用于疫苗的草肽制造技术

本发明专利技术涉及包括用于预防或治疗房尘螨过敏症的肽的组合物，并且特别涉及用于预防或治疗所述过敏症的肽的最佳组合。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于预防或治疗草过敏症的组合物。
技术介绍
T细胞抗原识别需要抗原呈递细胞(APC)在其细胞表面上呈递与主要组织相容性复合物(MHC)的分子缔合的抗原片段(肽)。T细胞使用其抗原特异性T细胞受体(TCR) 来识别由APC呈递的抗原片段。这样的识别作为免疫系统的触发器起作用来产生一系列应答以根除已被识别的抗原。生物体如人类的免疫系统对外部抗原的识别可在某些情况下造成疾病，其被称作特应性疾患。后者的实例是过敏性疾病，包括哮喘、特应性皮炎和过敏性鼻炎。在这一组疾病中，B淋巴细胞产生对外源产生的抗原结合的IgE类抗体(在人类中)，所述抗原在本文称为过敏原，因为这些分子引发过敏响应。过敏原特异性IgE的产生依赖于也被过敏原活化(并对其有特异性)的T淋巴细胞。借助于诸如嗜碱性粒细胞和肥大细胞等细胞对IgE 表面受体的表达，过敏原特异性的IgE抗体结合到这些细胞表面。过敏原对结合在表面的IgE分子的交联造成这些效应细胞脱粒，导致炎症介质诸如组胺、5-羟色胺和脂质介质如硫桥白三烯(sulphidoleukotriene)的释放。除了 IgE依赖性事件，某些过敏性疾病诸如哮喘的特征为IgE独立性事件。目前用提供症状缓解或预防的剂来治疗IgE介导的过敏性疾病。这种剂的实例是抗组胺剂、β 2激动剂和糖皮质类固醇。此外，通过包括过敏原成分或提取物的定期注射的去敏化程序来治疗一些IgE介导的疾病。去敏化治疗可诱导与IgE竞争过敏原的IgG响应， 或可诱导阻断针对过敏原的IgE的合成的特定抑制性T细胞。这种形式的治疗不是总有效， 并且具有激起严重副作用特别是一般过敏性休克的风险。这可以是致命的，除非立即意识到并用肾上腺素治疗。将减少或消除针对特定过敏原的不想要的过敏-免疫应答而不改变对其它外来抗原的免疫反应性或触发本身过敏响应的治疗性处理将对过敏个体大有益处。普遍认为，草过敏原是包括哮喘、过敏性鼻炎和过敏性皮炎在内的人类和动物过敏性疾病的主要原因。存在于草花粉中的蛋白是尤其重要的。例如，约90%的干草热患者对草花粉过敏。干草热是一种形式的季节性过敏症的统称，其特征是打喷嚏、流鼻涕和眼睛发痒。术语“干草热”源于该形式的变应性疾病在“割干草季节”中最为流行，该季节与许多草的花期相应，此时禾本植物释放最大量的花粉。其在夏季尤其流行，通常从5月末到8 月末(在北半球)。在美国，据计算干草热对于成人是第五位的主要慢性病并是缺勤的主要原因，这导致每年失去或减少近4百万个工作日，导致总生产力损失方面超过$7亿的总损失。过敏症还是儿童中最常报道的慢性病症，对于40%以上的儿童，限制了其活动。每年，过敏症在美国导致了 17，000，000次以上的门诊就诊；这些过敏症就诊的一半以上是因诸如干草热的季节性过敏症导致的。因此治疗性或预防性治疗将对患有草过敏症的人或处于患草过敏症的风险的人具有极大益处。专利技术概述通常将草花粉过敏原分组，在每一组中绝大多数物种表达至少一种花粉过敏原。 组的例子包括-组1草花粉过敏原，其包括，例如，来自黑麦草(Loliumperenne)的蛋白Lol ρ 1和来自猫尾草(Phleum pratense)的蛋白Phl ρ 1 ；和-组5草花粉过敏原，其包括，例如，来自黑麦草的蛋白Lolρ fe和蛋白Lol ρ 5b， 来自猫尾草的蛋白Wil P 5，和来自狗牙根(Cynodon dactylon)的蛋白Cyn d 5。本专利技术人已发现，来源于草物种的花粉中的主要过敏原的某些肽片段在使得个体对这些过敏原的去敏化中尤其有用。已筛选了本专利技术的多肽组合结合许多MHC II类分子的能力，和以极小的组胺释放引起T细胞增殖的能力。因此可将本专利技术的组合物、产物、载体和制剂提供给个体以通过免疫耐受作用(tolerisation)来预防或治疗过敏症。通过使用预测肽-MHC相互作用的计算机模拟分析和MHC II类结合分析，选择作为 MHC II类-结合T细胞表位的本专利技术的肽。通过同源性来鉴定另外的表位。在体外T细胞响应分析的基础上对本专利技术的肽和肽组合进行进一步选择。然而，本专利技术的肽组合通过靶向多种不同MHC分子而提供对人类人群覆盖面广泛的效力。因此，以本专利技术的肽配制的疫苗将具有广泛的应用。本专利技术人的工作产生了具有以下特征的肽组合-该组合结合许多不同MHCII类分子-该组合在草过敏个体中显著刺激细胞因子释放-该组合的肽不引起显著的组胺释放。