促口腔额面部多种创伤修复的复合生长因子的胶原蛋白缓释载体材料及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种促口腔额面部多种创伤修复的复合生长因子的胶原蛋白缓释载体材料及其制备方法。为了克服现阶段口腔及面部多种组织创伤药物效果差的缺点，本发明专利技术用脂质体、壳聚糖、糖胺多糖等改性的胶原蛋白组成生物活性胶原蛋白缓释材料，结合碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血小板衍生生长因子（PDGF-BB）、血管内皮生长因子（VEGF）、角质化细胞生长因子（KGF）中的一种或几种研制而成，其特征在于：所述的每克生物活性缓释材料中含有不少于10ng的生长因子，对治疗拔牙创、口腔溃疡、面神经损伤以及下颌骨缺损等面部多种组织创伤有十分显著的疗效。本发明专利技术以长时间持续投用生长因子有效量释放到伤口部位，充分发挥生长因子的诱导作用，可明显缩短伤口愈合的时间，达到治疗目的。

Sustained release collagen carrier material of compound growth factor promoting oral and frontal and facial multiple trauma repair and preparation method thereof

The invention discloses a collagen sustained release carrier material with compound growth factors for promoting the repair of various wounds in the frontal surface of the oral cavity and a preparation method thereof. In order to overcome the present oral and facial tissues trauma drug effect is poor, the invention uses liposomes, chitosan, glycosaminoglycan modified collagen bioactive collagen sustained-release material, combined with basic fibroblast growth factor (bFGF), platelet derived growth factor (PDGF-BB) and vascular endothelial growth factor (VEGF), keratinocyte growth factor (KGF) of one or several kinds of form, which is characterized by containing a growth factor of not less than 10NG per gram for the biological activity of the sustained-release material, has significant curative effect on the treatment of tooth extraction, dental ulcer, facial nerve injury and mandibular defect such a variety of facial tissue trauma. The invention can release the effective amount of the growth factor into the wound site for a long time and give full play to the inducing effect of the growth factor, so that the time of wound healing can be shortened obviously, and the therapeutic purpose can be achieved.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及促进口腔额面部多种创伤修复，特别是促进拔牙创口、口腔溃疡、面神 经损伤、颂骨缺损等创伤修复的促口腔额面部多种创伤修复的复合生长因子的胶原蛋白缓 释载体材料及其制备方法。
技术介绍
口腔颂面部位置暴露，平时不易防护。当人或动物口腔颂面部遭受各种外科手术 以及交通事故带来的各种物理伤害时，常常造成神经组织、牙齿、黏膜上皮组织、软组织及 骨组织的破坏和缺损，并可造成出血和感染的机会。在正常的情况下，伤口可自然愈合并修 复。伤口自然愈合和修复过程包括第一阶段，止血，即具有粘性的血小板附着在胶原蛋白 上，以在破裂的血管上形成血栓。第二阶段，炎性反应，即血管和细胞应对致伤进行炎症反 应。通过血管舒张，白细胞进入抵抗感染而导致血流减少。第三阶段，再生，即身体通过生 成肉芽(红色粒状带血管组织)，代替伤口内的疤痕和碎片开始进行自我修复。这个阶段 完成后就有上皮生成，然后伤口最终闭合。第四阶段，组织重构，即伤口内胶原蛋白的含量 不断增加，使伤口强度也不断增加。最终生成疤痕组织，它相对正常皮肤较弱，弹性要差很 多。在大多数情况下，自然愈合过程是有效的。但由于组织发生学上的原因，某些组织，特别 是骨组织和外周神经组织，则很难愈合。而口腔溃疡、拔牙创口的产生则给人们带来痛苦， 严重影响人们的生活质量。另外，有些伤口往往因为病人身体素质、严重程度及并发感染等 因素的影响，特别是存在于口腔颂面部的伤口，若不及时治疗，则易产生疤痕，影响美观，探 寻一种有效的途径和药物治疗创伤显得至关重要，所以大多数情况下的口腔颂面部伤口愈 合需要医疗干预。例如，拔牙创口产生后的填充、止血，促愈合；口腔溃疡需创面贴膜；颂骨 缺损填充和修复。另外涉及外周神经组织的损伤如面神经等如果不投用某些促神经组织修 复的药物则很难恢复，导致表情肌僵硬，难以收缩或舒张。