一种红霉素杂质E的制备方法技术

本发明专利技术公开一种红霉素杂质E的制备方法，所述制备方法为：在红霉素中，加入甲醇水，在25～30℃、酸性条件下搅拌反应，然后将反应液经过分离纯化，得到红霉素杂质E。本发明专利技术红霉素杂质E的制备方法，反应条件温和，不涉及超低温反应，减少了工艺步骤，适用于实验室中试放大；制备得到的红霉素杂质E纯度达到90％以上，能满足质量研究需要，同时为红霉素国家质量标准提升提供了技术基础。

【技术实现步骤摘要】
一种红霉素杂质E的制备方法
本专利技术属于药物化学领域，具体涉及一种红霉素杂质E的制备方法。
技术介绍
红霉素(Erythromycin)属于大环内酯类抗生素，是一种发酵类抗生素，在医学领域已经被广泛开发和应用。抗菌谱与青霉素近似，对革兰阳性菌，如葡萄球菌、化脓性链球菌、绿色链球菌、肺炎链球菌、粪链球菌、溶血性链球菌、梭状芽孢杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌等有较强的抑制作用。对革兰阴性菌，如淋球菌、螺旋杆菌、百日咳杆菌、布氏杆菌、军团菌、脑膜炎双球菌以及流感嗜血杆菌、拟杆菌、部分痢疾杆菌及大肠杆菌等也有一定的抑制作用。此外，对支原体、放线菌、螺旋体、立克次体、衣原体、奴卡菌、少数分枝杆菌和阿米巴原虫有抑制作用。红霉素杂质是在药品中没有任何药效作用的一类成分，且部分杂质有致癌和致畸性，这些杂质存在不良反应，严重影响用药安全，给用药者带来不可估量的风险。国内仿制药的制备工艺多样，造成其产生的杂质不一样，与原研药的工艺不同，其杂质含量、种类上也会有所差异，但国内对这些杂质产生机理、合成制备、分离纯化、药理都未能系统全面地进行研究，有些杂质存在多个互变异构体，受限于分离纯化技术难于得到单体杂质，得不到系统研究，造成仿制药质量明显差于原研药。因此，对杂质的研究尤为重要，合成分离出杂质单体对其结构、毒性、质量控制研究是必不可少的，对国内药品质量提高有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种红霉素杂质E的制备方法；该制备方法反应条件温和，不涉及超低温反应，减少了工艺步骤，适用于实验室中试放大。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种红霉素杂质E的制备方法，所述制备方法为：在红霉素中，加入甲醇水，在25～30℃、酸性条件下搅拌反应，然后将反应液经过分离纯化，得到红霉素杂质E；所述红霉素杂质E的化学结构式如下：本专利技术红霉素杂质D的化学结构式为：C37H65NO12，分子式为715，本专利技术制备方法的反应过程如下：作为本专利技术所述制备方法的优选实施方式，所述制备方法包括以下步骤：(1)在红霉素中加入甲醇水，室温搅拌下缓慢滴加酸，保持反应液的pH为2～2.5，进行搅拌反应，得到反应液；(2)将反应液用碱调PH至8～9，得到红霉素杂质E反应液；(3)将红霉素杂质E反应液加入甲醇溶解，上C18柱分离，依次用不同浓度的乙腈水溶液进行洗脱，冻干，得到纯度达90％以上的红霉素杂质E纯品。作为本专利技术所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(1)中，所述步骤(1)中，相对每克红霉素，甲醇水的用量为10～20mL；所述甲醇水中甲醇的体积百分含量为45％～55％。作为本专利技术所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(1)中的酸为浓盐酸。作为本专利技术所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(2)中的碱为浓度为0.5～1.5mol/L的氢氧化钠。作为本专利技术所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(1)中，搅拌反应的时间为1～2h。作为本专利技术所述制备方法的优选实施方式，所述步骤(3)中，上600mLC18柱分离，依次用体积比为50：50、60：40、65：35的乙腈、水溶液各洗脱1.5L，得到红霉素杂质E纯品流份，冻干，得到红霉素杂质E纯品。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术红霉素杂质E的制备方法，反应条件温和，不涉及超低温反应，减少了工艺步骤，适用于实验室中试放大；制备得到的红霉素杂质E纯度达到90％以上，能满足质量研究需要，同时为红霉素国家质量标准提升提供了技术基础。