从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法技术

本发明专利技术公开了一种从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法，属于食品加工的技术领域。其用于解决制备的血球或/和血浆短肽蛋白粉具有有效成分损失大，短肽和游离氨基酸含量底的问题。从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法包括以下步骤：(a)将动物血用离心机分离为血浆和红血球；(b)对红血球进行热变性处理；(c)超滤浓缩；(d)沉淀处理；(e)层析；(f)冷冻干燥。采用这种从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法，可广泛地应用于从动物血中提取高纯短肽蛋白粉。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种食品加工的
，尤其是涉及一种。
技术介绍
通常，蛋白粉的提取方法，它包括步骤将动物全血通过离心分离为血浆和血细胞；再用喷雾干燥法，使分离的动物血浆干燥成血浆蛋白粉末，其中喷雾干燥动物血浆时热风进入温度为160-220°C，出风温度为40-80°C。此外，对于分离的血细胞部分，也可喷雾干燥或造粒，得到动物血细胞蛋白粉。其不足之处是制备的血球或/和血浆短肽蛋白粉具有有效成分损失大，短肽和游离氨基酸含量底。
技术实现思路
本专利技术克服现有技术中的不足，提供了一种制备的血球或/和血浆短肽蛋白粉具有有效成分损失少，短肽和游离氨基酸含量高的。为了解决上述技术的问题，本专利技术是通过以下技术方案实现的，它包括以下步骤(a)将动物血用离心机分离为血浆和红血球； (b)对红血球进行热变性处理；(c)超滤浓缩；(d)沉淀处理；(e)层析；(f)冷冻干燥。本专利技术也可以通过以下技术方案实现以上所述的离心机为碟式分离机。本专利技术也可以通过以下技术方案实现以上所述的热变性处理为将收集的红细胞每100升加入3 5公斤氯化钠，30 50克氯化铜，蒸馏水90 110升搅勻，水浴加热到 68-70°C恒温25 35分钟，将反应液泵入冷却罐，搅拌机搅拌，迅速冷却至室温，搅拌1 3小时，甩干机甩干过滤去除变性血红蛋白，得滤液1 ；将滤液1在60 70°C恒温水浴下， 向滤液中慢慢加入30 50克氯化铜，至滤液清澈变为淡蓝色为止，保温15 25分钟，将反应液泵入冷却罐，搅拌机搅拌，迅速冷却至室温，搅拌1 3小时，甩干机甩干过滤去除变性血红蛋白，得滤液2。本专利技术也可以通过以下技术方案实现以上所述的超滤浓缩为将滤液2经布氏漏斗抽滤去除细微颗粒，经中空纤维超滤器超滤浓缩至总体积的1/20 3/20，收集浓缩液，中空纤维超滤器的截留分子量选为5 15千道尔顿。本专利技术也可以通过以下技术方案实现以上所述的沉淀处理为在浓缩液中，不断搅拌下缓慢加入预冷的0. 6 0. 8倍全体积的工业丙酮，3 5°C放置0. 5 1. 5小时， 产生大量絮状沉淀，3000 3500转/分冷冻离心25 35分钟，沉淀留用；将上清液回收再次不断搅拌下缓慢加入预冷的0. 5 0. 75倍全体积的工业丙酮，3. 5 4°C放置1 1. 5 小时，3000 3500转/分冷冻离心25 35分钟，将两次沉淀合并，加入少量去离子水，充分搅勻，装入透析袋透析11 13小时，3000 3500转/分冷冻离心25 35分钟，离心除去不溶性蛋白，得透析液。本专利技术也可以通过以下技术方案实现以上所述的层析为空纤维离子交换柱预先用2 32. 5毫摩尔/升的磷酸钾缓冲液酸碱度值7. 8平衡，透析液上在层析柱上，完毕后用同一缓冲液洗脱至280纳米下的吸收率低于0. 02，然后用2. 5 2002. 5毫摩尔/升的酸碱度7. 8磷酸缓冲液进行梯度洗脱，用部分收集器收集，在洗脱过程中，亦可通过肉眼观察收集淡蓝色蛋白粉区带，测定收集液中的酶活力符合酶纯化标准的收集管，混合其收集液。本专利技术还可以通过以下技术方案实现以上所述的冷冻干燥为收集液经去离子水透析11 13小时，冷冻干燥。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是解决了已有技术中血球细胞破壁率不高和产品中短肽和氨基态氮含量偏低的问题，同时保留了血液中的维生素、铁、钾和钙等微量元素，制备的血球或/和血浆短肽蛋白粉具有有效成分损失小，短肽和游离氨基酸含量丰富，易于消化吸收等特点。