本发明专利技术公开了壳聚糖-单甲氧基聚乙二醇凝胶给药系统及其制备方法，包含重量比2.0％-2.5％壳聚糖、3.5％-4.0％单甲氧基聚乙二醇及胶原蛋白。该凝胶系统具有温度敏感性，能够在常温保持液态，37℃时转变为固态。本发明专利技术同时公开了其制备方法，包括：配制浓度为30％单甲氧基聚乙二醇溶液；使用醋酸配制壳聚糖溶液；将胶原蛋白溶于0.1M的氢氧化钠；将三种溶液冰浴后搅拌混合制备凝胶溶液系统。本发明专利技术还公开了一种肿瘤坏死因子α的凝胶给药系统和一种瘦素的凝胶给药系统。本发明专利技术所述的凝胶给药系统，温度敏感性好、制备条件温和，可以广泛的应用于药物载体领域。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种给药缓释系统。具体而言，本专利技术公开了。本专利技术还涉及壳聚糖-单甲氧基聚乙二醇凝胶为载体的肿瘤坏死因子α与瘦素的给药缓释系统。本专利技术凝胶具有温度敏感性好，在医疗领域具有良好的应用前景。
技术介绍
壳聚糖(chitosan)是一类甲壳素的脱乙酰衍生物，它具有良好的生物相容性和生物降解性。壳聚糖具有生物黏附性能，可起到控制药物释放的作用，具有独特的性质，因此壳聚糖已经被广泛地应用于药物载体的研究中。壳聚糖属于天然碱性多糖，不溶于水，但是壳聚糖含有游离氨基，在酸性条件下可以结合氢离子，从而使壳聚糖成为带正电荷的电解质。单甲氧基聚乙二醇(Methoxy Polyethylene Glycol, mPEG)具有良好的水溶性、润湿性、润滑性、生理惰性、对人体无刺激、温和，在化妆品和制药工业中应用广泛，分子量为2KD。胶原蛋白是细胞外最重要的水不溶性纤维蛋白，是构成细胞外基质的骨架。胶原在细胞外基质中形成半晶体的纤维，给细胞提供抗张力和弹性，并在细胞的迁移和发育中起作用。胶原在各种动物中都有存在，脊椎动物中腱、软骨和骨中的胶原非常丰富，几乎占了蛋白总重的一半。胶原经酸或碱部分水解或在水中煮沸，可以形成溶液。在壳聚糖的酸溶液中加入适量的单甲氧基聚乙二醇不会立刻中和壳聚糖的质子而使壳聚糖沉淀下来，可使壳聚糖溶液的PH值升至生理范围即pH7. O左右。在低温条件下，壳聚糖与水的作用阻止了壳聚糖链的聚集；温度升高时，单甲氧基聚乙二醇与水的结构化作用(该作用能减弱壳聚糖与水的作用)加强，使壳聚糖链脱水，水分子的区域被聚乙二醇的羟基集团取代，壳聚糖链聚集。壳聚糖/单甲氧基聚乙二醇温敏凝胶的形成有两个重要因素，一个是壳聚糖游离氨基的存在，它将使壳聚糖在溶液中带正电荷。第二是单甲氧基聚乙二醇的加入，它赋予凝胶系统稳定在PH中性的环境且具有温敏特性。这个特点， 使得壳聚糖温敏凝胶在形成凝胶前可以非常方便加载药物月中瘤坏死因子α (Tumor Necrosis Factor α , TNF- α )是一种多功能的细胞因子，她对细胞的增殖、分化、炎症反应与免疫功能等具有调节作用，特别是是其免疫调节功能更为重要。TNF-α 主要由激活的单核细胞/巨噬细胞、T淋巴细胞分泌，其它如中性粒细胞、肥大细胞及内皮细胞在一定条件下也會邑产生。成熟的 TNF-α (17kD)由膜型 TNF-a (26kD)切割而产生，两种形式的TNF-ci都具有生物活性W]。TNF-a有三个与受体结合的主要活性表位， 即四 36、84 91和143 146位。TNF-a以活性三聚体的形式与细胞表面的TNF-a 受体(TNFR)结合，从而启动信号通路，发挥生物学功能。TNF-α 的过表达与类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)、Crohn，s 病、多发性硬化症(multiple sclerosis)等自身免疫性疾病的密切关系已得到证实 ο TNF-α还是一个重要的前炎性细胞因子，可以介导多种炎性因子的释放，如 IL-U IL-6、GM-CSF。越来越多的疾病被发现与TNF-α的过量分泌有关，TNF-α已经成为治疗这类疾病的一个有效革巴标。1994年，Zhang等利用定位克隆的方法获得“Obese”基因。ob基因编码脂肪组织特异性mRNA，翻译成167个氨基酸的蛋白质，N端21个氨基酸为分泌信号肽，在被分泌入血的过程中去除N端的信号肽成瘦素。