附图说明图1为由本专利技术的制备方法制备得到的红霉素杂质E的HPLC检测图谱(色谱条件：欧洲药典9.0)；图2为空白对照的HPLC检测图谱(色谱条件：欧洲药典9.0)；图3为由本专利技术的制备方法制备得到的红霉素杂质E的HNMR图谱；图4为由本专利技术的制备方法制备得到的红霉素杂质E的C13NMR图谱；图5为由本专利技术的制备方法制备得到的红霉素杂质E的ESI-MS图谱。具体实施方式为更好地说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1本实施例所述红霉素杂质E的制备方法，包括以下步骤：(1)称取5g红霉素，加入50％甲醇水50mL，室温搅拌下缓慢滴加浓盐酸，保持反应液的pH为2.0，搅拌反应1h；(2)将反应液用1mol/L氢氧化钠调PH至8～9，得到红霉素杂质E反应液；(3)将红霉素杂质E反应液加甲醇溶解，上600mLC18柱分离，用乙腈：水溶液＝50：50(V/V)、60：40(V/V)、65：35(V/V)各洗脱1.5L，得到红霉素杂质E纯品流份，冻干得到红霉素杂质E纯品，纯度达到90％以上，收率10.4％。实施例2本实施例所述红霉素杂质E的制备方法，包括以下步骤：(1)称取5g红霉素，加入50％甲醇水75mL，室温搅拌下缓慢滴加浓盐酸，保持反应液的pH为2.2，搅拌反应1.5h；(2)将反应液用1mol/L氢氧化钠调PH至8～9，得到红霉素杂质E反应液；(3)将红霉素杂质E反应液加甲醇溶解，上600mLC18柱分离，用乙腈：水溶液＝50：50(V/V)、60：40(V/V)、65：35(V/V)各洗脱1.5L，得到红霉素杂质E纯品流份，冻干得到红霉素杂质E纯品，纯度达到90％以上，收率15.3％。实施例3本实施例所述红霉素杂质E的制备方法，包括以下步骤：(1)称取5g红霉素，加入45％甲醇水100mL，室温搅拌下缓慢滴加浓盐酸，保持反应液的pH为2.5，搅拌反应2h；(2)将反应液用0.5mol/L氢氧化钠调PH至8～9，得到红霉素杂质E反应液；(3)将红霉素杂质E反应液加甲醇溶解，上600mLC18柱分离，用乙腈：水溶液＝50：50(V/V)、60：40(V/V)、65：35(V/V)各洗脱1.5L，得到红霉素杂质E纯品流份，冻干得到红霉素杂质E纯品，纯度达到90％以上，收率9.3％。实施例4本实施例所述红霉素杂质E的制备方法，包括以下步骤：(1)称取5g红霉素，加入55％甲醇水50mL，室温搅拌下缓慢滴加浓盐酸，保持反应液的pH为2.0，搅拌反应2h；(2)将反应液用1.5mol/L氢氧化钠调PH至8～9，得到红霉素杂质E反应液；(3)将红霉素杂质E反应液加甲醇溶解，上600mLC18柱分离，用乙腈：水溶液＝50：50(V/V)、60：40(V/V)、65：35(V/V)各洗脱1.5L，得到红霉素杂质E纯品流份，冻干得到红霉素杂质E纯品，纯度达到90％以上，收率8.8％。实施例1～4制备得到的红霉素杂质E，HPLC检测图谱如图1所示，空白对照的HPLC检测图谱如图2所示，结构鉴定HNMR图谱、C13NMR图谱、ESI-MS图谱分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种红霉素杂质E的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：在红霉素中，加入甲醇水，在25～30℃、酸性条件下搅拌反应，然后将反应液经过分离纯化，得到红霉素杂质E；所述红霉素杂质E的化学结构式如下：/n

【技术特征摘要】
1.一种红霉素杂质E的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：在红霉素中，加入甲醇水，在25～30℃、酸性条件下搅拌反应，然后将反应液经过分离纯化，得到红霉素杂质E；所述红霉素杂质E的化学结构式如下：





2.如权利要求1所述红霉素杂质E的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)在红霉素中加入甲醇水，室温搅拌下缓慢滴加酸，保持反应液的pH为2～2.5，进行搅拌反应，得到反应液；
(2)将反应液用碱调PH至8～9，得到红霉素杂质E反应液；
(3)将红霉素杂质E反应液加入甲醇溶解，上C18柱分离，依次用不同浓度的乙腈水溶液进行洗脱，冻干，得到纯度达90％以上的红霉素杂质E纯品。


3.如权利要求2所述的红霉素杂质E的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁晓，林顺权，
申请(专利权)人：广州牌牌生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44