醇补足至10 mL，摇匀，置沸水浴中加热60 min，取出，迅速冷却至室温，于481 nm处测定吸光度，外标两点法计算含量。2.桑根酮 C、D色谱条件色谱柱YMC-Pack ODS-AQ (5 μ m, 250 mm X 4. 6 mm);流动相甲醇-O. 2% 甲酸水(68:32);流速1. O mL.min-1 ;检测波长:283 nm ;柱温30°C。标准曲线绘制精密量取对照品溶液5、10、15、20、25 PL依次进样，测定各色谱峰峰面积，以峰面积值纵坐标，进样量(ug)为横坐标，绘制标准曲线。含量测定精密称取3批桑白皮总黄酮提取物样品各3份，每份10mg，置于IOmL容量瓶中，加甲醇超声溶解并稀释至刻度，摇匀。作为桑根酮含量测定的供试品溶液。精密吸取上述供试品溶液10 μ ，注入色谱液相仪，测定各色谱峰峰面积，计算含量。3.总生物碱精密称取I-脱氧野尻霉素(DNJ)对照品适量(约3 mg)，置于IOmL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密吸取I-脱氧野尻霉素(DNJ)对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5. O mL，精密加入2%的雷氏铵盐溶液3 mL，涡旋10 s,置冰浴中放置1.5 ho以3500 r ·η η-1离心10 min,弃去上清液,用水洗漆沉淀至洗脱液至无色，沉淀用10 mL 70%丙酮溶液溶解，以3500 r *min-l离心5 min,取上清液于523 nm处测定其吸光度。精密称取桑白皮总生物碱提取物样品各3份，每份10 mg,置于10 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。3500 r ·πι η-1离心10 min,取上清液，精密量取上清液5mL于10 mL离心管，精密加入2%的雷氏铵盐溶液3 mL，涡旋10 s,置冰浴中放置1.5 h。以3500 r ·η η-1离心10 min,弃去上清液,用水洗漆沉淀至洗脱液至无色,沉淀用10 mL70%丙酮溶液溶解，以3500 r -min-l离心5 min，取上清液于523 nm处测定其吸光度。外标两点法计算含量。4. I-脱氧野尻霉素(DNJ)含量测定色谱条件色谱柱YMC-PackODS-AQ (5 μ m, 250 mm X 4.6 mm);流动相甲醇-O. 1%冰醋酸水溶液(65:35);流速1. O mL.min-1 ;检测波长:265 nm ;柱温30 °C。标准曲线绘制柱前衍生化处理20 °C下，DNJ和过量的荧光试剂FMOC-Cl在pH 8. 5的硼酸盐缓冲液中反应20 min，生成荧光产物DNJ-FM0C。精密吸取各药材提取液0.2 mL，置于2 mL离心管中，分别依次加入0.4 mL硼酸盐缓冲液(pH 8.5),0.2 mL10 mmol*L-l FMOC-Cl的乙腈溶液，立即混匀，20 °C恒温水浴箱中反应20 min，加入Imol*L-l甘氨酸50 PL中和剩余的衍生化试剂FMOC-Cl，再加入体积分数为1%的冰醋酸溶液，定容至I mL，混匀，滤过，即得各药材供试液。取重本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种桑白皮总黄酮、总生物碱及总多糖同步生产工艺，其特征在于将桑白皮粉碎至10~40目，粉碎过细影响放料，第一次加入8倍桑白皮重量的60%的乙醇先浸泡2~3？h，微沸状态下保温1？h，第二次加入6？倍量60%？醇微沸状态下保温1？h，提取两次，然后合并提取液，将提取液减压回收乙醇至0.1~0.2？g生药/mL浓度。将此浓缩液过300~400目滤袋后，滤液通过装有PIPO？01号大孔树脂及732强酸型阳离子交换树脂的2节高压串联树脂。上样量为原料（重量g）：树脂（重量g）=1:1时，完成上样，流速为1/10BV/min。先用10？BV水洗脱2节串联树脂，后分别用6BV？80%的乙醇洗脱大孔树脂柱、0.5mol/L氨水洗脱离子交换柱。再分别将乙醇、氨水洗脱液及通过2节高压串联树脂后的未吸附液减压回收得浓缩液后再冷冻干燥。分别得到桑白皮总黄酮、总生物碱及总多糖粗品。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李卫民，袁晓，周东斌，段志涛，
申请(专利权)人：广州牌牌生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。