一种SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用制造技术

技术编号:7580378 阅读:174 留言:0更新日期:2012-07-19 06:15
本发明专利技术涉及一种SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用,所述的SNCG基因通过调节ER活性状态而影响乳腺癌的激素治疗。所述的SNCG基因在制备诊断乳腺癌的产品中的应用。本发明专利技术优点在于:SNCG基因表达调节对ER和激素治疗敏感性的作用,开创了乳腺癌激素治疗的新思路;SNCG基因表达调节对ER和激素治疗敏感性的作用,提高了开发治疗乳腺癌的新药的可能性;SNCG基因可作为诊断乳腺癌的特异标志基因,使乳腺癌诊断更加准确、快速。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及ー种SNCG基因的应用,具体地说,是ー种SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用
技术介绍
乳腺癌是最常见和最重要的乳腺疾病,发病率逐年上升,以上海为例,1972年,上海女性的乳腺癌发病率为每10万人中有17人,1992年上升到每10万人中有34人,2000 年,则迅速上升至每10万人中有56. 2人。也就是说,从1992-2000年8年间的上升幅度,超过了 1972-1992年20年间的上升幅度,成为女性发病率最高的恶性肿瘤,严重危害广大妇女的身心健康。作为ー种雌激素依赖的肿瘤,对雌激素及雌激素受体(estrogen receptor, ER)状况在乳腺癌致病、进展以及治疗中的研究日益受到重视,乳腺癌的激素治疗成为与化疗具同等重要地位的综合处理方法,但其同时也遭遇肿瘤細胞耐药而治疗失败的瓶颈。因此,对乳腺癌激素和受体调控的深入探索,并在此基础上建立新的防治策略成为当今世界生物医学界研究的重大课题。肿瘤分期、淋巴结转移以及ER状态等是与乳腺癌进展有关的经典临床病理指标。 随着医学分子生物学的不断发展,越来越多的肿瘤标记物被发现于乳腺癌的发生发展密切相关,有资料显示,SNCG表达与乳腺癌的分期呈明显正相关性,可能是乳腺癌新的预后指标。SNCG是Shi最早克隆出的ー种新的人类基因,经证实,其与乳腺癌特异基因1 (breast cancer specific genel,BCSG1)为同一基因。SNCG是ー种特异的在乳腺癌中有选择性表达的基因,是利用BLAST程序搜寻大约500000条表达序列标签(expressed sequence tag, EST)得到的ー个含8条EST编码SNCG的基因,其中7条来自乳腺cDNA文库,仅1条在脑库,而7条EST中有6条来自乳腺肿瘤文库。近年来,申请人利用逆转录-链式聚合酶反应 (reverse transcription-polymerase chain reaction , RT-PCR)> Western bolt 口原位杂交(in situ hybridization,ISH)等技术检测SNCG在不同乳腺组织的表达,发现大多数进展期乳腺癌的肿瘤上皮細胞出现SNCG表达。研究显示,36%的乳腺癌检测到SNCG表达, 其中SNCG表达率在III / IV期乳腺癌高达81%,而在I / II期乳腺癌仅为15% ;SNCG的表达与乳腺癌的分期呈明显正相关性(/X0. 001);经过5年密切跟踪随访后发现,28%SNCG表达阳性者出现远处转移(包括胸腔、肺和骨等),远多于SNCG表达阴性者(仅6%),/M). 006 ;Cox回归分析显示,SNCG表达阳性者的复发、转移风险高于SNCG表达阴性者(HR 4.515,95% CI 1. 188-17. 154,P=O. 027)。统计生存分析发现SNCG表达阳性者3年无病生存率(Disease Free Survival, DFS)和 5 年 DFS 分别为 78% 和 44%,较 SNCG 表达阴性者 3 年 DFS (94%) 和5年DFS (94%)明显降低Gd=O. 014),从而首次提出SNCG可能是乳腺癌新的预后指标。中国专利文献CN101497922A,公开日2009年8月5日,专利技术名称为PNMA5基因的应用。该专利技术公开了ー种PNMA5基因的应用,用于制备诊断肝癌的产品和制备治疗肝癌的药物,该专利技术的PNMA5基因,可作为诊断肝癌的特异标致基因,使肝癌诊断更加准确、快速, 且为防治肝癌提供了新的治疗靶点和有效新药。