【技术实现步骤摘要】
胰岛素样生长因子_1 (IGF-1)缺陷的治疗方法 本申请是国际申请PCT//US2004/029735，国际申请日2004年9月9日，中国国家阶段申请号2 00480030864. 2，名称“胰岛素样生长因子-I (IGF-I)缺陷的治疗方法”的专利技术专利申请的分案申请。相关申请的交叉参考本申请要求2003年9月12日提交的美国临时申请号60/502，579的优先权，将该申请全文纳入本文作为参考。专利
本专利技术涉及提高胰岛素样生长因子-I缺陷患者的生长速率、缓解症状或改善代谢的方法和组合物。专利技术背景美国儿科学院和美国临床内分泌学院将在人群平均高度以下大于两倍标准差的高度定义为身材矮小症。身材矮小症患儿身高在类似年龄和性别的儿童的97. 5%以下，一般男孩和女孩的最终成年高度不超过约5’ 4和4’ 11。根据儿科内分泌学家的评估，估计美国有380，000儿童患有身材矮小症。尽管经过数十年的潜心研究，转角们仍然难以对身材矮小症患儿进行评价和可能治疗。对于没有可证明的原因而生长失败的患者而言，首先设法根据该儿童应达到与其家族一致的成年高度区分正规变差和病理情况，然后通常进行身体检查。在预计成年身高也低的明显身材矮小症的情况下，常常需要测试生长激素(GH)-胰岛素样生长因子(IGF)轴的状态。GH-IGF轴异常的患者具有许多可能病因。他们可能患有GH缺陷(GHD)，有时可归因于先天性或后天性中枢神经系统(CNS)损伤对下丘脑或垂体产生的影响，在儿童中这几乎总是伴随低水平IGF-I。或者，虽然他们看上去GH分泌正常，但是他们可能患有与低水平IGF-I相...
【技术保护点】
胰岛素样生长因子？1即IGF？1用于制造治疗患有原发性胰岛素样生长因子？1缺陷即IGFD的人受治者的药物的用途，其中所述受治者特征如下：在用IGF？1治疗时或初次治疗之前，身高至少在同性别同龄者身高的正常平均值以下约2个标准差(SD)，和在用IGF？1治疗时或初次治疗之前，IGF？1的血液水平至少在同性别同龄者的正常平均水平以下约1SD，其中所述受治者未患Laron综合征或部分生长激素不敏感综合征，所述药物能有效治疗所述受治者的IGFD。
【技术特征摘要】
2003.09.12 US 60/502,579书时可排除任何任选元素。同样，此陈述打算作为与权利要求元素的复述一起使用排他性术语如“单独地”、“仅”等，或采用“负”限定的先前基础。在进一步描述本发明之前，应理解，本发明不限于所述具体实施方式，因为这些当然可改变。也应理解，本文所用术语仅用于描述具体实施方式，不旨在限制，因为本发明范围仅由所附权利要求书限制。当提供了值的范围时，应理解，本发明包括该范围的上限和下限之间各居中值以及所述范围中的任何其它规定值或居中值，所述居中值以下限单位的十分之一为间隔，除非另有说明。可将这些较小范围的上限和下限独立地包括在较小范围中，并且也包括在本发明范围内，在所述范围中有任何特别排除的限制。所述范围包括一个或两个限制，本发明也包括排除那些包括的限制的一个或两个的范围。除非另有说明，本文所用的所有技术和科学术语的涵义与本发明所述领域普通技术人员通常理解的相同。虽然在实施或测试本发明中也可采用与本文所述相似或相当的任何方法和材料，但是现在开始描述优选的方法和材料。将本文所提及的所有出版物纳入本文作为参考，连通引用的出版物一起公开和描述方法和/或材料。应注意，在本文和所附权利要求书中所用的单数形式“一个”、“一种”和“这种”包括复数涵义，除非上下文明确指出。因此，例如，提到“一个个体”包括一个或多个个体，提到“这种方法”包括本领域技术人员已知的等效步骤和方法，等等。单独提供了本文所讨论的在本申请提交日期之前公开的出版物。在这里没有什么被理解为由于在先发明而允许本发明不给先于这种出版物的权利。还有，提供的公开日期可与实际公开日期不同，可能需要独立地确认实际公开日期。