天南星提取物及其用于创伤‑愈合作用的用途制造技术

本发明专利技术提供天南星的水和醇提取物、从天南星分离的化合物(比如3‑O‑(9,12‑十八碳二烯酰基)‑甘油基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、N‑(β‑D‑呋喃核糖‑1‑基)‑苯丙氨酸、和腺苷)、包含前述成分的药物组合物、以及其用于促进创伤愈合的用途。在一个实施方案中，所述药物组合物为局部剂型，比如乳膏剂、软膏剂、泡沫剂、洗剂、硬膏剂、凝胶剂和乳剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】天南星提取物及其用于创伤-愈合作用的用途相关专利申请的交叉引用本申请要求2011年10月18日提交的美国临时申请系列号No.61/627,772的优先权，将其全部内容通过引用并入本文。
技术介绍
天南星(Rhizomaarisaematis，RA)是一种天南星科的多年生草本植物，原产自北美洲和亚洲。在中医学(TCM)中，RA被认为具有苦、辛和温的特性，常用于治疗各种病症，包括咳嗽、肌肉痉挛和癫痫。创伤愈合是一种复杂的过程，涉及炎症、细胞增殖、组织肉芽形成、上皮再生和组织再生，并且其由角质形成细胞、成纤维细胞、内皮细胞和免疫细胞介导。创伤修复开始于损伤部位的血流增加和血管通透性增加。血液组分渗入创伤中，形成由血小板和细胞外基质(ECM)组成的止血栓子。中性粒细胞还作出非特异性但高度有效的破坏性吞噬应答。新到达的单核细胞和淋巴细胞也介导抗原-特异性免疫应答，其释放额外的促炎细胞因子。内皮细胞在创伤愈合过程中炎症性应答的初始阶段期间也被活化。除此之外，内皮细胞还表达将循环白细胞附着于炎症细胞的粘附分子。免疫细胞的细胞附着于炎症部位周围内皮细胞衬里的血管，防止免疫细胞扫过(sweptpast)组织损伤部位；这是免疫细胞随后迁移到周围炎症组织中的一个关键步骤。内皮细胞也降解现有的血管基底膜，并引发成纤维细胞在创伤区域中的迁移和增殖。增殖的成纤维细胞沿着纤维蛋白凝块迁移到创伤床，并引发称为基质的细胞外基质的形成。一旦基质产生，成纤维细胞产生胶原蛋白、蛋白多糖、纤连蛋白和葡糖胺聚糖，导致在创伤床周围形成新的细胞外基质；新形成的细胞外基质对于其它细胞的迁移是有用的。与此同时，创伤愈合过程期间形成的肉芽组织覆盖创伤床。另外，角质形成细胞从创伤边缘迁移和增殖，接着成纤维细胞在创伤近端增殖。胶原纤维在表面上再生，包含在肌成纤维细胞中的肌动蛋白将创伤边缘拉近，从而减小了创伤的尺寸。在创伤愈合期间，角质形成细胞、成纤维细胞和内皮细胞彼此相互依赖地起作用。角质形成细胞迁移和增殖在表皮细胞再生中很重要，表皮细胞再生得到细胞外基质形成的促进。新细胞外基质的合成也由成纤维细胞的增殖所介导，成纤维细胞的增殖促进角质形成细胞的增殖。内皮细胞参与血管生成，其对于向增殖的角质形成细胞和成纤维细胞提供细胞因子、氧和营养物是关键的。内皮细胞也在整个创伤愈合过程中提供免疫保护。促进内皮细胞、角质形成细胞和/或成纤维细胞的迁移和/或增殖的治疗剂可用于促进创伤愈合，包括急性和慢性创伤(例如，糖尿病性创伤)的愈合。目前，(贝卡普明)，一种重组人血小板衍生生长因子-BB(rhPDGF-BB)，是FDA批准用于治疗慢性创伤(特别是糖尿病性足部溃疡)的唯一生长因子。需要开发用于创伤愈合的另外的治疗剂。
技术实现思路
在多个实施方案中，本专利技术提供天南星(RA)的水和醇提取物、天南星醇提取物的水溶性部位、从天南星分离的化合物(比如，3-O-(9,12-十八碳二烯酰基)-甘油基-β-D-吡喃半乳糖苷、N-(β-D-呋喃核糖-1-基)-苯丙氨酸、和腺苷)，包含前述成分的药物组合物、以及其用于促进创伤愈合的用途。在某些实施方案中，药物组合物为局部剂型，比如乳膏剂、软膏剂、泡沫剂、洗剂、硬膏剂、凝胶或乳剂。在一个特定实施方案中，本专利技术提供一种用于促进受试者中创伤愈合的方法，其中所述方法包括向受试者的创伤区域局部施用治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含天南星的水溶性提取物和/或一种或多种从天南星分离的化合物或其盐，其中所述方法促进创伤闭合和/或愈合。在另一个实施方案中，本专利技术提供可以从天南星分离的新化合物N-(β-D-呋喃核糖-1-基)-苯丙氨酸。