固相多分析物测试制造技术

本发明专利技术提供了用于检测一种或多种分析物的存在和／或其量的组合物和方法，所述分析物包括例如滥用药物。组合物包含结合在一个例如颗粒或多孔板等固相上的两种或多种分析物。组合物和方法也可以同时、并行或连续测定样品中的两种或多种目标分析物的存在和／或量。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请涉及测定样品(如身体样品或非身体样品)中一种或多种分析物(例如滥 用药物、有毒化学品、处方药等)的存在和/或量的方法和组合物，并且更特定地为采用竞 争性免疫测试来实现这一目标的方法和组合物。在一些实施方式中，方法和组合物可用于 同时、并行或连续测定样品中两种或多种分析物的存在或量。本申请描述了包含结合在一 个固相上的两种或多种不同分析物的固相分析物组合物，以及在竞争性免疫测试中使用来 测定一种或多种目标分析物的存在和量的方法。
技术介绍
例如放射免疫测试(RIA)和酶免疫测试(EIA)等免疫测试是用于测定样品中一种 或多种目标分析物的存在、特性和量的有效方法。许多免疫测试将特异于目标分析物的抗 体固定化在固相上，例如微孔板或珠子；检测所结合的抗体与样品中存在的分析物之间的 结合，例如通过使用三明治测试。其他免疫测试将分析物固定化；这些免疫测试称为固相抗 原或固相分析物免疫测试。在固相分析物免疫测试中，固相分析物与样品中存在的分析物 竞争结合于特异于分析物的抗体。通常，在这样的固相分析物测试中，抗体是可以用一些方 式检测的，例如它是被标记的，例如放射性、荧光、发光或酶(例如可以在存在合适底物时 发生酶反应，产生颜色变化)标记的，或是它的存在可以通过本身被标记的第二抗体来检 测。为了测定特定的样品是否包含一种以上的目标分析物，以前的方法通常采用单独 的固相组分(例如单独的微孔板或是几套微珠)，每种固相组分包含特异于一种特定分析 物的结合抗体，或是每种固相组分包含单一类型的结合分析物。这样针对每种分析物需要 单独的固相组分，使得多分析物测试昂贵、技术复杂并且花时间。需要能有一种有效且相对 便宜的分析物检测方法，能够快速测定样品中一种或多种分析物的存在和/或量，包括例 如滥用药物等分析物。专利技术简述免疫测试是检测样品中分析物的存在和/或量的有力工具。然而，能够检测样品 中的多种分析物，通常需要使用多个单独的测试，例如每种目标分析物一个测试，这就提高 了成本、时间和过程的技术复杂性，并且导致操作者可能在多个步骤中的一个步骤产生误 差。专利技术者惊奇地发现使用包含结合在一个固相上的至少两种分析物的固相分析物组合 物，能够提高多分析物测试的性能，表现出高灵敏度和高效率。本专利技术所述的多分析物测试 很灵活，可以同时、连续或并行进行，从而降低成本、时间和过程的复杂性。因此，本专利技术提供了一种测定样品中目标分析物的存在的方法，包括(a)使固相分析物组合物接触i)抗体，其中所述抗体特异于所述目标分析物；和ii)样品；其中所述固相分析物组合物包含结合在固相支持物上的至少两种不同的分析 物，其中所述至少两种不同的分析物中的一种为目标分析物，以及(b)测定样品中是否存在目标分析物。在一些实施方式中，固相分析物组合物首先与样品相接触，然后与抗体相接触。在 一些实施方式中，抗体可检测标记，例如，标有荧光、发光(包括化学发光或生物发光)、放 射性或酶标记物等可检测标记物。在一些实施方式中，抗体没有被标记。在一些实施方式中，方法包括去除没有结合于固相分析物组合物的抗体。在一些实施方式中，方法包括如果存在分析物，测定分析物存在的量。在一些实施方式中，通过比较样品中结合于固相分析物组合物的抗体产生的信号 和不包含目标分析物的对照样品中结合于固相分析物组合物的抗体产生的信号来测定样 品中存在分析物。在一些实施方式中，结合于固相分析物组合物的抗体产生的信号是由抗体上的可 检测标记物产生的。在一些实施方式中，结合于固相分析物组合物的抗体产生的信号是由第二抗体与 所述抗体结合产生的，其中所述第二抗体被可检测标记。在一些实施方式中，可检测的标记物为荧光、发光(包括化学发光或生物发光)、 放射性或酶标记物。在一些实施方式中，方法还包括将固相分析物组合物与一个第二抗体相接触，其 中第二抗体特异于结合于固相的至少第二个不同分析物，并且测定样品中是否存在第二分 析物。在方法的一些实施方式中，至少两种不同的分析物直接地或间接地非共价结合于 固相。在一些实施方式中，至少两种不同的分析物直接地或间接地共价结合于固相。在一些实施方式中，至少两种不同的分析物通过吸附直接地或间接地结合于固 相。在一些实施方式中，至少两种不同的分析物是共价结合于结合剂，所述结合剂非 共价地或通过吸附结合于固相。