本发明专利技术属于微生物应用技术和食品生物技术领域，公开了用于发酵米糠和麸皮提取液生产灰树花多糖的菌株。该灰树花菌株已经于2011年4月7日保藏在中国武汉的武汉大学内中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏菌株编号为CCTCCNo:M2011113，名称为Grifolasp.JSU10-2。本发明专利技术通过原生质体激光诱变，得到了利用廉价原料高产菌丝多糖的菌株，该菌株和原始菌株分别液体发酵米糠和麸皮复合培养基，诱变菌株的菌丝干重和多糖分别比原始菌株提高了31.7%和32.6%。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品微生物应用
，尤其涉及一株适合在米糠和麸皮提取液复合培养基中生长并高产灰树花多糖的一株灰树花诱变新菌株。
技术介绍
国内外科学研究和国内市场表明食用菌多糖能增强人体免疫力，辅助治疗肿瘤等疾病，已成为肿瘤生物疗法选用的辅助用品。国内由食用菌子实体制成的药字号产品有安徽芜湖的灵芝胶囊、浙江庆元的灰树花胶囊等，由食用菌提取物制成的非药字号保健品也有销售。国际上新西兰产有“GanoPoly”(甘诺宝力)多糖提取物系列产品，销往美国、澳大利亚、中国(包括香港和台湾)等地方。该产品的专利技术人高益槐是国际知名食用菌产品开发专家，曾经获得爱因斯坦专利技术奖。高益槐专利技术的“GanoPoly”系列产品主要由灵芝、云芝、猴头等提取的多糖与壳聚糖一道复合构成，用于提高免疫力、辅助抗肿瘤治疗 等。新西兰安发保健品有限公司现在中国福建泉州建有食用菌多糖的生产基地。在各种食用菌多糖的研究中，现在已有研究说明，药食两用食用菌灰树花的多糖也具有较好的提高免疫力、辅助抗肿瘤治疗等的功效，值得引起足够的重视，例如Ohno Naohito、SuzukiIwao等从灰树花菌体中提取灰树花多糖的药效试验表明，灰树花多糖具有抗肿瘤作用和免疫调节作用(參考文献见① Ohno N, Lino K, Suzuki I et al. Neutral and acidicant I tumor polysaccharides extracted from cultured fruit bodies of LrrifolaFrondosa. Chem. Pharm. Bull, 1985，33(3):1181-1186 ;② Naohito Ohno, YoshiyukiAdachi, Iwao Suzuki,et al. Characterization of the antiumor glucan obtainedfrom liquid-cultured Grifola frondosa .Chem. pharm. Bull. 1986, 34(4):1709 ；③Iwao Suzuki, Koichi Hashimoto, Shozo Oikawa, et al. Antiumor and immunmodulatingactivity of a β -glucan obtained from liquid-cultureed Grifola frondosa .chem. Pharm Bull,1986,37 (2):410.)。灰树花(Cri/b/a /roflt/iosa)是ー种药食两用的食用菌,属担子菌亚门，层菌纲,无隔担子菌亚纲，非褶菌目，多孔菌科，树花属。灰树花有多种名称，如贝叶多孔菌、千佛菌、栗子蘑、莲花菌、奇果菌、舞茸等。野生灰树花分布于日本、欧洲、北美和我国许多地区，如黑龙江、吉林、河北、四川、云南、广西、福建等省区。近年来，国内灰树花已在一些省份如河北、浙江、福建等省获得栽培，用于鲜食或提取功能成分。灰树花栽培的缺点是占用土地，生产周期相对较长。为高效生产灰树花多糖，研究人员对能エ厂化生产的液体培养方法的研究十分重视，形成多种研究成果。1986年Ohno N等报道了灰树花液态培养的研究。国内江南大学陈石良的博士论文研究了灰树花深层发酵技术及灰树花的抗肿瘤多糖(參考文献见陈石良.药用真菌灰树花深层发酵技术及其抗肿瘤多糖的研究.博士学位论文.无锡江南大学，2000.)。这类研究的内容主要涉及培养基研制、培养エ艺、适宜菌种选育等。