一种检测犬细小病毒的生物条形码及其应用制造技术

本发明专利技术提供了用于检测犬细小病毒的生物条形码、与条形码配合使用的互补探针NP链，其核苷酸序列分别如SEQ?ID?No.1，SEQID?No.2所示，本发明专利技术还提供了对犬细小病毒的生物条形码进行荧光定量检测的方法和检测试剂盒。本发明专利技术的检测方法具有检测准确，灵敏度高、特异性强，简便快速的优点，具有良好的标本检测能力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及条形码检测方法，特别是涉及用于检测犬细小病毒的生物条形码检测技术所用的引物、探针及其荧光定量PCR检测试剂盒的组装。
技术介绍
生物条形码检测技术(bio-bar codes assay, BCA)是美国西北大学Mirkin教授于2003年首次报道的ー种新型标记免疫測定技术，其突出特点是具有极高的灵敏度，可达常规ELISA方法的106倍。BCA技术的基本原理是利用被检物单抗标记的磁性微球探针(magnetic microparticles, MMPs)和被检物多抗及特异DNA双链标记的金纳米颗粒探针(nanoparticle, NP)，通过形成MMP-被检物-NP三明治复合物后再利用去杂交将NP探针上标记的特异DNA链释放出来，通过常规PCR方法或芯片检测方法(金标银染法)鉴定这些释放的DNA链就可确定被检物的存在。 NP探针即是金纳米颗粒包被有双链DNA和抗被检物的多克隆抗体，双链DNA其中的一条和胶体金颗粒通过Au-S键相连，另一条和前者互补是用来指示被检物的条形码DNA ；MMP探针即是对应于分选磁场的直径约为Iym的磁性微球探针,其表面包被有抗被检物的单克隆抗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ー种用于检测犬细小病毒(Canine Parvovirus)的生物条形码,其具有SEQ ID No. I所示的核苷酸序列或其特异性片段。2.用于扩增权利要求I所述生物条形码的特异性引物，其核苷酸序列为引物 I :5，-CTTACACTGTTGCTGCTGCC-3，，引物 2 :5’ -TCCTCTACTTCGGGTGGGAA-3’。3.与权利要求I所述生物条形码配合使用的互补探针NP链，其核苷酸序列为5，-TCCTCTACTTCGGGTGGGAAGTCGGGGTTCA10- (CH2) 6_SH_3，。4.一种犬细小病毒的生物条形码检测方法，包括以下步骤， 1)NP探针的制备用常规方法将金纳米颗粒、抗VP2蛋白的多克隆抗体、权利要求I所述的条形码DNA链和权利要求3所述的互补探针NP链制备NP探针； 2)MMP探针的制备用磁性微球和抗VP2蛋白的单克隆抗体制备MMP探针； 3)犬细小病毒的生物条形码检测利用NP...

【专利技术属性】
技术研发人员：史利军，宫苗苗，袁维峰，金红岩，李刚，朱鸿飞，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：