一种银柴胡素H的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种操作简便、污染小、能耗少的银柴胡素H的制备方法。工艺步骤为：取银柴胡根，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，甲醇作为夹带剂，得萃取物，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，40-60%乙醇洗脱，收集3-8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩、干燥，加到硅胶层析柱上，以甲醇-氯仿混合溶剂洗脱，收集洗脱液，浓缩，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分离沉淀，洗涤、干燥，粉碎即得。采用本发明专利技术制备银柴胡素H，产品纯度高，易于实现产业化放大。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种银柴胡素H的制备方法，尤其是一种从植物中提取银柴胡素H的制备方法。
技术介绍
银柴胡素H(Dichotomin H),分子式=C47H66N8O10,分子量:903. 086，CAS 登录号 193672-86-5，主要存在于石竹科植物银柴胡 Stellaria dichotoma L. var. Ianceolata Bge.中。现代研究表明，银柴胡素H具有抗病毒、抗肿瘤等多种作用，同时其也作为合成其它活性衍生物的原料。石竹科植物银柴胡Stellaria dichotoma L. var. Ianceolata Bge.的根被作为中药银柴胡使用，清虚热，除疳热。用于阴虚发热，骨蒸劳热，小儿疳热。现有技术中，尚没有适用于高纯度银柴胡素H工业化大生产的制备工艺报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种利于大生产操作、产品纯度高的银柴胡素 H的制备方法。为解决上述技术问题，本专利技术采用下列技术方案。取银柴胡根，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，甲醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为2-4%，萃取压力20-30MPa，温度40-60°C，CO2流量l_3ml/g生药·π η，萃取时间100-150min，得萃取物，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，40-60%乙醇洗脱，收集3-8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩、干燥，加到硅胶层析柱上，以甲醇-氯仿混合溶剂洗脱，该混合溶剂中甲醇与氯仿的比例为8:1，洗脱液按柱体积分份收集，合并第4-8份柱体积的洗脱液，浓缩，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分离沉淀，洗涤、干燥， 粉碎即得。CO2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为3%。CO2超临界萃取压力25MPa，温度50°C，CO2流量2ml/g生药· min。CO2超临界萃取时间120min大孔吸附树脂选自DlOl型、D102型、AB-8型大孔吸附树脂中的一种。大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度为50%。大孔吸附树脂洗脱用乙醇的收集量为5倍量柱体积。制备所得银柴胡素H可采用下列方法检测。试验例1 HPLC法测定银柴胡素H纯度色谱条件色谱柱十八烷基硅烷键合胶硅胶为填充剂；流动相甲醇-1%醋酸的水溶液 (95 5)；流速:lmL/min ；检测波长:257nm ；柱温:30°C。测定方法精密称取银柴胡素H2mg，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超声振荡使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10μ L，注入高效液相色谱仪，采用归一化法测定样品纯度。采用本专利技术制备银柴胡素H，利于大生产操作，能耗小，污染小。下面将结合具体实施方式对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施例方式实施例1取银柴胡根10Kg，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，甲醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为2%，萃取压力20MPa，温度40°C，CO2流量lml/g生药·π η，萃取时间 lOOmin，得萃取物，加入到DlOl型大孔吸附树脂柱上吸附，40%乙醇洗脱，收集3倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩、干燥，加到硅胶层析柱上，以甲醇-氯仿混合溶剂洗脱，该混合溶剂中甲醇与氯仿的比例为8:1，洗脱液按柱体积分份收集，合并第4-8份柱体积的洗脱液，浓缩，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分离沉淀，洗涤、干燥，粉碎即得银柴胡素HO. 33g，经 HPLC检测，纯度为96. 8%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。实施例2取银柴胡根10Kg，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，甲醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%，萃取压力30MPa，温度60°C，CO2流量3ml/g生药·π η，萃取时间 150min，得萃取物，加入到D102型大孔吸附树脂柱上吸附，60%乙醇洗脱，收集8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩、干燥，加到硅胶层析柱上，以甲醇-氯仿混合溶剂洗脱，该混合溶剂中甲醇与氯仿的比例为8:1，洗脱液按柱体积分份收集，合并第4-8份柱体积的洗脱液，浓缩，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分离沉淀，洗涤、干燥，粉碎即得银柴胡素HO. 