基于p16启动子的药物筛选方法技术

一种药物制备技术领域的基于p16启动子的药物筛选方法，所涉及的p16INK4a启动子-荧光素酶真核表达载体，其序列如Seq?ID?No.1所示，该序列全长3300bp，其中138～1478之间为p16INK4a启动子，1535～3187为荧光素酶阅读框，该真核表达载体可用于检测的化合物的抗癌活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及的是一种药物制备
的筛选方法及其制备和应用，具体是一种在骨肉瘤U20S细胞株中基于pl6INK4a(细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4抑制因子)启动子的荧光素酶(Iuciferase)抗肿瘤药物筛选方法及其构建方法与应用。
技术介绍
癌症是一群细胞偏离了正常的生长周期，这样的细胞其中就有很多的基因发生了改变。实验中选取在癌症发生时有重大变化并对癌症的发生有重大影响的抑癌基因 Pie1ffi4a0扩增启动子部分，并在其下游连接一个易于观察的信号蛋白基因一荧光素酶基因(Iuciferase)。瞬时转染U20S或其他癌细胞株24h后，加入一定浓度的化合物，通过检测荧光素酶活性变化判定该化合物对于P16启动子活性的影响，从而初步预测该化合物潜在的抗癌功能。真核细胞的分裂必须经过两个关键环节，G1/S期和G2/M期，CDK是细胞周期调节的中心，其成员的激活或磷酸化能够促进细胞周期中Gl — S和G2 — M的转变，已经发现有4种⑶K(⑶1(2 与Gl — S期的调节有关。⑶K4和D型周期蛋白形成的复合物能促进 Gl — S的转变，从而促进细胞的增生，并可能是肿瘤发生的主要因素本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种ｐ１６ＩＮＫ４ａ启动子－荧光素酶真核表达载体，其特征在于，其序列如Ｓｅｑ　ＩＤ　Ｎｏ．１所示，该序列全长３３００ｂｐ，其中１３８～１４７８之间为ｐ１６ＩＮＫ４ａ启动子，１５３５～３１８７为荧光素酶阅读框。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李大伟，蔺剑，武正华，施丽丹，金龙，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：31