但是关于SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用,目前还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中的不足,提供ー种SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用。为实现上述目的,本专利技术采取的技术方案是一种SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用,所述的SNCG基因通过调节ER活性状态而影响乳腺癌的激素治疗。所述的SNCG基因通过调节抗雌激素治疗敏感性影响乳腺癌的激素治疗。所述的SNCG基因在制备诊断乳腺癌的产品中的应用。所述的诊断乳腺癌的产品包括用RT-PCR、定时定量PCR或免疫检测诊断乳腺癌的产品。本专利技术优点在于1、SNCG基因表达调节对ER和激素治疗敏感性的作用,开创了乳腺癌激素治疗的新思路;2、SNCG基因表达调节对ER和激素治疗敏感性的作用,提高了开发治疗乳腺癌的新药的可能性;3、SNCG基因可作为诊断乳腺癌的特异标志基因,使乳腺癌诊断更加准确、快速。 附图说明附图1是实施例2中細胞生长曲线图。附图2是实施例3中細胞周期统计结果图。附图3是实施例5中基因在mRNA水平的表达情况示意图。附图4是实施例6中western blot对蛋白的检测示意图。附图5是实施例7中Transwel 1拍照结果示意图。附图6是实施例7中Transwel 1统计结果示意图。附图7是实施例8中Wfestern blot检测结果示意图。具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术提供的具体实施方式作详细说明。实施例1慢病毒载体的构建与包装一、实验材料(一)主要设备YJ-875超净工作台、CO2培养箱3111型、-80°C低温冰箱、LDZX-40BI型压カ蒸汽灭菌器、TGL-16G型台式高速离心机、Nanopure超纯水仪、流式細胞仪、AA-200型电子天平、 carton显微镜CCD摄像系统、CK40-F200型倒置显微镜、XSP-2C生物显微镜、荧光定量PCR 仪、蛋白印迹电泳仪、90-2型磁力搅拌器、孔径101,tm的多聚酯滤膜、微量移液枪等。(ニ)主要药品及试剂谷氨酰胺(L-Glutamine)、ニ甲基亚砜(DMSO)、胰蛋白酶、胎牛血清、DMEM培养粉、鼠抗人单克隆PE-⑶133/1、小鼠抗人ERalpha受体抗体、小鼠抗人BCRP抗体、兔抗人SNCG抗体、alpha-actin抗体-SC-8432、MTT、聚丙烯酰胺、SNCG siRNA lentiviral particle gene silencers、Contro丄 shRNA Lentiviral Particles、ViraPower Bsd Lentiviral Support Kit。(三)主要溶液配制 1.細胞培养用溶液配制(1)磷酸盐缓冲液(0.lmol/L PBS, pH 7. 4)NaCl 8. OOg,KCl 0. 20g, Na2HPO4 1. 56g, KH2PO4 0. 20g 加双蒸水定容至100ml,用孔径0. 22um微孔滤膜过滤除菌,4°C保存备用。(2) DMEM完全培养基采用DMEM培养粉,按说明配制成DMEM基础培养液;加入NaHCO3 (终浓度0. 08%),小牛血清终浓度为10%,适量的HEPES、抗生素(终浓度为100U/ml青霉素和100ug/ml链霉素) 和3%谷氨酰胺(终浓度lOumol/ml)。(3)胰蛋白酶消化液用无钙、镁离子Hank’S液配制终浓度为0. 25%(w/v)的胰蛋白酶溶液,过滤除菌,4°C保存。(4) EDTA 消化液用0.01 mol/L PBS缓冲液配制终浓度为lmmol/L EDTA (w/v)的消化溶液,过滤除菌,4°C保存。本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:吴克瑾翁子毅陆云姝林清王永坤
申请(专利权)人:上海交通大学医学院附属新华医院
类型:发明
国别省市:

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