这里引用或讨论的参考文献不应认为允许这种参考文献是本发明的现有技术。现在开始更详细地描述本发明。附图简要说明图I是描述在以前鉴定患有II型糖尿病的成年患者中身高SDS与IGF-I血液浓度的散点图。发明详述本发明是基于令人惊讶的发现，即给予IGF-I能够使以前认为不适合用IGF-I治疗来达到更正常的身高(例如，接近或在相应年龄和性别的正常范围内)的某些儿科患者群体的身高生长增加。尽管不受限于具体理论，当发现生长激素结合蛋白(GHBP)的水平反应实际GH受体的状态时，它不是来自GH受体结合事件的胞内信号通路“下游”的良好指示物。因此，令人惊讶的是，证明是GH抗性的儿科患者比仅通过测量GHBP水平鉴定的患者多得多。根据本文所述的发现，现在估计有惊人数量的儿童，在美国和西欧约有60，000名儿童患有原发性胰岛素样生长因子缺陷(IGFD)。而且，在美国和欧洲大约有12，000名儿童受到严重的原发性IGFD的折磨，原发性IGFD定义为身高SDS至少在相应年龄和性别的正常平均值以下负三(彡-3)(即至少3个或更多SD以下)，IGF-1 SDS至少在相应年龄和性别的正常平均值以下负三(< -3)(即至少3个或更多SD以下)，生长激素水平至少在正常范围内的儿童。如果不治疗，这些患有严重的原发性IGFD的儿童中男孩和女孩的最终成年身高将不超过大约5’Γ和4’972〃。因此，大量成人患有终身IGFD的不良代谢效应。在美国和西欧至少有120，000个体患有成人原发性IGFD。成人原发性IGFD的一般特征是终身IGF-I缺陷。这种病症类似于儿科原发性IGFD并与身高SDS至少在相应年龄和性别的正常平均值以下负二( ( -2)(即至少2个或更多SD以下)，IGF-1 SDS至少在正常平均值以下负二(彡_2)(即至少2个或更多SD以下)，以及正常的生长激素水平有关。成年IGFD患者的血压升高、心脏性能降低、心脏病、肾病、运动性能损伤、肌肉量减少、骨密度降低、肥胖和碳水化合物和脂质代谢异常。rhIGF-Ι的替补疗法将具有与这些代谢和功能异常有关的有益效果。在几项研究中检测了成人身高和冠心病(CHD)死亡率之间的相关性。规模非常大的“护士健康研究”对121，700名年龄为30-55岁的美国女护士进行前瞻性群组研究， 显示在女性中身高与冠心病风险逆相关(Rich-Edwards等，1995, Am J Epidemiol. 142 909-17)。而且，有关在1，046名男性中身材矮小症与临床方法的最近研究显示了较矮的男性患有用血管造影术证实的CHD的患病率更高、严重性更大(Nwasokwa等，1997，Am HeartJ 133:147-52)。近年来，证明了身材矮小症是冠心病的独立风险因素(Forsen等，2000，JIntern Med. 248 :326-32)。这些作者推测(但排除)生长激素缺陷可能是起初患身材矮小症和后来对心脏的副作用的原因。此外，这些作者未推测在这些身材矮小症患者中IGFD可能是身材矮小症和冠心病的原因的可能性。另一在欧洲进行的大规模研究表明身材矮小症与几种代谢障碍相关，在男性中骨骼不均衡与糖尿病相关，而在女性中确认了身材矮小症与冠心病相关(Han等，1997，Eur JClin Nutr. 51 :804-9)。而且，身材矮小症和肾病之间也有联系。最近的研究测量了 3，960名40岁和年龄更大的患者的尿中白蛋白水平(Metcalf 等，1997, Int Journal of Obesity 21:203-210)。根据正常人群的参比值，如果尿中白蛋白高于28mg/dl，则将其定义为存在微量白蛋白尿。也测量该个体的身高。持续性微量白蛋白尿是糖尿病肾病(肾病)的预兆和心血管疾病的死亡率和发病率上升的预兆。在这些患者中，身材矮小症明显预示着尿白蛋白排泄的增加。其它研究发现了类似的关系(Gould等，1993，Br Med J 306:240-243)。Metcalf等未解释身高和肾病标记之间的这种关系的基础。