本发明专利技术提供了一种丹酚酸A转化液的制备方法，进一步通过大孔树脂柱层析、萃取、硅胶柱得到丹酚酸A的制备方法，采用本发明专利技术方法得到的丹酚酸A可工业化生产，且该丹酚酸A纯度高，保证了用药的安全性。本发明专利技术为制备丹酚酸A提供了一个简便高效的方法。使用本发明专利技术提供的方法制备丹酚酸A，工艺稳定、质量可控、转化率高，主要产物丹酚酸A总收率高，成本低；联用分离纯化技术，可大批量工业化制备高纯度丹酚酸A。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药、保健食品领域，具体涉及一种丹酚酸A的制备方法。技术背景丹参水溶性有效成分-丹酚酸研究进展，基础医学与临床，杜冠华2000，20(5) 10 14.报道丹酚酸是丹参水溶性成分中最重要的活性成分，丹酚酸A是酚酸类化合物， 见(丹酚酸A抗四氯化碳中毒致大鼠肝损伤和肝纤维化的作用，中药药理学报，胡义杨 1997,18(5) =478-480.)，但是其在丹参中的含量较低(百万分之五左右，甚至没有，中草药现代研究(第二卷)中国医学科学院药物研究所编著2005，Ρ479-496· ！)，即使通过一系列的方法将其提取出来，也只能得到微量的丹酚酸Α，因此存在生产成本高，无法进行工业化生产的难题，限制了人们更好地开发利用。很多医药工作者希望将丹酚酸A进行工业化生产，进而开发为医药制剂，但鉴于丹酚酸A来源以及其稳定性原因至今还不能解决其实际生产问题。现有技术公幵了多种丹酚酸A提取纯化的工艺方法，如表1所示方法，这些方法都是从药材进行提取，但是丹酚酸A在药材中的含量很低，加上工艺步骤复杂，成分损失大， 无法满足工业化生产丹酚酸A的需求。表1.现有技术中丹酚酸A的制备方法比较专利公开号制备来源纯化步骤CN1397276A水或醇药材提取树脂或聚酰胺层析，再用硅胶柱层析CN1513848A水温浸离心、超滤、调酸、有机溶剂萃取再反相柱层析CNl 887849水或醇提柱层析、调节pH值、有机溶剂萃取CN101041620水或醇提柱层析、调节pH值、有机溶剂萃取CN101130498水或醇提蛋白吸附、解析、有机溶剂萃取近几年来的专利或申请(CN1830947A、CN101230003、CN100999470A等)涉及到经过高温高压热解反应，进而再通过常规的分离纯化技术制备丹酚酸Α，但是由于起始原料均是丹参水或醇提取物，成分复杂，采用热降解法所得反应液更加复杂，造成后续产物分离极其困难，使得丹酚酸A收率极低，无法满足工业化需求。本专利技术人经过大量的实验研究，提供了一种以丹参多酚酸盐(国药准字 Ζ20050246)为原料制备丹酚酸的方法，该方法收率高，能够满足工业化生产。
技术实现思路
本专利技术提供了一种丹酚酸A转化液的制备方法，其特征为以丹参多酚酸盐为原料，加水溶解，调PH值至4. 0-6. 0，在120-130°C，0. 12-0. 20MPa下反应4-5小时，溶液冷却后，加酸调PH值至2-3。优选方法为用柠檬酸三钠调节PH至4. 0-6. 0，调pH值至2_3的酸选自醋酸、盐酸或磷酸。本专利技术提供的丹酚酸A转化液的更优选制备方法为将丹参多酚酸盐加水稀释至4浓度为1%，以丹参乙酸镁计，用柠檬酸三钠调PH至6.0，于125°C、0. 15MPa条件下转化4 小时，冷却至室温后盐酸调pH至2. 0 3. 0。本专利技术提供的丹酚酸A转化液的更优选方法为加入保护剂，保护剂选自乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸丁酯中的一种或几种。本专利技术提供的丹酚酸A转化液的进一步优选方法为将丹参多酚酸盐加水稀释至浓度为1%，以丹参乙酸镁计，用柠檬酸三钠调PH至6.0，加入乙酸乙酯，于125°C、0. 15MPa 条件下转化4小时，冷却至室温后盐酸调pH至2. 0 3. 0。本专利技术提供了一种丹酚酸A的制备方法，其特征在于将上述任一所述方法得到的丹酚酸A转化液依次进行非极性或弱极性大孔树脂柱层析、萃取和硅胶层析。其中非极性或弱极性大孔树脂选自HPD-100、HPD-826、ADS-8或CG161中的一种或几种，萃取中的有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸丁酯、甲基叔丁基醚或乙醚中的一种或几种。