【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程领域，具体涉及毕赤酵母表达重组蛋白发酵液的分离纯化方法。
技术介绍
毕赤酵母表达系统是上世纪80年代初期发展起来的一种新型的外源蛋白表达系统，具有操作简易、易于培养、生长速度快、表达量高、成本低等优点。目前该系统已经成为广泛用于重组蛋白的生产，如重组人血白蛋白及其融合蛋白，工业用酶等。随着毕赤酵母高密度发酵技术的成熟与发展，提高发酵密度已经成为提高蛋白表达量的一种重要策略，目前毕赤酵母发酵菌体含量可达总发酵液的40 50%，甚至更高，这为毕赤酵母总发酵液的固液分离提出了更高的要求，特别是在工业化生产过程中。目前 常用的毕赤酵母固液分离方法主要有板框压滤法、膜分离法、扩张床层析法、离心法等。板框压滤法主要采用板框压滤机，通过添加助滤剂降低过滤阻力实现粗分离的方法，具有回收率高、操作简便、成本低等优势，但该方法所用设备占地面积大、澄清度低、过滤效果不稳定、不易封闭操作，且需要添加复杂成分的助滤剂，不利于杂质控制；膜分离法是在20世纪初出现、在60年代后迅速崛起的一门新技术，用该方法进行毕赤酵母粗分离，澄清度较高，操作方便，易于自动化，但是需要将...
【技术保护点】
一种毕赤酵母发酵液的固液分离方法，包括以下步骤：1)提供一种溶有壳聚糖的溶液；2)将步骤1)的溶液与含有重组蛋白质发酵产物的毕赤酵母发酵液混合均匀；3)用碱性物质调节步骤2)所得混合液的pH值至6～12，搅拌使壳聚糖絮凝；4)将步骤3)所得溶液离心或过滤，获得含有重组蛋白质的溶液。
【技术特征摘要】
1.一种毕赤酵母发酵液的固液分离方法，包括以下步骤 1)提供一种溶有壳聚糖的溶液； 2)将步骤I)的溶液与含有重组蛋白质发酵产物的毕赤酵母发酵液混合均匀； 3)用碱性物质调节步骤2)所得混合液的pH值至6 12，搅拌使壳聚糖絮凝； 4)将步骤3)所得溶液离心或过滤，获得含有重组蛋白质的溶液。2.根据权利要求I所述的一种毕赤酵母发酵液的固液分离方法，其特征在于，步骤I)所述的溶有壳聚糖的溶液选自壳聚糖的盐酸溶液，壳聚糖的醋酸溶液，或者将水溶性壳聚糖直接溶于水形成的溶液。3.根据权利要求I所述的一种毕赤酵母发酵液的固液分离方法，其特征在于，步骤I)进一步包括 a)将一种亲水性有机溶剂加入到步骤I)所述的溶有壳聚糖的溶液中。4.根据权利要求3所述的一种毕赤酵母发酵液的固液分离方法，其特征在于，所述亲水性有机溶剂与壳聚糖溶液的体积比为I : 9 I : 99。5.根据权利要求3或4所述的一种毕赤酵母发酵液的固液分离方法，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐杰，徐有富，聂磊，王海彬，杨仲毅，李丹，张赛平，徐期，白骅，
申请(专利权)人：浙江海正药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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