本发明专利技术涉及一种治疗癌症的组合药物，由索拉非尼和ABT-263组成。索拉非尼和ABT-263的摩尔比为（0.75～15）：1时，有良好的效果。本发明专利技术的体内和体外实验研究发现，索拉非尼和ABT-263联合用药能有效诱导癌细胞的凋亡，对癌症治疗具有显著疗效，所取得的抗癌效果具有协同和增效作用，是一种高效低毒的抗癌药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药
，涉及一种治疗癌症的组合药物。
技术介绍
癌症是各种恶性肿瘤的统称，其细胞的生长和分裂处于失控状态，能侵入正常组织，经由体内循环系统、淋巴系统或腔内转移至远离其起源的部位生长，严重挑战人类健康和生命安全。常见癌症包括肝癌、肠癌、食管癌、胃癌、鼻咽癌、脑肿瘤、肺癌、乳腺癌、宫颈癌、血癌与骨癌等。在世界范围内，其中杀伤力最强的是肺癌、胃癌和肝癌，分别约占癌症死亡人数的18%、10%和9%。在我国肺癌、胃癌、食管癌、肠癌、肝癌、宫颈癌、乳腺癌、白血 病、恶性淋巴瘤、鼻咽癌等是常发性癌症，且以肺癌、胃癌、食管癌、肝癌、乳腺癌、宫颈癌最为多见。癌症的治疗方法主要有手术治疗、放射治疗、化学治疗、祀向治疗、免疫治疗、激素治疗及血管生成抑制剂疗法等。其中前三者为目前临床治疗的主要手段，根据病人癌症种类、位置及所处的时期而采用不同的疗法。而放疗、化疗在杀伤肿瘤细胞的同时，对人体正常细胞也有损伤，副作用大且患者生活质量差、生存率低。因此，筛选高效低毒的抗癌药物一直是癌症治疗的重要研究领域。设计专门针对肿瘤细胞特定信号途径或特定癌细胞靶位点的药物，近年来越来越受到人们的极大关注。随着研究者对细胞死亡现象本质的探究，尤其是对细胞凋亡分子机理的阐明，使人们对抗癌药物的筛选及其作用机理有了全新的认识。有目的地诱导肿瘤细胞的凋亡已成为一种治疗肿瘤的有效手段。索拉非尼(Sorafenib，分子式C21H16ClF3N4O3,分子量 4M. 83，CAS 号 475207_59_1 )，是人工合成的小分子化合物，已被FDA正式批准用于肾癌和肝细胞癌的临床治疗药物。索拉非尼是个典型的酪氨酸激酶抑制剂，可有效抑制Raf激酶活性，阻断Ras/ Raf/MEK/ ERK和RTK信号途径，调节肿瘤细胞的增殖和凋亡。动物体内实验发现索拉菲尼可抑制乳腺癌肿瘤细胞的增殖，减小肿瘤的体积，还可通过抑制RET磷酸化抑制HEK细胞的增殖；索拉非尼还可通过下调Mcl-1、上调Bim水平诱导人白血病细胞凋亡；在肝细胞癌模型中，索拉非尼通过抑制Ras/ Raf/MEK/ ERK和RTK信号途径诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成。ABT-263 商品名Navitoclax 分子式=C47H55ClF3N5O6S3,分子量974. 6I。ΑΒΤ-263是一种口服形式具有ΒΗ3结构域的化学合成小分子物质，其为Bcl-2家族蛋白靶向抑制齐U，与该家族众多BH结构域抑凋亡蛋白如Bcl-xL、Bcl-2及Bcl_w都有很强的亲和性。ABT-263可以打断Bcl-2/Bcl-xl与促凋亡蛋白的相互作用，引发Bax移位，导致细胞色素c的释放，继而引起凋亡。目前主要用于治疗淋巴癌，慢性淋巴细胞白血病(CLL)，现已处于II期临床试验阶段
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于提供了一种治疗癌症的组合药物。本专利技术的体内和体外实验研究发现，索拉非尼和ABT-263联合用药能有效诱导癌细胞的凋亡，对癌症治疗具有显著疗效，所取得的抗癌效果具有协同和增效作用，是一种高效低毒的抗癌药物。为了实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是 一种治疗癌症的组合药物，由索拉非尼和ABT-263组成。本专利技术在初步实验中发现，索拉非尼和ABT-263的摩尔比为(O. 75 15) :1时，有良好的效果。所述的癌症为肝癌、胃癌或结直肠癌。本专利技术的实验研究发现，6μM索拉非尼和0·4μMABT-263对肝癌细胞BEL7402、结直肠癌细胞HCT116具有良好的诱导癌细胞凋亡的效果，而对正常细胞L02影响不明显。本专利技术的另一个目的是在于提供上述组合物在制备治疗或预防恶性肿瘤的药物中的应用。