在一些实施方式中，结合剂选自HSA和BSA。在一些实施方式中，至少两种不同的分析物为滥用药物或其代谢物。滥用 药物或其代谢物可选自可卡因、苯酰牙子碱、古柯乙烯(cocaethylene)、去甲可卡因 (norcocaine)、PCP、苯丙胺、甲基苯丙胺、大麻素、THC、羧基-THC、海洛因、可待因、吗啡， 6-单乙酰吗啡(MAM)、羟考酮、3，4-亚甲基二氧苯丙胺(MDA)或3，4-亚甲基二氧甲基苯丙 胺(MDMA)。样品可为身体样品或来源于身体样品的样品。身体样品可来源于人，并且为选自脑、心、肺、肾、肝、肌肉、骨、胃、肠和皮肤等的组 织样品；选自尿、血液、血浆、血清、唾液、精液、痰、脑脊液、粘液、汗、玻璃液和乳汁等的生物 液；和角质化结构。固相支持物可为微孔板的微孔。还提供了一种测定样品中多种(用数字“N”表示)不同的目标分析物的存在的方法，该方法包括(a)使固相分析物组合物接触i)多种抗体，其中所述多种抗体包含特异于每种不 同目标分析物的抗体；和ii)样品；其中所述固相分析物组合物包含结合于固相支持物的 至少“N”种不同的分析物，其中所述结合的至少“N”种不同的分析物包括多种目标分析物， 以及(b)测定多种目标分析物中每种不同的分析物是否存在于样品中。在一些实施方式中，特异于各种不同目标分析物的抗体是可以分别检测的。在一 些实施方式中，抗体用可检测的荧光、发光(包括化学发光或生物发光)、放射性或酶标记 物标记。在一些实施方式中，方法包括测定如果存在的每种不同目标分析物的量。在一些实施方式中，通过比较样品中结合于固相分析物组合物的特异于一种特定 目标分析物的抗体产生的信号和不包含特定目标分析物的对照样品中结合于固相分析物 组合物的相同抗体产生的信号来测定样品中存在各种不同的目标分析物。在一些实施方式中，多种抗体同时接触固相分析物组合物。在一些实施方式中，多种抗体中的至少一种是在与多种抗体中的至少另一种抗体 不同的时间接触固相分析物组合物。还提供了一种包含至少两种不同的结合于固相的分析物的组合物。至少两种不同 的分析物直接地或间接地共价结合于固相。至少两种不同的分析物直接地或间接地非共价 结合于固相。在一些实施方式中，组合物包含2-10种不同的结合于固相的分析物。在一些实施 方式中，至少两种不同的分析物为滥用药物分析物或其代谢物。在一些实施方式中，至少 两种不同的分析物选自可卡因、苯酰牙子碱、古柯乙烯、去甲可卡因、PCP、苯丙胺、甲基苯丙 胺、大麻素、THC、羧基-THC、海洛因、可待因、吗啡，6-单乙酰吗啡(MAM)、羟考酮、3，4_亚甲 基二氧苯丙胺(MDA)或3，4_亚甲基二氧甲基苯丙胺(MDMA)。还提供了一种试剂盒，其包含如本专利技术所述的组合物，以及至少一种特异于结合 在固相上的两种不同分析物中至少一种的抗体。在一些实施方式中，试剂盒可包含至少一 种特异于选本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定样品中目标分析物的存在的方法，包括：　　（ａ）使固相分析物组合物接触ｉ）抗体，其中所述抗体特异于所述目标分析物；和ｉｉ）样品；其中所述固相分析物组合物包含结合在固相支持物上的至少两种不同的分析物，其中所述至少两种不同的分析物中的一种为目标分析物，以及　　（ｂ）测定样品中是否存在所述目标分析物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US61/048,8922008年4月29日1.一种测定样品中目标分析物的存在的方法，包括(a)使固相分析物组合物接触i)抗体，其中所述抗体特异于所述目标分析物；和ii) 样品；其中所述固相分析物组合物包含结合在固相支持物上的至少两种不同的分析物，其 中所述至少两种不同的分析物中的一种为目标分析物，以及(b)测定样品中是否存在所述目标分析物。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相分析物组合物首先接触样品，然后 接触抗体。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗体被可检测标记。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述抗体用可检测的荧光、发光(包括化学 发光或生物发光)、放射性或酶标记物标记。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗体没有被标记。6.如权利要求1所述的方法，还包括去除没有结合于固相分析物组合物的抗体。7.