一种山葵组培苗瓶外生根方法技术

本发明专利技术公开了一种山葵组培苗瓶外生根方法，其特征是，利用组织培养诱导山葵茎尖获得无根试管芽苗，在继代培养后，将芽苗经驯化切成单芽，再将芽苗插入土壤基质中，期间每周浇促根剂及1/2MS营养液一次，插入土壤基质30d后可获得较好的生根效果。该技术极大缩短了山葵组培种苗生产周期，降低了生产成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种植物繁殖方法，主要涉及一种山葵组培苗瓶外生根的方法。
技术介绍
山葵(FasaAia japonica Matsum.)为十字花科山箭菜属植物,其根莖磨制的衆液是调味食品绿芥末的原材料。山葵不仅芳香味美，而且还是一种特殊的食用保健植物，具有刺激食欲、抑菌杀虫、抗癌的功效。由于山葵对环境条件的要求十分苛刻，只能生长在湿润水质越冷越清的冷凉山区，适宜其生长种植的地方有限，导致国际市场上的山葵产品极为稀缺。山葵产业化生产，种苗是关键。采用组织培养的方法繁殖山葵，不仅种苗质量高，而且可以避免种苗病害传播。但现有山葵组织培养技术采用的是瓶内生根方法，该方法包括 初代培养、继代培养、瓶内生根、驯化和移栽等五个阶段，存在繁殖周期长和生产成本高的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于建立，缩短山葵组培种苗生产周期，降低山葵组培种苗生产成本。本专利技术所采用的技术方案主要包括以下几个步骤 第一步，将山葵的顶芽或侧芽消毒后取芽尖； 第二步，将芽尖接种于不定芽诱导培养基； 第三步，将芽苗在继代培养基中继代培养； 第四步，将芽苗驯化后切成单芽； 第五步，将山葵单芽插入土壤基质中，培养条件为相对湿度保持在80% 90%，温度控制在20°C 28°C。不定芽是指将所述山葵顶芽或侧芽，用自来水洗净后，超净工作台上剥去其最外层，再用70%酒精表面消毒30 60 s后在显微镜下取茎尖，接种于不定芽诱导培养基(MS+ NAA 0. 5 mg .171 + 6-BA 0. 5 mg .171 +蔗糖 30 g/L+ 琼脂 7 g/L, PH 5. 8)上，17± 1°C培养，每25天在继代培养基(MS + 6-BA I mg .171+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L, PH 5. 8)中继代一次。继代培养25d后，松开瓶盖，在驯化室炼苗3d，再从瓶内取出无根苗，把上面残留的培养基清洗干净，将芽苗高度大于2cm的健壮山葵丛芽苗切成单芽，芽的基部在浓度为500mg -r1的IBA溶液中速蘸3s。山葵芽苗扦插的土壤基质按以下配制取松树下表层腐殖质土，伴20%的多菌灵一周后用装入穴盘，将依上法处理的山葵不定芽插入土壤基质中。移栽后立即浇0. 1%多菌灵溶液定根。扦插结束后，搭小拱棚覆盖塑料薄膜和遮阳网，棚内相对湿度保持在80% 90%，温度控制在20 28°C。每周喷施I次促根剂和1/2MS营养液，培养4周后逐步揭去遮阳网和塑料薄膜。山葵组培苗瓶外生根方法是把芽苗驯化、生根及移栽相结合，减少了一次无菌操作的步骤，节省了培养空间，有效地降低了生产成本。山葵组培苗瓶外生根方法在短期内即可获得大量的生根苗，并因种苗带土移栽，成活率高，还适于长距离运输和异地移栽。试管苗瓶内生根技术环节的费用占整个组织培养育苗费用的35% 75%，而利用近年来研究成功的种苗瓶外生根新技术可以大大降低生根环节的费用。山葵组培苗瓶外生根方法不仅缩短了山葵种苗的繁育周期，而且极大的降低了山葵组培苗培养成本，具有重要的意义。具体实施例方式不定芽的生长情况对生根率的影响非常大。所述不定芽取自山葵顶芽或侧芽，用自来水洗净后，在无菌条件下剥去其最外层，再用70%酒精表面消毒30 60 s后在显微镜下取茎尖，接种于不定芽诱导培养基(MS + NAA 0.5 mg L—1 + 6-BA 0.5 mg L—1 +蔗糖30 g.L—1+琼脂7 g.L'PH 5. 8)，17±1°C培养，每25天接种于继代培养基(MS + 6-BAI mg .L—1+蔗糖30 g T1 +琼脂7 g T1, PH 5. 8)中继代一次。芽苗长到2cm左右时，松开培养瓶瓶盖，在驯化室练苗3d，再从瓶内取出无根苗，把残留的培养基清洗干净，选用生长旺盛、粗壮、长度约2 cm的不定芽芽苗为材料。把芽苗切成单芽，将切口在浓度为500mg L-1的IBA溶液中蘸3秒,然后插入土壤基质中，插入深度为I cm左右。山葵微扦插的 土壤基质按以下配制取松树下表层腐殖质土并伴20%的多菌灵，一周后用装入穴盘。将依 上法处理的山葵不定芽插入土壤基质中。移栽后立即浇一次0. 1%多菌灵溶液定根。扦插结束后，搭小拱棚覆盖塑料薄膜和遮阳网，棚内相对湿度保持在80% 90%，温度控制在20 28°C。每周喷施I次促根剂和1/2MS营养液，培养4周后逐渐揭去遮阳网和塑料薄膜。之后，加强通风，正常肥水管理，2周后山葵种苗长至5叶时可移栽大田。I.激素浓度对山葵组培苗瓶外生根的影响 山葵组培苗瓶外生根方法中，芽苗扦插蘸取的IBA溶液设5个浓度梯度0、250、500、750和1000 mg L'插条蘸激素的时间为3s，30d后统计生根率、平均生根条数和平均根长。实验结果表明山葵组培苗瓶外生根方法中的芽苗蘸取I B A溶液的浓度范围可为250mg L—1 750 mg L—1，最佳I B A溶液的浓度为500mg L_\此浓度下生根率达76%，平均根条数和根长都优于其他浓度处理(见表I所示)。表I不同IBA浓度对山葵组培苗瓶外生根的影响Table I Effects of IBA concentrations on the ex vitro rooting of Wasabiajaponica Mat sum.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ー种山葵组培苗瓶外生根方法，其特征在干 第一歩，将山葵的顶芽或侧芽消毒后取芽尖； 第二步，将芽尖接种于不定芽诱导培养基； 第三步，将芽苗在继代培养基中继代培养； 第四步，将芽苗驯化后切成单芽； 第五步，将山葵单芽插入土壤基质中，培养条件为相对湿度保持在80% 90%，温度控制在20°C 28°C。2.根据权利要求I所述方法，其特征在于第一歩中所述消毒是指，将山葵顶芽或侧芽用自来水洗净后，在无菌条件下剥去其最外层，再用70%酒精表面消毒30 60 s 。3.根据权利要求I或2所述方法，其特征在于第二步中所述不定芽诱导培养基是指MS + NAA O. 5 mg · L 1 + 6-BA O. 5 mg · L 1 + 鹿糖 30 g/L + 琼脂 7 g · L \ PH 5. 8 。4.根据权利要求I或2所述方法，其特征在于所述第二步，将芽尖接种于不定芽诱导培养基的温度条件为17 ± I °C。5.根据权利要求I或2所述方法，其特征在于第三步中，所述继代培养的次数为ー次，时间为25天，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾建军，
申请(专利权)人：井冈山大学，
类型：发明
国别省市：