本专利技术可用于诱导多种癌细胞，不仅限于实例中所列举的癌细胞类型。附图说明图I ABT-263与索拉非尼联合作用对肿瘤细胞存活率的影响 图2 ABT-263与索拉非尼联合作用对肿瘤细胞形态的影响 图3 ABT-263与索拉非尼联合作用对正常细胞形态的影响 图4平板克隆实验显示ABT-263与索拉非尼联合作用对肿瘤细胞杀伤作用 图5流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡 图6 HCT116移植的裸鼠异种模型，肿瘤生长曲线与重量分析 图7 TUNEL分析HCT116移植的裸鼠异种模型 图8肿瘤异种移植模型的裸鼠体重分析具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术做进一步的说明。所有实施例所用细胞的培养、药品的添加以及癌细胞凋亡均按以下方法进行。一、材料 I.细胞株肝癌细胞BEL-7402、Huh7、!fepG2，胃癌细胞株AGS，结直肠癌细胞HCTl 16、DLDl，正常肾上皮细胞HEK293T，正常肝细胞L02，人正常包皮成纤维细胞株HFF。2.试剂ABT-263购自香港Active biochemicals公司；索拉非尼购自香港Acctive biochemicals公司;胎牛血清产自美国Hyclone公司；McCoy’ 5A培养基粉末产自北京ABChem公司；DMEM培养基粉末、青霉素链霉素产自美国Gibico公司；PBS粉末购自武汉飞羿科技；PI产自美国BIPEC Biopharma公司；TUNEL凋亡检测试剂盒、转染试剂FuGENETMHD产自瑞士罗氏公司；转染试剂速尔-Super购自敏航科技公司。3.仪器5% CO2细胞培养箱(ThermoForma，美国)，细胞培养超净工作台(苏净集团安泰公司)，低温超速离心机(Haraeus公司，德国),倒置突光显微镜(Olympus,日本),透射电子显微镜(日立一H 600型)。 二、主要试剂配制 I)细胞培养基McCoy’ 5A与DMEM 将购置的DMEM与McCoy’ 5A培养基粉末完全溶解于去离子水中，磁力搅拌器搅拌至粉末完全溶解，加入适量NaHCO3 (每升DMEM加入3. 7克NaHCO3, 每升McCoy’ 5A加入2. 2克NaHCO3),继续搅拌至溶解完全；加入HCl调节pH 值至7. 04左右，于超菌操作台中使用无菌滤器抽滤培养基，4°C保存。待用时 加入10%胎牛血清及1%的青霉素/链霉素,混匀后即可进行细胞培养。 2 )青霉素/链霉素双抗溶液 使用PBS将青霉素和链霉素配制成10，000U/ml母液，滤膜过滤除菌，_20°C保存。使用时以100U/ml工作浓度加入培养基中。 3)胰酶 将胰酶粉末溶于D-hank’ s缓冲液(pH8. 5)，配成0. 25%母液，4°C溶解过夜；待溶解完全后抽滤除菌，与灭菌后的0. 02%EDTA (pH8. 5)等体积混匀，4°C保存。4) PBS 溶液140mM NaCl、2. 7mM KCl、1.8mM KH2PO4UOmM Na2HPO4JnAddH2O 搅拌均匀，PH调至7. 4，加入0. P/oDEPC搅拌过夜，高压蒸汽灭菌，4°C保存。5)1%结晶紫配制 由无水乙醇配制0. 5%浓度5X母液，室温避光保存，使用前用生理盐水以1:4 稀释成IX工作液，避光保存，于24小时内使用。三、实验方法 I、细胞复苏、传代及冻存 I)细胞复苏 将冻存管由液氮罐中取出，立即置于37°c水浴中，快速解冻；后移入IOcm细 胞培养皿中，加入9ml相应培养基；置于37°本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种治疗癌症的组合药物，由索拉非尼和ABT？263组成。
【技术特征摘要】
1.一种治疗癌症的组合药物，由索拉非尼和ABT-263组成。2.根据权利要求I所述的组合药物，其特征在干，由索拉非尼和ABT-263组成，索拉非尼和ABT-263的摩尔比为(O...
【专利技术属性】
技术研发人员：李文化，李靖茹，刘鑫，梅运军，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：
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