本发明专利技术通过改进范式氨基酸测定仪，给出一种主要用于测定蛋白质中伯氨基基团含量的伯氨基测定仪，推广可用于测量各种有机化合物中伯氨基基团的含量。该装置主要由反应部分、量气部分、洗气部分及回收部分组成，具有快速、精确、清洁等特点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于化学分析测试仪器设备领域，涉及一种主要用于测定蛋白质伯氨基含量(包括胶原多肽，各种氨基酸)的仪器一伯氨基测定仪。
技术介绍
目前用于测量蛋白质中伯氨基基团含量的方法都有茚三酮比色法、TNBS比色法、 胶束电动色谱法、甲醛法、范斯莱克法、气相色谱法。其中，茚三酮比色和TNBS比色属于分光光度法，均存在仪器误差。另外，在茚三酮比色法中，加热显色的时间长短以及显色后颜色的深浅都会造成误差；TNBS比色法专一性很强，主要和赖氨酸ε -氨基发生反应，不能定量全部伯氨基。甲醛法中，羟甲基化合物还存在进一步与伯氨基缩合的副反应，影响测量准确度。此外，甲醛由于在存放过程中，容易受外界环境的影响发生氧化变成甲酸，在滴定过程中甲酸会额外消耗氢氧化钠，从而使测量结果偏高。虽色谱法然具有高的灵敏度，但是对仪器设备要求较高，例如气相色谱法中所需的不锈钢反应装置加工要求高且造价昂贵。范斯莱克法使用过程中测量周期长，实验操作复杂，实验受外界环境温度影响较大。现有的范式氨基酸测定仪，主要由反应装置、量气装置和洗气装置三部分组成。其中反应装置和洗气装置分别为一体式结构，给清洗带来许多不便。原范式氨基酸测定仪需要专用的支架进行固定，占用空间大。测试受周围环境影响较大，低温下不能进行测量。范式氨基酸测定仪没有对废气、废液进行统一处理，对环境污染严重。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一种伯氨基酸测定仪以及其使用方法。本专利技术以范斯莱克法为原理，在范式氨基酸测定仪的基础上，设计一种快捷、简单、精确、洁净的伯氨基测定仪。测定仪的反应部分(I)内含磁子(9)，带有水浴夹套(4)及磁力搅拌(10)，反应器(1)底部为平底设计。测定仪的洗气部分(III)内含磁子( )，配有磁力搅拌(30)，洗气半球、2Τ)底部为平底设计。该装置可用于蛋白质、明胶及微量氨基酸中伯氨基基团的测量。一种伯氨基测定仪，由反应装置(I)、量气装置(II)、洗气装置(III)、回收装置 (IV)组成，其特征在于，反应装置(I)、量气装置(II)、洗气装置(III)、回收装置(IV)依次连接，反应装置(I)、量气装置(II)、洗气装置(III)的排气口及排液口全部连接于回收部分(IV)上。优选的，所述的反应装置(I)包含反应器(1)、加料管( 及三通连接管(14)。优选的，三通连接管(14)带有旋塞(1 ，旋塞(1 位于三通连接管(14)交汇处，用于调节气体在三通连接管(14)中的走向。优选的，所述的反应器(1)上部为磨口(12)，底部为平底，带有水浴夹套，如图 1所示。反应器(1)底部有向上的细颈玻璃管(7)及一个向下的排料管(11)；细颈玻璃管(7)的一端连接加料管O)，另一端穿过夹套(4)与反应器内壁( 接通；排料管(11)穿过夹套⑷与反应器内壁(5)接通，用于反应器⑴的排料。优选的，反应器夹套⑷外壁上含有两个接口(6)，用于连通循环水浴。优选的，反应器(1)内含有磁子(9)，底部配套磁力搅拌(10)。优选的，所述的反应装置(I)包括两个加料管——第一加料管( 和第二加料管 (3)。优选的，第一加料管( 和第二加料管C3)下部为细颈玻璃管，第一加料管( 为25 35ml，第二加料管C3)约为10 20ml。反应装置(I)包括两个细颈玻璃管，第一细颈玻璃管(7)和第二细颈玻璃管(8)，分别连接第一加料管( 和第二加料管(3)。优选的，三通连接管(15)通过细颈玻璃管一端的磨口塞(13)与反应器上部磨口 (12)连接，三通连接管(1 的另一端通过细颈弯管(17)与斜孔三通活塞(19)相连。