一种梨叶片诱导不定芽再生植株的方法技术

本发明专利技术属于植物细胞工程领域，涉及一种梨叶片诱导不定芽再生植株的方法。采用试管苗幼嫩的叶片作为外植体，在超净工作台上，用无菌刀片垂直于叶片中脉横切2～4个伤口，然后接种在不定芽诱导培养基上，暗培养3周左右后转到光下培养，待其长出不定芽后转到增殖培养基上，以促进芽的生长；待不定芽长到2cm左右，将其转接到生根培养基中培养，从而获得完整植株。本发明专利技术的方法操作简单，成本低廉，效果良好，可以快速的建立起稳定、高效的叶片再生体系，有效的解决了梨叶片不定芽再生诱导的技术问题，从而为通过抗病基因的遗传转化和染色体组加倍培育多倍体这两种手段达到改良果树品种提供前提条件。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物细胞工程领域，涉及。
技术介绍
梨是蔷薇科(Rosaeeae)梨亚科(Maloldeae)梨属(Pyrus)植物，为乔木落叶果树，共有20余种。分布在世界各国的梨可归于两个类型东方梨和西洋梨。东方梨起源于我国，也称中国梨；西洋梨原产于欧、亚，是欧美国家的主要栽培品种。梨果不仅形美色艳、肉质细软或酥脆，汁液丰润、香甜爽口，而且具较高的营养价值，梨果除可鲜食外，还可制作梨脯、梨膏、梨干、酿酒、制醋等，而且还有很高的医疗价值，其性寒味甘，具清热润肺、止咳祛痰之功。另外，梨木质地细腻坚韧，花纹美观，是建筑、制造家具和雕刻、印刷等的优良用材，可作为用于家具制作和纺织业的工业原料。 梨是栽培历史悠久的果树之一，寿命长、产量高、果实营养丰富，而且具有止咳化痰、润肺清火、助消化、解疮毒等医疗作用。梨同其它农作物一样，在生产中常会遇到病虫侵袭，造成果实大量减产。目前，主要的病虫害有梨火疫病、黑星病、白粉病、黄叶病、轮纹病等，妨碍了梨的发展，使梨的产量严重降低。生产上迫切需要抗性较强的砧木和品种。研究减少病虫害损失成为农业生产的重点。传统上病虫害防治主要采用化学试剂，化学试剂造成生态本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.梨叶片不定芽再生诱导的方法，其特征在于通过如下步骤实现 (1)选取试管苗健康幼嫩的叶片，用无菌刀片垂直于叶片中脉横切2 4个伤ロ，叶片背面朝下接种于不定芽诱导培养基上，暗培养2(Γ32天后转到光下培养；培养温度25±2°C ;所述的不定芽诱导培养基为NN69+TDZ I. 0 3· Omg/L+IBA O. 2 O. 5mg/L+蔗糖30 50g/L+ 琼脂 5. 0 6· 5g/L, PH 值为 5. 8 ； (2)待叶片长出不定芽后，将不定芽转接到増殖培养基上，在光照強度1500-20001X，光照iri8h/d，温度25±2°C的培养条件促进其抽茎生长，从而获得茎干粗壮的试管苗；所述的增殖培养基为l/2MS+6-BAl. 0 2· Omg/L+IBAO. 2 O. 5mg/L+GA3l. 5 3. Omg/L+ 蔗糖25 40g/L+琼脂5. 0 6· 5g/L，培养基pH值为5. 8 ; (3)待试管苗长到2.5^3. 5cm将苗接到生根培养基中，暗处理7 10d后再转光下培养，50-60天后得到生根苗；所述的光下培养条件为光照强度1500-20001x，光照iri8h/d，温度 25 ±2 °C;生根培养基为1/2MS+IBA O. 5 O. 9mg/L+ 蔗糖 50 70g/L+ 琼脂 5. 0 6. 5g/L，培养基PH值为5.8。2.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：张绍铃，薛亚男，吴俊，陶书田，齐开杰，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：