血液循环中的瘦素为 146 个氨基酸的多肽类激素，其活性部位含146个氨基酸残基，相对分子质量为16KD，亲水性强， 以单体形式存在于血浆中。与其他激素的分泌相似，瘦素的分泌也呈脉冲式。瘦素mRNA表达呈日周期变化，夜间表达量最高，半衰期为9. 4士3. Omin其分泌具有一定的节律性。瘦素在血液中的运输有游离和结合2种形式在人血清中2种形式各占50%，在肥胖的人和鼠中该比例发生变化。分泌到血中的瘦素大部分通过与血清蛋白结合来运输。在人类至少有两种瘦素结合蛋白，相对分子质量分别为176KD和240KD，只有游离的瘦素才具有生物活性。在体内，瘦素的功能呈现多样性。能量代谢方面瘦素与下丘脑的瘦素受体结合后可能通过下丘脑2神经肽通路，抑制NPY的合成与释放，增加交感神经系统活性，引起食欲降低，能量消耗增加，从而减轻体质量。生殖和发育方面瘦素可作用于下丘脑-垂体性腺这一生殖轴的各个层次。瘦素通过位于下丘脑的长型受体调节性行为和促性腺激素释放激素(&1RH)释放；在性腺水平，瘦素可直接作用于卵巢，恢复雌性ob/ob小鼠的生育能力； 瘦素对胎儿的生长发育也有一定的促进作用。骨代谢方面瘦素可通过中枢途径增强成骨细胞功能，影响骨重建，抑制骨形成，但对破骨细胞分化功能无明显影响。心血管系统方面瘦素能提高大鼠交感神经兴奋性而升高动脉压，可影响心肌细胞的代谢和功能血液系统方面瘦素能刺激造血干细胞的分裂和分化，提高细胞数量，血小板有瘦素受体(OB-R) 表达，瘦素能诱导血小板聚集。OB和ObR在多种肿瘤组织中均有表达，如乳腺癌、结肠癌、 胃癌、前列腺癌禾口月干癌等。近年来发现瘦素还有影响水盐代谢，致使饮水增加、尿液稀释、肾脏排钾减少，增加机体免疫应答能力的作用。根据壳聚糖和单甲氧基聚乙二醇的理化性质，本专利技术经过多次尝试改进了壳聚糖和单甲氧基聚乙二醇制备水凝胶系统，为TNF-α与瘦素给药提供了高性能的缓释系统。
技术实现思路
本专利技术公开了。本专利技术所述的壳聚糖凝胶给药系统，是由壳聚糖和单甲氧基聚乙二醇所组成。本专利技术确定了壳聚糖和单甲氧基聚乙二醇混合比例，即为按照重量比的2. 0% -2. 5%的壳聚糖、3. 5% -4. O%的单甲氧基聚乙二醇以及0. 胶原蛋白。本专利技术还公开了一种温度敏感的壳聚糖水凝胶的制备方法，包括以下步骤1)单甲氧基聚乙二醇溶液的配制称取单甲氧基聚乙二醇，溶于双蒸水，振荡搅拌器上持续震荡15min，使其彻底溶解，制成浓度为30%单甲氧基聚乙二醇溶液(w/v)，滤膜过滤，4°C低温储存备用。2)壳聚糖溶液的配制使用0. IM的醋酸配制壳聚糖溶液，搅拌2天后将获得的壳聚糖溶液高温高压消毒20min，冷却至室温后使用。3)将胶原溶于0. IM的氢氧化钠中，形成重量的胶原溶液，并调节pH值至 7. 0-7. 4.4)壳聚糖-单甲氧基聚乙二醇凝胶的制备将三种溶液冰浴30min后，吸取壳聚糖醋酸溶液到容器中，滴加1 %的胶原溶液后，快速搅拌同时逐滴加入单甲氧基聚乙二醇溶液，并持续搅拌20min。获得的壳聚糖-单甲氧基聚乙二醇凝胶系统中，壳聚糖质量浓度为 2.0% -2.5%，单甲氧基聚乙二醇浓度为3.5% -4.0%,0. 胶原蛋白。本专利技术所研制的凝胶给药系统与以往文献与专利文件更具有技术的精确性。在壳聚糖和单甲氧基聚乙二醇混合系统中，2%以下浓度的壳聚糖在生理温度下很难凝固，而超过4. 0%的浓度则难以溶解；本专利技术同时也确定了在重量比的2. 0%-2. 5%的壳聚糖下，温度敏感水凝胶系统中，单甲氧基聚乙二醇的精确浓度。本专利技术公开了一种TNF- α的凝胶给药系统，含有浓度为10_7Μ的TNF- α、重量百分比2. 5%的壳聚糖、3. 5%单甲氧基聚乙二醇以及0. 胶原蛋白。本专利技术还公开了一种瘦素的本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：吴志宏，
申请(专利权)人：吴志宏，
类型：发明
国别省市：
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