一种猪成熟脂肪细胞快速去分化为前体脂肪细胞的培养方法技术

技术编号:5994913 阅读:367 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种猪成熟脂肪细胞快速去分化为前体脂肪细胞的培养方法,包括以下步骤:a.猪成熟脂肪细胞的分离;b.天花板培养法去分化猪成熟脂肪细胞;c.去分化脂肪细胞的传代培养。本发明专利技术提供的方法能够廉价、快速而高效的获得大量去分化的脂肪细胞,所使用的培养基价格低廉,去分化的代价较低,可以大范围的推广使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
,尤其是一种猪成熟脂肪细胞快速去分化为前体脂肪细 胞的培养方法。
技术介绍
脂肪组织成熟脂肪细胞去分化为前体脂肪细胞,是近年来发展起来的一种获得纯 净、同质的前体脂肪细胞的方法。前体脂肪细胞在研究与肥胖相关疾病的致病机理及治疗 方法等方面是一个理想的体外模型,而猪是目前研究人类肥胖、糖尿病及其并发症等疾病 的最佳模式动物,因此,从猪的脂肪组织获得成熟脂肪细胞并去分化为前体脂肪细胞具有 极其重要的意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种猪成熟脂肪细胞快速去分化为前体脂肪 细胞的培养方法。,包括以下步骤a.猪成熟脂肪细胞的分离无菌条件下采集1-30日龄仔猪颈、背部皮下脂肪组织,把剪下的脂肪组织放在玻 璃皿中,用含有双抗的PBS缓冲液清洗2次。然后将脂肪组织转入到另一个干净的玻璃皿 中,并用眼科手术剪将脂肪组织剪成约Imm3的小块,之后将脂肪组织碎块转入一个体积为 30ml的小玻璃瓶中,向小玻璃瓶中加入10-15ml 1% I型胶原酶消化液,盖好盖子后将瓶 口用封口膜封好后带出细胞间,在37°C水浴锅中振荡消化;消化完后用酒精棉球将玻璃瓶擦拭干净本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种猪成熟脂肪细胞快速去分化为前体脂肪细胞的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:a.猪成熟脂肪细胞的分离无菌条件下采集1-30日龄仔猪颈、背部皮下脂肪组织,把剪下的脂肪组织放在玻璃皿中,用含有双抗的PBS缓冲液清洗2次。然后将脂肪组织转入到另一个干净的玻璃皿中,并用眼科手术剪将脂肪组织剪成约1mm3的小块,之后将脂肪组织碎块转入一个体积为30ml的小玻璃瓶中,向小玻璃瓶中加入10-15ml 1%Ⅰ型胶原酶消化液,盖好盖子后将瓶口用封口膜封好后带出细胞间,在37℃水浴锅中振荡消化;消化时间到了后用酒精棉球将玻璃瓶擦拭干净并带入细胞间,在无菌操作台上加入等体积的DMEM/F12完全培养基,中和...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:杨公社宋子仪张国华赵丽丽杨浩高倩李新建郑雪莉
申请(专利权)人:西北农林科技大学
类型:发明
国别省市:87

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