【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学中人体细胞的培养领域,特别是一种。
技术介绍
血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)是构成血管中层的主要细胞成份,其收缩舒张、增殖、迁移和钙化等与心血管疾病的发生密切相关。体外培养人脐血管平滑肌细胞是研究心血管疾病发病机制及其防治工作的基础和重要手段。动脉血管平滑肌细胞的体外培养始于20世纪70年代,由Ross和Chamley用组织贴块法培养成功;体外培养的血管平滑肌细胞可取自人体不同部位的动脉血管,如胸主动脉、腹主动脉、肺动脉、脑动脉、肠系膜动脉等;人脐静脉血管不仅取材简单,来源充沛,而且其平滑肌细胞活力强,较适合培养;血管平滑肌细胞的培养方法有多种,其中主要有酶消化法和组织块贴壁法,不同的培养方法有不同的优点和用处。酶消化法可获得细胞形态分化良好的收缩型细胞,但是消化酶的作用时间往往不易掌握,且消化酶较贵,细胞获得量亦不够多。而组织块贴壁法操作简便、经济实用,但是,存在原代细胞培养成功率不高以及达到能传代的时间长的缺点,但细胞传代培养可获得较大量的均一细胞,适用于细胞量需要较多的研究。传统的 ...
【技术保护点】
1.一种原代培养人脐血管平滑肌细胞的方法,培养步骤为:1)取人脐带洗净血渍,分离出脐静脉并转移到无菌培养皿;2)沿血管的纵轴方向剪开血管,血管的内膜面向上,祛除内皮细胞;3)将血管切成5mm×5mm的小块,吸移至培养瓶内,均匀铺于瓶底;4)培养瓶倒置加入含有20%胎牛血清的DMEM培养液;5)培养瓶置于37℃、含有5% CO2的培养箱中,4-6h组织块贴壁后小心翻转培养瓶,使组织块浸入培养液中,静置培养;6)每3天换液一次,当细胞传至3-5代时,对细胞进行形态学及免疫细胞化学鉴定。
【技术特征摘要】
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