由于本说明书中所述的IGF-I血液浓度和身高之间的意外关系，可为这些发现提供解释。大量文献表明，IGF-I影响肾脏的结构和功能(Clark和Roelfsema，2001，J AmSocNephrol. 12 :1297-306)。因此，可看出，IGF-I血液浓度随身高变化可解释上述身高和肾病之间的关系。因此，矮小且IGF-I血液浓度低的患者(IGFD患者)是从IGF-I治疗中获得最大好处的患者。在这些IGFD患者中，希望用IGF-I进行替补疗法能减少微量白蛋白尿，改善肾功能并降低死亡率。清楚的是,并不是身高本身具有这些效应,而是影响身高的内在机制。Forsen等指出，仍然不知道这些因素和机制通过哪些因素起作用。已证明，在肥胖患者和II型糖尿病患者中，总 IGF-I 血液浓度相对正常(Frystyk 等，1999, Diabetes Metab Res Rev. 15 314-22)。然而，几乎没有信息关于成人或患有心血管疾病或心脏病的矮小成人中的IGF-I水平。在GH水平至少为正常值的情况下，低水平的IGF-I是GH抗性的征兆。这是生长激素不敏感综合征(GHIS)的概念，低水平的GHBP是GH抗性的征兆，这预示着GH抗性与低血液浓度的GHBP相关，并因此与少量GH受体相关。然而，现在认识到，作为本发明的一部分，由GH抗性引起矮小的患者比以前所述多许多。这是因为，如本文所述，GH抗性的主要测量值是IGF-I血液浓度和GH血液浓度，而非GHBP的血液浓度。不受限于任何一个理论，GH抗性更可能是由于胞内GH信号传输缺陷，而不是细胞本身上GH受体的数量或功能不足。因此清楚的是，GHBP的血液浓度仅指示少数患者的GH抗性程度。IGF-1血液浓度是GH抗性程度的较佳指示物、或血液标记、或患者的生化特征，(如在患有身材矮小症的个体中所观察的)。因此，用IGF-I替补疗法测量和给予IGF-I缺陷的患者比测量和给予GHBP缺陷的患者效果更好。IGF-I血液浓度也有深刻的代谢效应。因此，从患有IGFD的儿童变成成人，他们连 续遭受着IGF-I缺陷的影响。因为在青春期之后，长骨中的生长板融合，不可能再发生软骨和骨生长，以及再增加身高，rhIGF-Ι替补疗法不能使成人生长。然而，低血液浓度的IGF-I也常常与其它代谢障碍，包括脂质异常、骨密度降低、肥胖、胰岛素抗性、心脏性能降低、肌肉量减少、运动耐量和保持良好状态的下降相关。这些疾病一般在IGF-I缺陷的延长时间后变得越来越明显，如成年期中所出现的那样。因此，将此种疾病称为成人IGFD。本发明的目的是提供使IGFD患者身高和生长速率增加以及改善代谢和功能的方法和组合物。在某些实施方式中，如在IGFD患者的情况下，治疗目的是恢复生物活性IGF-I水平或增加暴露于IGF-I的组织，如年龄和性别相同的正常受试者和儿童中所发现的那样，从而使这些受试者的身高和生长速率增加到年龄和性别相同的受试者的正常范围内，而在成人中，降低表征的IGFD的不良代谢性和功能性缺陷的发生率。给予IGF-I本发明通过将有效量的IGF-I给予患者提供了使身高和生长速率增加以及改善IGFD患者的代谢的方法和组合物。在一些实施方式中，采用天然人IGF-I。在其它实施方式中，采用IGF-I变体。在其它实施方式中，采用IGF-I取代物。适合用于本方法的是IGF-I变体。经设计，IGF-I变体可保持与I型IGF受体的有效结合，还会降低与血清运载体蛋白，例如IGFBP的结合。在一个方面，这些变体的设计是根据胰岛素不与血清运载体蛋白结合的观察。参见1989年10月24日颁发的美国专利号4，876，242，特别将其全文纳入本文作为参考。来自合成的胰岛素样双链类似物的证据说明负责运载体蛋白结合的IGF-I的氨基酸在IGF-I的B区域。因此，可修饰人IGF-I的合成基因以编码IGF-I变体，其中hIGF-Ι的前16个氨基酸被人胰岛素B链的前17个氨基酸所取代。