从广泛分析的草表位序列中选择肽组合物以鉴定在草过敏个体中具有特别良好的MHC结合性质和细胞因子响应特征的核心肽。该组合可包括三个这样的肽的核心，其中每一个选自最普遍的草，猫尾草、黑麦草和狗牙根。该组合可包括四种这样的肽的核心，这些肽中的每一种选自在肽的相互组合中表现为特别有效的肽。以这种方式提供肽的核心组，其包括代表三种最普遍的草的多肽的核心组，优选同一组合中的四种或多种不同的单独的多肽提供各种MHC结合表位，并从而构建冗余性以允许MHC的多态性性质。提供本专利技术的核心组，优选具有特别良好的MHC结合性质和细胞因子响应特征的四种或多种不同的单独的多肽提供了多种T细胞表位，允许为了诱导免疫耐受性而募集宽泛范围的T细胞特异性。因此，本专利技术的组合物具有超越使用单独多肽的有利额外作用。本专利技术人也已证明通过细胞因子响应测量，本专利技术的组合物能够提供对多态性研究群体的极高覆盖。因此，本专利技术提供了适用于通过免疫耐受作用预防或治疗草花粉过敏症的组合物，该组合物包括(a)多月太 Tim07B(KIPAGELQIIDKIDA)、Tim IOB (KYTVFETALKKAITAMSE)、Tim 04A (WGAIffRIDTPDKL), Tim 07G (FKVAATAANAAPANDK)、或其任何一种的变体中的至少一种；(b)多肽 BerO 1 (SGKAFGAMAKKGQED)、Ber02 (FIPMKSSWGA)、 Ber02C (KSSffGAIffRIDPKKPLK)和 Ber 02B(KDSDEFIPMKSSWGAIWR)、或其任何一种的变体中的至少一种；和(c)多肽 Bio04A (LKKAVTAMSEAEK)、Rye09B (PEVKYAVFEAALTKAIT)、 Bio02A (KYDAYVATLTEALR)、Bio03A (KFIPTLVAAVKQAYAAKQ)、Rye 08A (ETYKFIPSLEAAVKQAY)、 Rye 05C (NAGFKAAVAAAANAPPK)、或其任何一种的变体中的至少一种，其中所述变体是I)长度为最多30个氨基酸的较长的多肽，其包括(a)、(b)或(c)中指定的相应多肽的序列，或II)长度为9至30个氨基酸的多肽，其包括与(a)、(b)或(c)中指定的相应多肽的序列具有至少65%同源性的序列，该序列能够使得免疫耐受所述相应多肽；或III)长度为9至30个氨基酸的多肽，其包括(a)、(b)或(c)中指定的相应多肽的序列中至少9个连续氨基酸的序列，或与所述至少9个连续氨基酸具有至少65%同源性的序列，所述至少9个连续氨基酸的序列或同源性序列能够使得免疫耐受所述相应的多肽。本专利技术还包括适用于通过免疫耐受作用预防或治疗草花粉过敏症的组合物，该组合物包括至少四种不同的选自本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种适用于通过免疫耐受作用预防或治疗草花粉过敏症的组合物，所述组合物包括：（ａ）多肽Ｔｉｍ０７Ｂ（ＫＩＰＡＧＥＬＱＩＩＤＫＩＤＡ）、Ｔｉｍ１０Ｂ（ＫＹＴＶＦＥＴＡＬＫＫＡＩＴＡＭＳＥ）、Ｔｉｍ　０４Ａ（ＷＧＡＩＷＲＩＤＴＰＤＫＬ）、Ｔｉｍ　０７Ｇ（ＦＫＶＡＡＴＡＡＮＡＡＰＡＮＤＫ）、或其任何一种的变体中的至少一种；（ｂ）多肽Ｂｅｒ０１（ＳＧＫＡＦＧＡＭＡＫＫＧＱＥＤ）、Ｂｅｒ０２（ＦＩＰＭＫＳＳＷＧＡ）、Ｂｅｒ０２Ｃ（ＫＳＳＷＧＡＩＷＲＩＤＰＫＫＰＬＫ）和Ｂｅｒ　０２ＢＫＤＳＤＥＦＩＰＭＫＳＳＷＧＡＩＷＲ、或其任何一种的变体中的至少一种；和（ｃ）多肽Ｂｉｏ０４Ａ（ＬＫＫＡＶＴＡＭＳＥＡＥＫ）、Ｒｙｅ０９Ｂ（ＰＥＶＫＹＡＶＦＥＡＡＬＴＫＡＩＴ）、Ｂｉｏ０２Ａ（ＫＹＤＡＹＶＡＴＬＴＥＡＬＲ）、Ｂｉｏ０３Ａ（ＫＦＩＰＴＬＶＡＡＶＫＱＡＹＡＡＫＱ）、Ｒｙｅ　０８Ａ（ＥＴＹＫＦＩＰＳＬＥＡＡＶＫＱＡＹ）、Ｒｙｅ０５Ｃ（ＮＡＧＦＫＡＡＶＡＡＡＡＮＡＰＰＫ）、或其任何一种的变体中的至少一种，其中所述变体是：Ｉ）长度为最多３０个氨基酸的较长的多肽，其包括（ａ）、（ｂ）或（ｃ）中指定的相应多肽的序列，或ＩＩ）长度为９至３０个氨基酸的多肽，其包括与（ａ）、（ｂ）或（ｃ）中指定的相应多肽的序列具有至少６５％同源性，且能够使得免疫耐受所述相应多肽的序列；或ＩＩＩ）长度为９至３０个氨基酸的多肽，其包括（ａ）、（ｂ）或（ｃ）中指定的相应多肽的序列中至少９个连续氨基酸的序列，或与所述至少９个连续氨基酸具有至少６５％同源性的序列，所述至少９个连续氨基酸的序列或同源性序列能够使得免疫耐受所述相应多肽。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗德·哈夫纳，
申请(专利权)人：切尔卡西亚有限公司，
类型：发明
国别省市：GB