一种肝靶向药物组合物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种肝靶向药物组合物，其特征在于采用具有肝靶向功能的蛋白和聚乙二醇同时修饰的脂质体装载抗肿瘤药物，将药物输送到肝组织的病灶区，以增加肝肿瘤部位的药物浓度，提高肝肿瘤的治疗效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种药物组合物，特别是一种可将药物输送到肝组织的病灶区从而实现定向给药的肝靶向药物组合物。本专利技术还涉及前述药物组合物的制备方法。
技术介绍
肝细胞癌(h印atocellular carcinoma,HCC)是一种常见的恶性肿瘤，在恶性肿瘤死亡率中居第三位。目前，手术切除是肝癌治疗的首选方案，常用于早期肝癌的治疗。但是肝癌手术往往存在切除不彻底、癌细胞易扩散和转移等问题。此时，手术切除已无法适用， 只能采用化疗等姑息性治疗的方法。化疗药物的治疗是无选择性的，其在杀死肿瘤细胞的同时，对正常细胞也存在很大毒性。因此，如何提高药物在肝脏肿瘤组织中的药物浓度，提高化疗药物对肝癌的治疗效果，同时降低药物对其他正常组织的毒副作用，是目前肝癌治疗中急需解决的重要问题。聚乙二醇(PEG)修饰的长循环脂质体(PEGylated liposome)作为一种新型的给药系统，已获得了美国食品药品监督管理局(FDA)的认证，并被广泛地应用于肿瘤治疗中。 这种给药系统与普通脂质体一样，采用安全、无毒、可生物降解的磷脂为主要材料而制得， 具有良好的生物相容性。PEG的修饰使药物在体内的循环时间延长，有效地避免了内皮网状系统的吞噬，同时，增加滞留和渗透作用，即Era效应，可使药物在肿瘤部位的蓄积量增大。目前，已上市的产品有阿霉素长循环脂质体(Doxil , Ortho Biotech, andCaelyx , Schering Plough)和柔红霉素长循环脂质体(DaunoXomeDiatos)。但是，长循环脂质体也存在一个重大的缺陷，即该给药系统只能通过Era效应被动靶向于肿瘤组织，却无法与肿瘤细胞发生特异性的结果。这使得长循环脂质体的抗肿瘤效果并不理想。而在长循环的基础上，将特定的抗体或配体连接到脂质体的表面，得到空间稳定主动靶向脂质体，即能识别相应的抗原或受体，提高脂质体对肿瘤部位的选择性，进一步提高药物对肝部肿瘤的治疗效果。因此，采用配体修饰的长循环脂质体已成为提高抗癌药物靶向性的重要手段。乳铁蛋白(lactoferrin，Lf)是一种存在于哺乳动物体内的阳离子糖蛋白，属于转铁蛋白家族。研究表明Lf是一种多功能蛋白，其可通过体内乳铁蛋白受体(LfR)的识别来参与各种生理功能的调节。由于血脑屏障中存在大量LfR，Lf已被成功的作为配体通过配体受体的结合运用到脑靶向给药系统中，以提高药物的脑靶向作用。但是，Lf作为肝脏的靶向配体作用尚未见报道。本申请的专利技术人通过细胞和动物实验发现并证实了 Lf作为肝靶向作用，是一种有效的肝靶向配体，可将其肝靶向性和长循环脂质体载体的给药特点相结合，设计一种新的具肝靶向性的药物组合物，提高对肝癌的治疗效果。基于上述背景，专利技术人设计了一种全新的药物组合物，采用具有肝靶向功能的蛋白和PEG同时修饰的脂质体装载化疗药物，以达到增加药物在肝脏肿瘤部位的浓度，提高肝肿瘤的治疗效果。一方面，PEG的修饰可增加药物在体内的循环时间，通过EI3R效应的被动靶向作用，增加药物在肿瘤部位的蓄积；另一方面，具有肝靶向功能的蛋白的修饰，可通3过配体-受体介导的主动靶向作用，提高肿瘤细胞对药物的摄取。综上所述，本专利技术通过被动靶向和主动转运实现对肝脏肿瘤组织的双靶向给药， 以增加肝脏肿瘤组织的药物浓度，提高肝部肿瘤的治疗效果。
技术实现思路
本专利技术涉及一种肝靶向长循环脂质体药物组合物，其组成为具有肝靶向功能的蛋白、聚乙二醇、脂质体以及至少一种抗肿瘤药物，各组分在组合物中所占比重为具有肝靶向功能的蛋白0.01% -10%，聚乙二醇0.01% -30%，脂质体40% -99. 88%，药物 0. 05-40% ο本专利技术将抗肿瘤化疗药物装载在脂质体中，同时采用聚乙二醇和有肝靶向功能的蛋白对脂质体表面进行修饰。所述抗肿瘤药物选自多柔吡星、阿柔比星、表柔比星、吡柔比星、丝裂霉素、紫杉醇、多西紫杉醇、顺钼、卡钼、喜树碱、羟基喜树碱、氟尿嘧啶、长春新碱、 长春碱、卡莫司汀。所述具有肝靶向功能蛋白为乳铁蛋白(Lf)及其类似物，乳铁蛋白的类似物是指乳铁蛋白肽。其中乳铁蛋白(Lf)包括牛乳铁蛋白、鼠乳铁蛋白、山羊乳铁蛋白、猪乳铁蛋白和人乳铁蛋白；乳铁蛋白的类似物包括牛乳铁蛋白肽、鼠乳铁蛋白肽、山羊乳铁蛋白肽、猪乳铁蛋白肽和人乳铁蛋白肽。其中优选为牛乳铁蛋白和人乳铁蛋白。本专利技术使用的聚乙二醇的分子量为200-5000，优选为2000-3000。本专利技术的药物组合物中蛋白的连接方法，包括将蛋白末端的氨基、羧基通过化学键合反应连接到PEG的末端，或将蛋白巯基化后通过化学键合反应连接到PEG的末端。