然后将合成基因置于酵母重组DNA表达系统并从其中提取由修饰的酵母细胞生产的肽类似物并进行纯化。对IGF-I分子进行再修饰产生其它类似物，所有类似物具有显著的IGF-I I型受体结合，并降低与血清运载体蛋白的结合。本领域熟知的其它IGF-I变体和类似物也适用于本发明方法。这些变体包括例如具有真正IGF-I的残基1-69的变体，在WO 96/33216中进一步描述，双链IGF-I超激动剂是具有简化的C结构域的天然存在的单链IGF-I衍生物，在EP 742，228中进一步描述。IGF-I类似物具有通式BCn，A，其中B是IGF-I的B结构域或其功能类似物，C是IGF-I的C结构域或其功能类似物，η是C结构域中的氨基酸数量，约为6 — 12个氨基酸，包括约8 -10个氨基酸，A是IGF-I的A结构域或其功能类似物。也适用于本发明方法的是本领域熟知的IGF-I的功能突变体。这些功能突变体包括 Cascieri 等(1988, Biochemistry 27 :3229-3233)所述的突变体，Cascieri 等公开了IGF-I的四种突变体，其中三种对I型IGF受体的亲和力下降。这些突变体是(Phe23、Phe24、Tyr25) IGF-I (它以其对I型和2型IGF和胰岛素受体的亲和力与人IGF-I等效)、(Leu24)IGF-I和(Ser24) IGF-I (它们与人胎盘I型IGF受体、胎盘胰岛素受体和大鼠和小鼠细胞的I型IGF受体的亲和力比IGF-I低)，和脱八肽(Leu24) IGF-I (其中在24位丢失芳香性与hIGF-Ι羧基端D区域的缺失相结合，它对I型受体的亲和力比(Leu24) IGF-I低，对胰岛素受体的亲和力比(Leu24) IGF-I高)。这四种突变体对人血清结合蛋白的亲和力正常。也适用于本发明方法包括本领域熟知的IGF-I的结构类似物。这些结构类似物包括 Bayne 等(1988, J Biol Chem 264:11004-11008)所述的类似物，Bayne 等公开了 IGF-I的三种结构类似物(1-62) IGF-I，它缺少IGF-I羧基端8个氨基酸的D区域；(1-27,Gly4，38-70) IGF-1，其中IGF-I的C区域的残基28-37被四个残基甘氨酸桥所取代；和(1-27，Gly4，38-62)IGF-1，具有C区域甘氨酸取代和D区域缺失。Peterkof sky等(1991，Endocrinology, 128 :1769-1779)公开了采用上述Bayne等的Gly4突变体的数据。美国专利号5，714，460涉及采用IGF-I或提高IGF-I的活性浓度以治疗神经损伤的化合物。其它结构类似物包括Cascieri 等(1989，J Biol Chem，264 :2199-2202)所述的类似物，公开的三种IGF-I类似物，其中IGF-I的A区域中的特定残基被胰岛素A链中的相应残基所取代。这些类似物是(He41, Glu45, Gin46、Thr49, Ser5。、IIesi、Ser53、Tyr55, Gln56)IGF-1，它是残基41从苏氨酸改变成异亮氨酸和A区域的残基42-56被取代的A链突变体；(Thr4/ Ser50, He51) IGF-I ;和(Tyr55、Gln56) IGF-1。结合于IGFBP-I或IGFBP-3，从而抑制内源性IGF-I与IGFBP相互作用的IGF-I点变体也适用于本发明方法，见美国专利号6，509，443的描述。在另一实施方式中，给予防止或抑制IGF-I与其结合蛋白相互作用的化合物，如能够有效抑制GF-I与其结合蛋白相互作用，从而使IGF-I与IGF受体结合的IGF-I激动剂分子能提高IGF-I水平。这种适用于本发明方法的IGF-I激动剂包括参见2001年6月26日颁发的美国专利号6，251，865中所述的激动剂，特别将其全文纳入本文作为参考。这些IGF-I激动剂分子可有效地取代结合于IGFBP的IGF-I。