研究的重点是降低生产成本和提高多糖产量。多数エ艺采用葡萄糖、粮食类原料如淀粉、马铃薯等作为培养基，即使用到农产品加工的副产品如米糠或麸皮，也是作为次要成分加入，一般还是以葡萄糖、粮食类原料或其他原料为主要碳源或氮源。现有的灰树花菌种难以在不添加葡萄糖或其他粮食类原料的米糠或麸皮的培养基上生长。本专利的设计人刘伟民、张建曾对原有灰树花菌种进行过初步微波-紫外复合诱变的处理，其诱变菌株在米糠、麸皮培养基上(不添加葡萄糖)液体发酵产灰树花多糖效果较好，菌丝干重和多糖较原有菌株分别提高39. 24%和42. 58%，并提交了中国专利技术专利申请，申请专利的名称是用于米糠和麸皮复合原料生产多糖的灰树花菌株，申请号为201010579078. 5。尽管该菌株生产的多糖较实验室原有的菌株生产的多糖有较大的提高，但诱变菌种会退化，从稳定诱变菌种、提高生产效率的角度而言，不断诱变菌种，获得更高的多糖产量仍是需要不断研究的问题和更高的专利技术创造的目标。另外，申请号为201010579078. 5的灰树花菌株比较适合的发酵エ艺是需要对米糠和麸皮先进行植物纤维酶的酶解，提供发酵所需的碳源，但引入酶解エ艺会増加生产成本。如果诱变出高效灰树花菌株，在没有先期酶解的情况下，也能高效转化米糠和麸皮，则将达到创新的效果，本专利技术瞄准此目标，进行灰树花菌种的新诱变，以求获得新的生产灰树花多糖的高效菌株。中国是农业大国，农副产品来源丰富。米糠、麸皮作为稻谷和小麦加工的副产物，不但其营养成分丰富，而且价格低廉。米糠中富含淀粉、纤维素等物质，而麸皮富含蛋白 、纤维素等物质。从理论上讲，米糠和麸皮复合已经具备了灰树花生长所需要的碳源和氮源物质。在灰树花自身纤维素酶及其他酶的作用下，灰树花可将米糠和麸皮转化成自身的营养物质进行生长，生产灰树花多糖。因此，运用米糠、麸皮等廉价农副产品，完全替代葡萄糖等灰树花液体发酵所需的营养物质，生产具有辅助肿瘤治疗的灰树花多糖，将具有经济价值。其关键问题为必须得到适宜在米糠和麸皮复合培养基上生长的灰树花菌株，所以必须对已有菌株进行诱变筛选。如能筛选出适宜的灰树花菌株，则研究和生产将有可能取得突破。目前微生物的物理选育方法主要有紫外诱变、离子束诱变、微波诱变等。本专利技术在实验室已有的菌株JSUlO (即专利技术人已拥有的上述已申请专利的菌株)的基础上采用原生质体激光诱变方法，进ー步诱变得到适合在米糠和麸皮复合培养基上生长并产灰树花多糖的高效菌株，所得菌株为首次专利技术得到。
技术实现思路
本专利技术解决上述现有技术中的不足，为了进一歩降低生产成本，考虑采用大宗农产品稻谷和小麦等加工的副产品米糠和麸皮作为培养基，不再添加其他碳源如葡萄糖和氮源，进行液体发酵，以节约原料成本、減少使用土地和缩短生产周期，但实现这一目标仍需要诱变筛选出在米糠麸皮提取液培养基中适宜生长的灰树花菌株。因此，为实现上述目的，在自然选育之外，通过不同的生物技术手段对灰树花菌株进行诱变，筛选出适宜的高产菌株尤为重要。本专利技术将通过原生质体激光诱变的方法，以高产多糖为指标，定向高效转化米糠麸皮提取液为基础，选育出高产、低成本的灰树花菌株。通过一系列的稳定性、遗传性等筛选方法的建立，保证灰树花的优良性状，为进一歩大規模利用低成本的米糠和麸皮生产高价值的灰树花多糖奠定基础。本专利技术所采取的技术方案如下本专利技术提供一种用于高效发酵米糠和麸皮提取液生产灰树花多糖的灰树花菌株 Grifola sp. JSU10-2,该灰树花菌株 Grifola sp. JSU10-2 已经于 2011 年 4 月 7 日保藏在中国武汉的武汉大学中国典型培养物保藏中心(CCTCC )，保本文档来自技高网...
【技术保护点】
用于发酵米糠和麸皮提取液生产灰树花多糖的菌株Grifola？sp.？CCTCC？？M2011113。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘伟民，郭春梅，张建，徐立平，顾慧敏，任晓锋，李永转，张志才，崔凤杰，赵杰文，沈国栋，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：
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