本专利技术的药物组合物中所述的脂质体是指，以磷脂(PC)和胆固醇(CHOL)为材料所制成的脂质双分子层囊泡。磷脂包括氢化磷脂(HSPC)、大豆磷脂(SPC)、蛋黄卵磷脂 (EPC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、磷脂酰丝胺酸(PS)、磷脂酰肌醇(PI)之一种或一种以上。其中优选为SPC，EPC, DSPC，HSPC0本专利技术的药物组合物中所述的脂质体主要有磷脂和胆固醇组成，其中磷脂与胆固醇的质量比为1-1000 1，优选质量比为1-20 1。本专利技术的药物组合物可采用如下方法制备首先将磷脂(如DSPE)与PEG相连，形成PEG修饰的磷脂(DSPE-PEG)，再将 PEG末端活化为活性基团如二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺 (DSPE-PEG-NHS)或二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇_马来酰亚胺(DSPE-PEG-MAL)。再将磷脂、胆固醇作为制备脂质体的材料，置圆底烧瓶中，加入有机溶剂溶解，按脂质体的制备方法，制备普通脂质体。然后将PEG修饰的磷脂插入到制备好的脂质体中，形成长循环脂质体。最后将Lf或巯基化的Lf (即Lf-SH)与DSPE-PEG-NHS (或DSPE-PEG-MAL)反应，连接到脂质体的表面。用挤压过聚碳酸酯膜或超声的方法将脂质体的粒径控制在200nm或以下。抗癌药物可在制备前直接加入或者通过其他方法装载到已制备好的脂质体中。本专利技术的药物组合物最优选的制备方法在实施例中。本专利技术的组合物优点本专利技术的组合物用Lf与PEG同时修饰的脂质体作为载体，包载抗肿瘤药物，以进一步增加药物在肝脏，尤其是肝肿瘤部位的药物浓度，提高药物的治疗效果。本专利技术的组合物含PEG修饰的磷脂，PEG长循环的作用已被证明切实有效。本专利技术的组合物含乳铁蛋白，研究表明经尾静脉注射后，乳铁蛋白可被肝细胞表面大量的乳铁蛋白受体识别而富集于肝脏，当肝脏发生癌变时，乳铁蛋白受体显著性增加。 因此，乳铁蛋白的肝靶向作用已得到证实。本专利技术利用上述长循环靶向脂质体装载肿瘤药物，其中，PEG修饰可增加药物载体的体循环时间，通过EPR效应使药物被动靶向于肝部肿瘤部位。另外，乳铁蛋白的修饰可通过配体与靶细胞表面受体的识别功能，使药物载体主动靶向于肝脏。本专利技术的药物组合物制备方法工业生产可重现。首先，可按常规方法制备普通脂质体，抗肿瘤药物可按其性质不同采用不同的加入方法。随后，加入PEG修饰的磷脂，得长循环脂质体。再采用化学键合的方法，使乳铁本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种肝靶向药物组合物，其特征在于它由具有肝靶向功能的蛋白、聚乙二醇、脂质体以及至少一种抗肿瘤药物组成，各组分在组合物中所占比重为：具有肝靶向功能的蛋白０．０１％－１０％，聚乙二醇０．０１％－３０％，脂质体４０％－９９．８８％，药物０．０５－４０％。

【技术特征摘要】
1.一种肝靶向药物组合物，其特征在于它由具有肝靶向功能的蛋白、聚乙二醇、脂质体以及至少一种抗肿瘤药物组成，各组分在组合物中所占比重为具有肝靶向功能的蛋白 0. 01% -10%，聚乙二醇 0. 01% -30%，脂质体 40% -99. 88%，药物 0. 05-40%。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于具有肝靶向功能的蛋白为乳铁蛋白或其类似物；聚乙二醇的分子量为2000-3000 ；脂质体是以磷脂和胆固醇为材料制成的脂质双分子层囊泡，磷脂与胆固醇的质量比为1-1000 1。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于乳铁蛋白选自牛乳铁蛋白、鼠乳铁蛋白、山羊乳铁蛋白、猪乳铁蛋白、人乳铁蛋白；乳铁蛋白的类似物选自牛乳铁蛋白肽、鼠乳铁蛋白肽、山羊乳铁蛋白肽、猪乳铁蛋白肽、人乳铁蛋白肽。4.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于聚乙二醇的分子量为200-5000。5.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于磷脂与胆固醇的质量比为1-20 1。6.根据权利要求2或5所述的组合物，其特征在于所述磷脂选自氢化磷脂、大豆磷脂、蛋黄卵磷脂、磷脂...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐月红，韦敏燕，邹奇，吴传斌，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：81