IGF结合蛋白(IGFBP)是至少六种蛋白质的家族(参见Jones和Clemmons, 1995,Endocr Rev, 16 :3-34 ;Bach 和 Rechler, 1995,Diabetes Reviews, 3 :38-61),其它相关蛋白质也可能与IGF结合。IGFBP与IGF-I和IGF-2结合的亲和性和特异性不同。参见Jones和Clemmons，上述；Bach和Rechler，上述。例如，IGFBP-3与IGF-I和IGF-2结合的亲和性相似，而IGFBP-2和IGFBP-6与IGF-2结合的亲和性比它们与IGF-I结合的亲和性高得多。参见 Bach 和 Rechler,上述；0h 等，1993, Endocrinology, 132, 1337-1344。也适用于本发明方法包括除天然IGFBP以外可通过与IGF-I结合可防止IGF-I与IGFBP结合从而提高IGF-I的生物活性的结合分子，如WO 94/04569所述。此外，能够防止或抑制IGF-I与其结合蛋白相互作用的其它分子包括IGF-I的配体抑制剂，如WO 97/39032所述。也适用于本发明方法包括与IGFBP-I或IGFBP-3结合，从而抑制内源性IGF-I与IGFBP相互作用的IGF-I点变体，如美国专利号6，509，443中进一步所述。也适用于本发明方法包括IGF取代物，它是由噬菌体呈现法发现的能够抑制IGF与其任何一种结合蛋白相互作用的肽，如美国专利号6，420，518 ;6，251，865和6，121，416中进一步所述，特别将其全文纳入本文作为参考。小分子非肽抑制剂也可从IGF-1/IGFBP-3复合物中释放生物活性IGF-1。例如，发现异喹啉类似物有效(参见Chen等，2001，J Med Chem 44:4001-10)。用高通量筛选和IGFBP放射性配体结合测定可发现其它化合物，如Chen等，2001所述。其它IGF-I激动剂包括但不限于小分子；合成药物；肽；多肽；蛋白质；核酸(如DNA和RNA核苷酸，包括但不限于反义核苷酸序列、三链螺旋和编码生物活性蛋白质、多肽 或肽的核苷酸序列)；抗体；合成或天然的无机分子；模拟物；和合成或天然的有机分子。 此外，本发明考虑采用基因治疗将IGF-I给予患者。通常，基因治疗可用重组载体在哺乳动物中表达IGF-I基因，使IGF-I水平提高(或过表达)。如果IGF激动剂化合物是肽，基因治疗也可用于表达编码IGF激动剂化合物的核酸。例如，反义寡核苷酸可用于降低IGFBP的表达。本领域普通技术人员可考虑到基因治疗的其它例子。将核酸(任选地包含在载体中)引入受试者细胞用于基因治疗目的方法主要有两种体内和离体。就体内递送而言，将核酸直接注入受试者，通常在需要提高IGF-I水平的部位。在离体治疗中，取出受试者细胞，将核酸引入这些分离细胞，修饰细胞可直接给予受试者，或，例如，装入多孔膜胶囊内植入受试者。参见，例如美国专利号4，892，538和5，283，187，特别将二者全文纳入本文作为参考。可用各种技术将核酸引入活细胞。这些技术取决于核酸是否体外转移到培养细胞中或者体内转移到预期宿主的细胞中。适合于将核酸体外转移到哺乳动物细胞中的技术包括采用脂质体、电穿孔、显微注射、细胞融合、DEAE-葡聚糖、磷酸钙沉淀法等。离体递送基因的常用载体是逆转录病毒。体内核酸转移技术的例子包括用病毒载体转染(如腺病毒、I型单纯疱疹病毒，或腺伴随病毒)和基于脂质的体系(例如，用于脂质介导的基因转移的脂质是D0TMA、D0PE和DC-Chol)。在一些情况下，需要用靶向靶细胞的物质，如对细胞表面膜蛋白或靶细胞特异的抗体，靶细胞上受体的配体等提供核酸来源。当采用脂质体时，与胞吞作用相关的细胞表面膜蛋白结合的蛋白可用于靶向和/或促进摄取，例如，针对具体细胞类型的衣壳蛋白或其片段，进行周期性内化的蛋白的抗体，和靶向胞内定位和延长胞内半衰期的蛋白。