47g，经 HPLC检测，纯度为95. 5%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。实施例3取银柴胡根10Kg，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，甲醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为3%，萃取压力25MPa，温度50°C，CO2流量2ml/g生药·π η，萃取时间 120min,得萃取物，加入到AB-8型大孔吸附树脂柱上吸附，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩、干燥，加到硅胶层析柱上，以甲醇-氯仿混合溶剂洗脱，该混合溶剂中甲醇与氯仿的比例为8:1，洗脱液按柱体积分份收集，合并第4-8份柱体积的洗脱液，浓缩，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分离沉淀，洗涤、干燥，粉碎即得银柴胡素HO. 43g，经 HPLC检测，纯度为98. 8%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。权利要求1.一种银柴胡素H的制备方法，其特征在于所述的方法由下列步骤组成取银柴胡根，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，甲醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为2-4%，萃取压力20-30MPa，温度40_60°C，CO2流量l_3ml/g生药· min，萃取时间 100-150min，得萃取物，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，40-60%乙醇洗脱，收集3_8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩、干燥，加到硅胶层析柱上，以甲醇-氯仿混合溶剂洗脱， 该混合溶剂中甲醇与氯仿的比例为8:1，洗脱液按柱体积分份收集，合并第4-8份柱体积的洗脱液，浓缩，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分离沉淀，洗涤、干燥，粉碎即得。2.根据权利要求1所述一种银柴胡素H的制备方法，其特征在于所述CO2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为3%。3.根据权利要求1所述一种银柴胡素H的制备方法，其特征在于所述CO2超临界萃取压力25MPa,温度50°C，CO2流量2ml/g生药· min。4.根据权利要求1所述一种银柴胡素H的制备方法，其特征在于所述CO2超临界萃取时间 120min。5.根据权利要求1所述一种银柴胡素H的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂选自DlOl型、D102型、AB-8型大孔吸附树脂中的一种。6.根据权利要求1所述一种银柴胡素H的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度为50%。7.根据权利要求1所述一种银柴胡素H的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂洗脱用乙醇的收集量为5倍量柱体积。全文摘要本专利技术涉及一种操作简便、污染小、能耗少的银柴胡素H的制备方法。工艺步骤为取银柴胡根，粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，甲醇作为夹带剂，得萃取物，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，40-60%乙醇洗脱，收集3-8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩、干燥，加到硅胶层析柱上，以甲醇-氯仿混合溶剂洗脱，收集洗脱液，浓缩，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分离沉淀，洗涤、干燥，粉碎即得。采用本专利技术制备银柴胡素H，产品纯度高，易于实现产业化放大。文档编号C07K本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种银柴胡素Ｈ的制备方法，其特征在于所述的方法由下列步骤组成：取银柴胡根，粉碎，加入到ＣＯ２超临界萃取器中，甲醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为２－４％，萃取压力２０－３０ＭＰａ，温度４０－６０℃，　ＣＯ２流量１－３ｍｌ／ｇ生药·ｍｉｎ，萃取时间１００－１５０ｍｉｎ，得萃取物，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，４０－６０％乙醇洗脱，收集３－８倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩、干燥，加到硅胶层析柱上，以甲醇－氯仿混合溶剂洗脱，该混合溶剂中甲醇与氯仿的比例为８：１，洗脱液按柱体积分份收集，合并第４－８份柱体积的洗脱液，浓缩，加入丙酮，冷藏，析出沉淀，分离沉淀，洗涤、干燥，粉碎即得。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王峰，王琳，张发成，
申请(专利权)人：苏州派腾生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：32