如权利要求1所述的方法，还包括如果存在分析物，测定分析物存在的量。8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，通过比较样品中结合于固相分析物组合物 的抗体产生的信号与不包含目标分析物的对照样品中结合于固相分析物组合物的抗体产 生的信号来测定样品中存在分析物。9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，结合于固相分析物组合物的抗体产生的信 号是由抗体上的可检测标记物产生的。10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，结合于固相分析物组合物的抗体产生的信 号是由第二抗体与所述抗体结合产生的，其中所述第二抗体被可检测标记。11.如权利要求9或10所述的方法，其特征在于，所述可检测的标记物为荧光、发光 (包括化学发光或生物发光)、放射性或酶标记物。12.如权利要求1所述的方法，还包括使固相分析物组合物接触第二抗体，其中所述第 二抗体特异于结合于固相的至少第二种不同的分析物，并且测定样品中是否存在第二分析 物。13.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少两种不同的分析物直接地或间接 地非共价结合于固相。14.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少两种不同的分析物直接地或间接 地共价结合于固相。15.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少两种不同的分析物通过吸附直接 地或间接地结合于固相。16.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少两种不同的分析物共价结合于结 合剂，所述结合剂非共价地或通过吸附结合于固相。17.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述结合剂选自HSA或BSA。18.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少两种不同的分析物为滥用药物或 其代谢物。19.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述滥用药物或其代谢物选自可卡因、苯 酰牙子碱、古柯乙烯、去甲可卡因、PCP、苯丙胺、甲基苯丙胺、大麻素、THC、羧基-THC、海洛 因、可待因、吗啡、6-单乙酰吗啡(MAM)、羟考酮、3，4-亚甲基二氧苯丙胺(MDA)或3，4_亚甲基二氧甲基苯丙胺(MDMA)。20.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品为身体样品或来源于身体样品的样品。21.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述身体样品来自人，并且为选自脑、心、 肺、肾、肝、肌肉、骨、胃、肠和皮肤的组织样品；选自尿、血液、血浆、血清、唾液、精液、痰、脑 脊液、粘液、汗、玻璃液和乳汁的生物液；和角质化结构。22.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述身体样品为角质化结构。23.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相支持物为微孔板的微孔。24.一种测定样品中多种(用数字“N”表示)不同的目标分析物的存在的方法，该方法 包括(a)使固相分析物组合物接触i)多种抗体，其中所述多种抗体包含特异于各种不同目 标分析物的抗体；和ii)样品；其中所述固相分析物组合物包含结合于固相支持物的至少 “N”种不同的分析物，其中所述结合的至少“N”种不同的分析物包括多种目标分析物，以及(b)测定多种目标分析物中各种不同目标分析物是否存在于样品中。25.如权利要求M所述的方法，其特征在于，所述特异于各种不同目标分析物的抗体 是可分别检测的。26.如权利要求25所述的方法，其特征在于，所述抗体用可检测的荧光、发光(包括化 学发光或生物发光)、放射性或酶标记物标记。27.如权利要求M所述的方法，还包括测定如果存在的各种不同目标分析物的量。28.如权利要求M所述的方法，其特征在于，通过比较样品中结合于固相分析物...

【专利技术属性】
技术研发人员：V·希尔，
申请(专利权)人：赛凯米迪克斯股份有限公司，
类型：发明
国别省市：US