大孔树脂的洗脱液为水和乙醇溶液，其中乙醇溶液的浓度范围为20-40%，硅胶柱的洗脱液为正己烷-乙酸乙本专利技术提供了一种优选的丹酚酸A的制备方法，其特征在于将上述任一所述方法得到的丹酚酸A转化液过HPD100树脂柱，依次用水、25 %乙醇溶液洗脱杂质，弃去，再用 40%乙醇溶液洗脱收集丹酚酸A洗脱液1，减压浓缩至丹酚酸A浓度约25mg/ml ；浓缩液过 CG161树脂柱，依次用20%乙醇溶液洗脱杂质，弃去，再用35%乙醇溶液洗脱收集丹酚酸A 洗脱液2，减压浓缩至丹酚酸A浓度约50mg/ml ；盐酸调pH至2 3，以等体积乙酸乙酯萃取三次，合并萃取液，减压浓缩，加2. 5倍量硅胶(80 120目)拌勻，干燥，湿法上硅胶柱 200 300目，2. 5倍量，以正己烷-乙酸乙酯6 4和5 5洗脱，收集正己烷-乙酸乙酯 5 5洗脱液，减压浓缩至干，加水适量分散，再减压浓缩，干燥，得丹酚酸A。其中丹酚酸A 的纯度大于95.0%。采用本专利技术方法得到的丹酚酸A的转化率比已有中国专利Q00710001055.4)公开的转化方法提高了近3倍，然后再通过大孔树脂柱层析、萃取、硅胶柱，得到了可工业化生产的丹酚酸A，且该丹酚酸A纯度高，保证了用药的安全性。本专利技术为制备丹酚酸A提供了一个简便高效的方法。使用本专利技术提供的方法制备丹酚酸A，工艺稳定、质量可控、转化率高，主要产物丹酚酸A总收率高，成本低；联用分离纯化技术，可大批量工业化制备高纯度丹酚酸A。本专利技术提供的丹酚酸A的制备方法，生产工艺简单易控，批间产物变化较小，为制备丹酚酸A提供了切实可行的技术路线。与现有的技术相比，本专利技术具有以下突出优点 (1)采用纯度较高的丹参多酚酸盐，降解产物和降解工艺方便控制；( 优选采用保护剂， 大大提高丹酚酸A的摩尔转化率，可达70%; C3)纯化工艺利用反相与正相相结合的方式能有效提高丹酚酸A的纯度，保证用药的安全性。附图说明图1 实施例1的HPLC图图2 实施例6的HPLC图图3 试验例3的PH稳定图具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术作进一步的说明。实施例1.制备丹酚酸A转化液取丹参多酚酸盐(以丹参乙酸镁计含量大于80% ) 12g，加水1L，柠檬酸三钠调节 pH值至6. 0、置于高压灭菌锅中，125°C温度，0. 15MPa,加热4小时，溶液冷却后，加盐酸调pH 值至2 3，得到丹酚酸A转化液；转化液的HPLC分析表明，丹酚酸A的摩尔转化率45 % (图 1)。实施例2.制备丹酚酸A取实施例1的转化液丹酚酸A转化液过HPD100树脂柱，依次用水洗脱10个柱体积，25%乙醇溶液洗脱8个柱体积，弃去，再用40%乙醇溶液洗脱10个柱体积，收集洗脱液 1，将洗脱液1减压浓缩至丹酚酸A浓度25mg/ml，浓缩液过CG161树脂柱，用20%乙醇溶液洗脱10个柱体积，弃去，再用35%乙醇溶液洗脱12个柱体积，收集洗脱液2，减压浓缩至丹酚酸A浓度50mg/ml ；盐酸调pH至2 3，以等体积乙酸乙酯萃取三次，合并萃取液，减压浓缩，加2. 5倍量80 120目硅胶拌勻，干燥，湿法上200 300目硅胶柱，2. 5倍量，以正己烷-乙酸乙酯6 4洗脱30个柱体积，弃去，再用正己烷-乙酸乙酯5 5洗脱25个柱体积，收集洗脱液3，将洗脱液3减压浓缩至干，加水适量分散，再减压浓缩，干燥，得丹酚酸A。实施例3.制备丹酚酸A转化液取丹参乙酸镁10g，加水1L，加乙酸乙酯10ml，调节溶液PH值至6、置于高压灭菌锅中，125°C温度，0. 15MPa,加热4小时，溶液冷却后，加盐酸调pH值至2 3，得到丹酚酸A 转化液，转化液的HP本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘珂，韩飞，刘军锋，许卉，邵萌，邹晓丽，
申请(专利权)人：上海绿谷制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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