例如，Wu等，1987，J Biol Chem，262 :4429-4432 ;和 Wagner 等，1990，Proc Natl Acad Sci USA, 87 3410-3414中描述了受体介导的胞吞作用的技术。对目前已知的基因标记和基因治疗方法的综述见Anderson等，1992，Science, 256 :808-813和WO 93/25673和其中引用的参考文献。联合治疗本发明也考虑采用IGF-I和一种或多种其他合适的试剂，如提高总IGF-I血液浓度或增强IGF-I效果的试剂的联合治疗。在一个实施方式中，这些额外试剂通常使血液IGF-I超过血液中IGFBP的量或使IGF-I从IGFBP释放，并包括促生长剂。[0106]用于此目的的促生长剂包括但不限于，在哺乳动物中促进内源性GH释放以提高IGF的血液浓度的GH促分泌素。例子包括TRH、二乙基己烯雌酚、茶碱、脑啡肽、E系列前列腺素，VIP-胰泌素-胰高血糖素-GRF家族的肽和其它GH促分泌素如美国专利号4，411，890所述的GHRP-6、GHRP-1，和苯并稠合的内酰胺，如美国专利号5，206，235所公开。也参见例如，1996年5月23日公开的WO 96/15148。其它促生长剂包括GHRP、GHRH、GH及其类似物。例如，在 1995 年 6 月 29 日公开的 WO 95/17422 和 WO 95/17423 ；Bowers, J, 1993, PediatrEndocrinol, 6 :21-31 ;和 Schoen 等，1993,Annual Reports in Medicinal Chemistry, 28 177-186中描述了 GHRP。例如，在1996年11月28日公开的WO 96/37514中描述了 GHRH及其类似物。可顺序或同时地共同给予该试剂和IGF-I，并可以与单独使用时相同、更高或更低的剂量给予该试剂，这取决于以下因素，如所用试剂类型、采用该试剂和化合物的目的和临床考虑的情况。此外，也考虑到操纵IGF状态的其它方式，如饮食或锻炼方案可用于联合治疗，作为本发明的一部分。在另一实施方式中，适当的与其结合蛋白的任何一种或多种，例如IGFBP-1、 IGFBP-2、IGFBP-3、IGFBP-4、IGFBP-5 或 IGFBP-6 —起给予 IGF-I。不受限于机理，共同给予IGF-I和IGFBP可通过延长IGF-I半衰期提供比单独给予IGF-I大的反应。适用的结合蛋白是IGFBP-3，如美国专利号5，258，287以及Martin和Baxter，1986，J Biol Chem，261 :8754-8760所述。这种糖基化的IGFBP-3蛋白是在载有大多数内源性IGF的人血浆中发现的125-150Kd糖蛋白复合物的非还原SDS-PAGE凝胶上约53Kd的酸稳定性成分，也受GH调节。可用美国专利号5，187，151所述的方法完成IGF结合蛋白和IGF-I的给药。简要说，通过皮下推注给予有效量的IGF-I和IGFBP，其摩尔比约为O. 5:1 — 3:1，包括约O. 75:1 — 2:1，如约 1:1。适合治疗的受试者适合用本文所述方法治疗的受试者包括患有IGFD的受试者。通常，IGFD患者群体具有，例如，以下特征1)身高至少约在相应年龄和性别的正常平均值以下2个标准差(SD)，和2) IGF-I血液浓度至少在正常平均浓度以下ISD。在一个实施方式中，本发明包括治疗高亲和性生长激素结合蛋白的血液浓度不至少在正常平均浓度以下2SD，且未患Laron综合征的IGFD儿童的方法。在另一实施方式中，本发明包括治疗高亲和性生长激素结合蛋白的血液浓度不至少在正常平均浓度以下2SD，且未患部分生长激素不敏感综合征(部分GHIS)的IGFD儿童的方法。在一个实施方式中，本发明包括治疗生长激素的平均或最大刺激血液浓度至少在正常范围内的IGFD儿童的方法。在某些实施方式中，患有IGFD的受试者的身高，例如，至少约在相应年龄和性别的正常平均值以下2. 