【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学领域,具体涉及。
技术介绍
哮喘存在有气道高反应性、Ig-E调节和特异性反应基因。Toll样受体是在哺乳动物中发现的与果蝇有同源性的蛋白,命名为TLR,最初发现的TLR4是目前研究最多的。研究证实,减毒活菌卡介苗其分枝杆菌脂蛋白能与巨噬细胞上Toll样受体结合,促进巨噬细胞产生IL-12、IFN-Y,抑制IL-4、IL-5的产生,从而纠正哮喘中Thl/Th2亚群数目和(或)功能失衡。目前,减毒活菌卡介苗对哮喘TLR4表达的影响还未知。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供了,解决了目前减毒活菌卡介苗对哮喘影响还没相应的检测方法的问题。本专利技术的,具体步骤为步骤I)准备实验动物与试剂准备实验用小动物、卵白蛋白、减毒活菌卡介苗、抗TLR4单克隆抗体、抗GAPDH单克隆抗体和HRP标记的小鼠IgG抗体;步骤2)实验动物的分组及致敏模型制备实验小动物随机分为小动物只数相等的三组,分别为空白对照组、哮喘发病组和减毒活菌卡介苗干预组,哮喘发病组第I、7、14天腹腔注射卵白蛋白致敏,以Al (OH) 3作为免疫佐剂,第15天开始雾化激发,建立哮喘模型;减毒活菌卡介苗干预组哮喘模型的建立同哮喘发病组,在每次致敏前I天和最后雾化激发I小时内进行减毒活菌卡介苗皮内注射;空白对照组用生理盐水代替卵白蛋白,所有小动物在最后一次激发24h后获取标本;步骤3)小动物肺组织TLR4蛋白的Western Blotting检测取各组实验小动物肺组织提取总蛋白,测定浓度。各组蛋白样品SDS-PAGE电泳后,电转移至PVDF膜上;PVDF膜经封闭2h后,用稀释后的TLR4 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种减毒活菌卡介苗对哮喘影响的检测方法,其特征在于,具体步骤为 1)准备实验动物与试剂准备实验用小动物、卵白蛋白、减毒活菌卡介苗、抗TLR4单克隆抗体、抗GAPDH单克隆抗体和HRP标记的小鼠IgG抗体; 2)实验动物的分组及致敏模型制备实验小动物随机分为小动物只数相等的三组,分别为空白对照组、哮喘发病组和减毒活菌卡介苗干预组, 哮喘发病组第1、7、14天腹腔注射卵白蛋白致敏,以Al (OH)3作为免疫佐剂,第15天开始雾化激发,建立哮喘模型; 减毒活菌卡介苗干预组哮喘模型的建立同哮喘发病组,在每次致敏前I天和最后雾化激发I小时内进行减毒活菌卡介苗皮内注射; 空白对照组用生理盐水代替卵白蛋白, 所有小动物在最后一次激发24h后获取标本; 3)小动物肺组织TLR4蛋白的WesternBlotting检测取各组实验小动物肺组织提取总蛋白,测定浓度。各组蛋白样...
【专利技术属性】
技术研发人员:张雅琴,眭建,
申请(专利权)人:苏州卫生职业技术学院,
类型:发明
国别省市:
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