具体实施例方式下面结合具体实施方式对本专利技术作进一步详细描述，其主要制备工艺步骤为以动物血为原料制备食品级蛋白粉。主要内容包括建立相关的质量安全控制体系，实现真空采血和同步检疫，通过添加一定量理想抗凝剂，采用低温连续分离工艺技术，改进完善分离条件，提高血液的分离效果，实现猪血血浆和血球的连续分离；其主要制备工艺步骤为将动物血液用离心机分离为血浆和血球，血球经微波-酶双效破壁处理后，与血浆分别加水或混合后加水溶解，加入使蛋白质变性的变性剂，变性处理结束后加入生物酶制剂进行酶解，使血浆血球中的蛋白质酶解为短肽蛋白与氨基酸，经喷雾干燥即为制备的产品血浆或/和血球短肽蛋白粉。本技术解决了已有技术中血球细胞破壁率不高和产品中短肽和氨基态氮含量偏低的问题，同时保留了血液中的维生素、铁、钾和钙等微量元素，制备的血球或/和血浆短肽蛋白粉具有有效成分损失小，短肽和游离氨基酸含量丰富，易于消化吸收等特点，可用作食品添加剂。动物血分离方面，采用碟式分离机，建立了红细胞连续分离技术。与传统的离心机分离红细胞方法相比，不仅速度快(一小时处理量可达2吨血以上)，而且耗能低，提高了效率，大幅度降低了生产成本和劳动强度。在铜盐保护下将粗提液在68-70°C条件下加热30分钟，可得到杂蛋白含量少。该方法无须成本较高的氯仿和乙醇。使用的中性金属盐为氯化钠，成本低廉，且无毒无害，使用的过渡金属盐为氯化铜。二者的加入，增加了红细胞溶血液的离子强度，适当的离子强度可以使变性的血红蛋白沉淀，同时高盐浓度对蛋白粉有一定的保护作用，从而提高蛋白粉的得率和活力。采用的层析柱为二乙基胺乙基弱阴离子高流速琼脂糖凝胶阴离子交换层析。层析柱先用酸碱度值7. 8的2. 5毫摩尔/升的磷酸钾缓冲液平衡，然后上样。出于降低成本考虑，优选纤维素阴离子交换层析为可以重复使用且流速较快的纤维素快速流琼脂糖。动物血采集在肉联厂屠宰轨道的放血位置上进行，预先准备好无毒塑料或不锈钢制成的接血槽，大小应便于采血为准，一般为200厘米X 120厘米X 25厘米。抗凝剂选用 3. 8%的食品级柠檬酸钠，用量约为总血量的12.5% -16.7%。在规模化的屠宰场内，将失神后的动物用铁连锁住后肢并倒挂于滑道之上，通常采用真空抽血和同步检疫。避免了血4液的污染。加一些抗凝剂的整个过程中需要不断的搅拌，防止局部凝血。溶血采用低温连续分离工艺技术，提高血液的分离效果，实现动物血血浆和血球的连续分离，采用超滤浓缩技术对血清进行浓缩，使其固形物浓度增大1-2倍。铜盐存在下的热变性。热变性1 收集的红细胞每100升加入4公斤氯化钠，40克氯化铜，蒸馏水100升搅勻，水浴加热到68-70°C恒温30分钟，将反应液泵入冷却罐，搅拌机搅拌，迅速冷却至室温，搅拌2小时，甩干机甩干过滤去除变性血红蛋白，得滤液1。热变性2 将滤液1在65°C恒温水浴下，向滤液中慢慢加入40克氯化铜，至滤液清澈变为淡蓝色为止，保温20分钟，将反应液泵入冷却罐，搅拌机搅拌，迅速冷却至室温，搅拌2小时，甩干机甩干过滤去除变性血红蛋白，得滤液2。超滤浓缩将滤液2经布氏漏斗抽滤去除细微颗粒，经中空纤维超滤器超滤浓缩至总体积的5%，收集浓缩液。中空纤维超滤器的截留分子量选为10千道尔顿。丙酮沉淀在浓缩液中，不断搅拌下缓慢加入预冷的0. 75倍全体积的工业丙酮， 4°C放置1小时，产生大量絮状沉淀，3000转/分冷冻离心30分钟，沉淀留用；将上清液回收再次不断搅拌下缓慢加入预冷的0. 75倍全体积的工业丙酮，4°C放置1小时，3000转/分冷冻离心30分钟。将两次沉淀合并，加入少量去离子水，充分搅勻，装入透析袋透析12小时，3000转/分冷冻离心30分钟，离心除去不溶性蛋白，得透析液。二乙基胺乙基弱阴离子高本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种从动物血中提取高纯短肽蛋白粉的方法，其特征在于它包括以下步骤：（ａ）将动物血用离心机分离为血浆和红血球；（ｂ）对红血球进行热变性处理；（ｃ）超滤浓缩；（ｄ）沉淀处理；（ｅ）层析；（ｆ）冷冻干燥。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：景志刚，杨洋，
申请(专利权)人：景志刚，杨洋，
类型：发明
国别省市：13