0SD，至少约在相应年龄和性别的正常平均值以下2. 5SD (即-2. 5SD)，或至少约在相应年龄和性别的正常平均值以下3. 0SD，通常至少约在相应年龄和性别的正常平均值以下2. OSD和3. OSD之间，约在相应年龄和性别的正常平均值以下2. 5SD和3. OSD之间，或至少约在相应年龄和性别的正常平均值以下3. OSD0在某些实施方式中，患有IGFD的受试者的IGF-I血液浓度至少在其相应年龄和性别的正常范围以下ISD。IGF-I缺陷的受试者的IGF-I血液浓度可以是，例如，至少约在相应年龄和性别的正常平均浓度以下2.OSD，至少约在相应年龄和性别的正常平均浓度以下3. OSD，通常约在相应年龄和性别的正常平均浓度以下2. OSD至3. OSD0 IGFD患者的高亲和性生长激素结合蛋白的血液浓度低于正常平均值，但在正常平均值以下不超过2SD。在某些实施方式中，高亲和性生长激素结合蛋白的血液浓度在正常平均浓度和正常平均浓度以下-O. 5SD之间，在正常平均浓度和正常平均浓度以下O. 5SD之间，在正常平均浓度以下O. 5SD和I. OSD之间，在正常平均浓度以下I. OSD和I. 5SD之间，或在正常平均浓度以下1.5SD和2. OSD之间。可用本领域已知的常规方法鉴定得益于IGF-I水平提高的身材矮小症患者。可检测血液中的IGF-I水平。可用标准遗传学测定检测与IGF-I相关的遗传异常。可用常规测定检测局部IGF-I不足的标记(如IGFBP-I水平)。可通过任何方法，包括RIA和ELISA在生物液体如体液或血液中测量IGF水平。例如，可用市售的放射性免疫测定(Medgenix Diagnostics,Brussels,Belgium ；IGF-1 RIA试 剂盒,Nichols Institute, San Juan Capistrano, CA)测定血液中的总 IGF-1,尤其在用酸乙醇抽提血样以去除通过与抗IGF-I抗体竞争干扰IGF-I检测的结合蛋白后。可用市售的免疫放射测定(IRMA)测量 IGFBP 的 IGFBP-I 和 IGFBP-3 (Diagnostic System LaboratoriesInc.，Webster, TX)。另一方法包括测量血液中“游离”或活性IGF的浓度。例如，美国专利号5，198，340中描述的一种方法，特别将其全文纳入本文作为参考。2001年6月26日颁发的美国专利号6，251，865中描述了其它方法，特别将其全文纳入作为参考，以检测与IGF结合蛋白结合的内源性或外源性IGF或与IGF结合蛋白结合和不与结合于IGF结合蛋白的人IGF受体结合的化合物的量，或检测生物液体中未结合IGF的水平。此方法包括(a)使该液体接触I)用于检测连接于固相运载体的对化合物特异的化合物(如对该化合物上表位特异的第一抗体)的方法，以致在该化合物的存在下，化合物上的IGF结合位点仍然可用于与IGF结合蛋白结合，从而形成该物质和IGF结合蛋白之间的复合物；和2)该化合物，时间足以使IGF结合蛋白上所有可用IGF结合位点饱和，从而形成饱和复合物；(b)使该饱和复合物接触具有可检测标记的第二种物质，该物质对IGF结合蛋白特异(如对IGFBP上的表位特异的第二抗体)，当化合物结合于IGF结合蛋白时，该物质可用于结合；和(c)定量分析结合的标记物质的量，以测量生物液体中的IGFBP ;从而作为测量结合的化合物和IGF结合蛋白，结合的IGF和IGF结合蛋白，或该液体中存在的活性IGF的量的方法。特别将其全文纳入本文作为参考的美国专利号5，593，844和5，210，017公开了配体介导的免疫功能结合蛋白测定方法，可用抗体来定量液体样品中的IGFBP量，其中在这些结合蛋白之一和与它结合的配体之间形成复合物。上述采用抗体的定量技术称为配体介导的免疫功能方法(LIFA)，美国专利号5，593，844中描述了采用该方法通过接触IGF测定IGFBP的量，特别将其全文纳入本文作为参考。