NGAL质粒构建及其融合蛋白的表达制造技术

一种NGAL质粒构建及其融合蛋白的表达，其特征是(1)PCR扩增NGAL的cDNA；(2)PCR产物与载体pET28a连接，构建重组质粒pET28a-NGAL；(3)重组质粒pET28a-NGAL转化大肠杆菌Rosetta?DE3，IPTG诱导蛋白表达，得到NGAL融合蛋白。本发明专利技术通过PCR扩增、连接、转化与筛选，证实未加IPTG诱导前，没有融合蛋白的表达，IPTG诱导后3小时可获得高效表达NGAL融合蛋白，该蛋白质可用于筛选或抗NGAL蛋白质的抗体。表达的重组NGAL蛋白还可用于寻找有治疗价值的能抑制或激活NGAL功能的蛋白质分子。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
１．一种ＮＧＡＬ原核表达质粒的构建，其特征：（１）ＰＣＲ扩增ＮＧＡＬ的ｃＤＮＡ；（２）ＰＣＲ产物与载体ｐＥＴ２８ａ连接，构建重组质粒ｐＥＴ２８ａ－ＮＧＡＬ；（３）重组质粒ｐＥＴ２８ａ－ＮＧＡＬ转化大肠杆菌Ｒｏｓｅｔｔａ　ＤＥ３，ＩＰＴＧ诱导蛋白表达，得到ＮＧＡＬ融合蛋白。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王小中，熊火梅，黄波，肖芸，刘静，章海斌，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：36