促进伤口愈合和组织修复的一 种方法是在局部用包括各种生长因子在内的伤口愈合促进剂。国内外大量的研究已表明 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)能促进多种细胞增殖、促使微血管的生长和分化，使局部 毛细血管的数目增加。最近的研究还表明bFGF可刺激培养的骨细胞的DNA合成和增殖， 从而增加骨细胞合成胶原和非胶原蛋白的能力，有利于骨质的生长；血小板衍生生长因子 (PDGF-BB)在口腔粘膜下纤维化(OSF)的病理生理过程中可能起重要作用；血管内皮生长 因子(VEGF)不仅在正常口腔粘膜及慢性炎症组织中的表达及血管生成在机体出生前后的 生理及病理过程中至关重要，还能加速创伤性骨的修复及伤口的愈合；角质化细胞生长因 子(KGF)具有抑制上皮细胞凋亡、特异性刺激上皮细胞的增殖的生物学作用；神经细胞生 长因子(NGF)则能有效促进神经损伤的修复。这些都为治愈口腔颂面部创伤提供充分的依 据。它们对于口腔及颂面部各种组织创伤的修复具有协同作用。加入这些愈合促进剂，能 有效地刺激口腔黏膜细胞增殖、下颂骨缺损的愈合、拔牙创口的修复、面神经损伤的恢复。然而，这些生长因子最大的缺点在于不能保证药物在伤口部位以有效量长时间缓慢释放并发挥作用，而且单纯使用生长因子也往往不能真正有效地促进整个损伤组织的全 面修复，其主要原因是生长因子作为蛋白药物，具有稳定性差、全身用药体内半衰期短、全 身用药后局部浓度低、容易被体液降解等缺点。某些具有良好组织修复活性的药物，例如生 长因子，如果不借助适当的局部投药物载体，使药物从固体或半固体载体材料中长时间持 续投用的有效量释放到伤口部位，则将不能发挥其治疗价值。因此，研究此种药物具有广泛 的临床意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于为克服现有技术的不足而提供一种能快速促口腔颂面部损伤 的修复，特别是对于拔牙创口、口腔溃疡、面神经等的外周神经损伤、颂骨缺损的促口腔额 面部多种创伤修复的复合生长因子的胶原蛋白缓释载体材料。为实现上述目的，本专利技术公开了一种促口腔额面部多种创伤修复的复合生长因子 的胶原缓释载体材料，包括主要用壳聚糖、脂质体、糖胺多糖等改性的胶原蛋白组成的缓释 载体材料，其特征在于所述的每克生物活性缓释载体材料中含有不少于IOng的生长因 子。其中的糖胺多糖为透明质酸、6-硫酸软骨素、4-硫酸软骨素、硫酸皮肤素、肝素、硫酸肝 素的一种或多种；生长因子为碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子、血管内皮生 长因子、角质化细胞生长因子中的一种或几种。本专利技术提供的复合生长因子胶原蛋白缓释载体是一类多孔载体胶原膜，其上附着 的生长因子植入创伤组织后可以缓慢释放，有利于多种组织生长，具有稳定性高、全身用药 体内半衰期较长、全身用药后局部浓度高等优点。它还能够充分吸收伤口渗出液，起到良好 的引流作用，同时由于口腔创面湿润，具有自溶作用，其愈合可以简化清创术，促进伤口的 洁净、湿润环境有利于口腔创面愈合。表现在(1) 口腔溃疡导致的炎症扩散消退；(2)伤 口疼痛减轻；(3)拔牙创口的止血；(4)形成封闭的局部缺氧微环境，破坏细菌的生存条件， 使细菌生长减少病原体消失；(6)利于局部生长因子的释放。此外，复合生长因子的胶原蛋 白缓释载体用于创伤局部释放生长因子来促进软组织愈合的同时，还可以加快受创神经的 修复，提高受损神经的预后；本专利技术还使骨痂和新骨体积增加，成骨细胞数量和活性增加， 骨的机械强度也有所提高，整个过程按骨愈合的正常顺序进行。本专利技术的另一个目的是提供制备上述生物活性胶原蛋白缓释载体材料的制备方法。为达到上述目的，本专利技术提供了一种促口腔额面部多种创伤修复的复合生长因子 胶原缓释载体材料的制备方法，其特征在于所述制备方法包括如下步骤(1)从动物的皮肤、软骨、肌腱等含有丰富胶原蛋白的组织中提取出胶原蛋白，并制备 成一定粘度的溶液；(2)配制交联剂水溶液，与上述胶原溶液混合使充分交联，交联剂占混合溶液重量的 5%-10% ；(3)配制一定浓度的脂质体、壳聚糖、糖胺多糖水溶液，脂质体或壳聚糖质量为胶原蛋 白量的10%-70%，糖胺多糖为胶原蛋白量的5%-10% (均为质量分数)；(4)取生长因子按每克胶原蛋白缓释载体中不少于IOng的生长因子配制成水溶液与 步骤(3)所得脂质体、壳聚糖或糖胺多糖溶液混合制成生长因子溶液；(5)在温和的搅拌条件下，将步骤(4)所得的混合溶液加入到步骤(2)所得的溶液中；(6)将步骤(5)所得的混合液分装在模具内冷冻干燥；(7)无菌封装在医用包装袋内；(8)用20-40KGy的伽马射线照射灭菌。促口腔额面部多种创伤修复的复合生长因子胶原缓释载体材料的另一个制备方 法，其特征在于所述的制备方法包括(1)从动物的皮肤、软骨、肌腱等含有丰富胶原蛋白的组织中提取出胶原蛋白，并制备 成一定粘度的溶液；(2)将制得的胶原溶液冷冻干燥，然后将干燥产物在pH5.4的0. 05M的2N-吗啡啉-乙 磺酸溶液中用1-乙基-3-3- 二甲基氨基丙基-碳化二亚氨/NHS交联，交联后用0. IM的 Na2HPO4溶液冲洗，然后用软化水洗；(3)将步骤(2)所得交联后的胶原蛋白海绵再次浸润到pH5.6的0. 05M的2N-吗啡 啉-乙磺酸溶液中，然后在2N-吗啡啉-乙磺酸溶液中使交联的胶原蛋白载体与用1-乙 基-3-3- 二甲基氨基丙基-碳化二亚氨/NHS活化的肝素溶液反应本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．促口腔额面部多种创伤修复的复合生长因子的胶原缓释载体材料，包括主要用壳聚糖、脂质体、糖胺多糖等改性的胶原蛋白组成的缓释载体材料，其特征在于：所述的每克生物活性缓释载体材料中含有不少于１０ｎｇ的生长因子。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：项丽君，金雷钢，钱媛媛，李校堃，黄志锋，王彦亮，
申请(专利权)人：温州医学院，
类型：发明
国别省市：33