给药剂量和方案本领域技术人员，如临床医生或医生可根据本领域普通技术人员已知的几个因素来确定(例如通过临床试验)有效治疗剂量的选择。这些因素包括例如，IGF-I的具体形式和化合物药代动力学参数如生物利用度、代谢、半衰期等，在开发过程中确定，一般用于获得管理机构对药物化合物的批准。其它涉及剂量的因素包括待治疗疾病或病症、在受试者中获得的益处、受试者的体重、受试者的免疫状态、给药途径、给予该化合物或联合治疗剂是急性或慢性、伴随药物和本领域技术人员已知会影响所给予药物的药效的其它因素。将IGFD作为新病症鉴定和治疗与鉴定和治疗GHD直接平行。其它人已经注意到(Drake 等，2001, Endocrine Reviews 22 :425-450)，仅在 1989 年出现了现代神经放射性成像技术后，才明确建立了对成人GH缺陷的诊断。对垂体较小或受损的患者以及低水平IGF-I和低水平GH的这种鉴定大大有助于建立对成人GHD的诊断。也因此，仅在相当近的时间内，人们才认识到有与自发性GH分泌失败相关的特征性临床综合征，并建立了采用重组GH来逆转它的许多特征。对于如何用IGF-I治疗，通过实施GH替补疗法对考虑这些方法有指导性。在成人中，没有相当于儿童身高和生长的GH作用的生物学标记。因此，难以判断成人中GH替换的疗效。如果给予过高剂量，难以通过出现副作用来评价最佳GH取代。因此，以低剂量开始GH治疗，然后将剂量增加到最终维持剂量。通过测量IGF-I血液浓度来最佳地确定成人合适的GH剂量非常具有指导性，以避免IGF-I的上述生理浓度。 除了采用生长激素以外，拮抗剂也具有指导性。在GH过量的情况下(如肢端肥大症)，用生长激素拮抗剂治疗的当前目标是将IGF-I水平降低到正常范围内。测量IGF-I血液浓度的特征在于，作为治疗后存在肢端肥大症和持续性疾病的敏感和特异的指不物(Freda，2003，GH 和 IGF Research 13:171-184)。现在，在几千名患者中测量了 IGF-I的血液浓度的标准数据，以便确定IGF-I标准差评分(IGF-1 SDS) (Juul, GH and IGF Research 13，113-170，2003)。正如在儿童中，这些标准数据是根据年龄和性别调整的，以确定受试者在特定年龄和性别的标准范围。清楚的是，成人中(和儿童中)合适替补疗法的平行争论是为了确立能够将IGF-I水平提高到根据年龄调整的正常范围中的IGF-I剂量。最近进行了许多工作，以确立儿童和成人中 IGF-I 水平的正常范围(Juul，GH and IGF Research 13，113-170，2003，特别将其全文纳入本文作为参考)。在一些实施方式中，以受试者体重计，胃肠道外给予的每剂量中IGF-I总药物有效量约10微克/千克/日一 400微克/千克/日，包括约20微克/千克/日一 200微克/千克/日，如约40微克/千克/日一 100微克/千克/日，但是，这需要进行大量的治疗判断。成人的优选剂量约为10微克/千克/日一 160微克/千克/日。其它感兴趣的成人剂量约为10微克/千克/日一 180微克/千克/日。在一些实施方式中，尤其感兴趣的是将20 — 240微克/千克/日IGF-I给予受试者。可通过任何手段，包括注射(单次或多次，如每天1-4次)或输注给予IGF-I。在某些实施方式中，可通过皮下注射每天给予IGF-I —次或两次。如果采用缓释剂型，一般所用剂量(以每天计)更小，至多到上述剂量的一半。本发明还提供了用IGF-I和药学上可接受的运载体的药物组合物提高生长速率的方法。合适的药学上可接受的运载体包括不干扰药物组合物的生物活性的效力，基本上是化学惰性且无毒的药物组合物。合适的药物运载体的例子包括但不限于盐溶液，甘油溶液、乙醇、...
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