洗气装置(III)包括洗气半球(Xi)及缓冲球06)；洗气半球(Xi)及缓冲球06) 经细颈玻璃连接管与斜孔三通活塞(19)连接。优选的，洗气半球(XT)半径为100 150mm，缓冲球(26)半径为80 100mm。优选的，洗气半球07)顶部连接细颈玻璃管(M)，用于气体进出；底部带有一个向下的玻璃管05)用于排液，并带有一个90°向上弯管08)用于连接缓冲球06)。洗气半球(XT)为平底，内含磁子( )，配套磁力搅拌器(30)。所述的回收装置(IV)包含四通连接管(31)和回收瓶(33)。优选的，回收瓶(33) 配有含两个玻璃管(34)、(35)的胶塞(36)。本专利技术反应器(1)配有水浴夹套，底端连接两个加料管，第一加料管( 和第二加料管(3)，上部磨口(1 通过细颈玻璃管一端的磨口塞(1 与三通连接管(14)连接，三通连接管(14)另一端通过细颈弯管(17)与斜孔三通活塞(19)相连，量气管00)下部通过乳胶管0 连接水准球(乳胶管0 长度为量气管OO)的1. 5倍)，量气管 (20)上部直管(18)通过连接管连接洗气半球(27)，洗气半球(XT)下端90°向上弯管0 连接缓冲球06)。三通连接管排气管(16)、反应器排液管(11)、洗气半球排液管 (25)均通过硅胶管(排液管(11)、(25) 口的硅胶管上带有止水夹)与四通连接管(31)连接，再通过硅胶管(3 连接于回收装置(IV)上。本专利技术的反应器⑴的水浴夹套⑷连接恒温水浴槽，用以调节反应温度；反应器(1)内含磁子(9)，下部配有磁力搅拌(10)，通过调节搅拌速度可以调节反应速度。本专利技术的洗气半球(XT)内含磁子( )，下部配有磁力搅拌(30)，通过调节搅拌速度调节洗气速度。本专利技术还提供所述伯氨定量仪的使用方法，包括下列步骤本专利技术的使用前先进行准备工作，密封好各个接口，反应器排液管(11)和洗气半球排液管05)用止水夹夹好。首先从水准球注入去离子水，将量气管OO)注满去离子水后，旋动量气管旋塞保持量气管OO)充满水状态。然后将洗气液(高锰酸钾20 40g， 氢氧化钠20 40g，去离子水200 400ml)，从缓冲瓶06)倒入，注满洗气半球(Jt)至量气管旋塞(19)处时，旋动量气管旋塞(19)，使量气管OO)与三通连接管(14)相通。提高水准球(21)，将量气管OO)注满去离子水至三通连接管旋塞(1 处。旋动三通连接管旋塞(15)，使反应器(1)通过三通连接管排气管(11)与回收装置(IV)相通，同时旋动量气管旋塞(19)至水平方向，闭合量气管。把水准球放于低处，此时洗气半球07)与量气管00)中均充满液体，并与外界空气隔绝。打开循环水浴与磁力搅拌(10)。本专利技术测样时先从第一加料管( 加入冰醋酸约20 30ml，接着加入40%的亚硝酸钠水溶液约20 30ml，闭合第一加料管( 和第二加料管( 。反应器(1)内反应生成NO或NO2气体，保持5 8min，排净反应器(1)内空气。旋动三通连接管旋塞(15)，闭合反应器(1)。打开第一加料管( 和第二加料管(3)，反应器(1)内产生气体把液体从第一加料管( 和第二加料管(3)中赶出，当把第一加料管( 和第二加料管C3)下部细颈内气体完全赶出后，闭合第一加料管( 和第二加料管(3)。旋动三通连接管旋塞(15)和量气管旋塞(19)，使反应器(1)仅与量气管00)相通，保持反应器(1)内气体进入量气管 00)。在第一加料管O)中注满去离子水，液封。在第二加料管(3)中加入待测蛋白质溶液，缓慢打开加料管(3)旋塞，使待测液缓慢流入反应器(1)，并用本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李天铎，唐晓龙，姜青伟，许静，
申请(专利权)人：山东轻工业学院，
类型：发明
国别省市：
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