在某些实施方案中，本专利技术的天南星提取物和/或从RA分离的化合物可用于促进创伤愈合，包括皮肤创伤、切除伤、撕裂伤、烧伤、擦伤、刺伤或贯通伤、外科创伤、挫伤、血肿、挤压伤和溃疡，比如糖尿病足部溃疡。附图简要说明图1A表示天南星(RA)的水提取物在体外闭合成年人角质形成细胞的擦伤创伤。图1B表示治疗后创伤床宽度的定量分析。图2表示RA的粗提取物(T)和水提取部位(WA)诱导人成年成纤维细胞中I型胶原蛋白的产生。图3表示RA的粗提取物(T)和水提取部位(WA)不会引起人新生角质形成细胞的细胞死亡。图4表示如通过MTT(3-[4,5-二甲基噻唑-2-基]-2,5-二苯基四唑鎓溴化物)代谢活性表明的天南星的WA部位的增殖作用。图5表示RA的水提取部位的亚部分(sub-fraction)RA-WA1和RA-WA2闭合成年人角质形成细胞的体外擦伤创伤。图6A表示在第2天WA部位和RA-WA1对创伤闭合的作用。图6B表示在4和40mg/kg的RA-WA1的剂量下，为期8天的创伤闭合的作用。图6C表示40mg/kg的RA-WA1或水的创伤愈合作用。分别用RA-WA1和水局部处理小鼠的一个创伤，而其它创伤保持未处理。在第8天采集图像。图7表示RA-WA部位和分离的化合物的HPLC图谱。在254nm下检测UV吸光度。图8A表示化合物G192-C07的分离流程图。图8B表示从天南星分离的3-O-(9,12-十八碳二烯酰基)-甘油基-β-D-吡喃半乳糖苷(化合物G192-C07)在体外闭合成年人角质形成细胞的擦伤创伤。专利技术详述在多个实施方案中，本专利技术提供天南星(RA)的水和醇提取物、天南星醇提取物的水溶性部位、从天南星分离的化合物(比如，3-O-(9,12-十八碳二烯酰基)-甘油基-β-D-吡喃半乳糖苷、N-(β-D-呋喃核糖-1-基)-苯丙氨酸、和腺苷)、包含前述成分的药物组合物、以及其用于促进创伤愈合的用途。在某些实施方案中，药物组合物为局部剂型，比如乳膏剂、软膏剂、泡沫剂、洗剂、硬膏剂、凝胶或乳剂。天南星的种类包括一把伞南星(Arisaemaerubescens)、异叶天南星(Arisaemaheterophyllum)和东北天南星(Arisaemaamurense)。在一个实施方案中，本专利技术提供东北天南星提取物和从东北天南星分离的生物活性化学成分(比如，3-O-(9,12-十八碳二烯酰基)-甘油基-β-D-吡喃半乳糖苷、N-(β-D-呋喃核糖-1-基)-苯丙氨酸、和腺苷)，及其用于促进创伤愈合的用途。在某些实施方案中，本专利技术提供一把伞天南星和/或异叶天南星的提取物和由其分离的生物活性化学成分(比如3-O-(9,12-十八碳二烯酰基)-甘油基-β-D-吡喃半乳糖苷、N-(β-D-呋喃核糖-1-基)-苯丙氨酸、和腺苷)，及其用于促进创伤愈合的用途。在一个实施方案中，天南星提取物和/或从RA分离的化合物可用于促进角质形成细胞的增殖和/或迁移、和/或成纤维细胞生成胶原蛋白。在某些实施方案中，本专利技术的天南星提取物和/或从RA分离的化合物可用于促进创伤愈合，包括皮肤创伤、切除伤、撕裂伤、烧伤、擦伤、刺伤或贯通伤、外科创伤、挫伤、血肿、挤压伤和溃疡，比如糖尿病足部溃疡。化合物在一个实施方案中，本专利技术提供N-(β-D-呋喃核糖-1-基)-苯丙氨酸或其盐。N-(β-D-呋喃核糖-1-基)-苯丙氨酸化合物具有下列结构：在另一个实施方案中，本专利技术涉及3-O-(9,12-十八碳二烯酰基)-甘油基-β-D-吡喃半乳糖苷和腺苷、及其盐。在一个特定的实施方案中，本专利技术涉及本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于促进受试者中创伤愈合的方法，包括向所述受试者施用治疗有效量的组合物，该组合物包含水溶性天南星（Rhizoma arisaematis）提取物和/或一种或多种选自由3‑O‑(9,12‑十八碳二烯酰基)‑甘油基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、N‑(β‑D‑呋喃核糖‑1‑基)‑苯丙氨酸、腺苷、及其任意盐组成的组中的分离的化合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.10.18 US 61/627,7721.治疗有效量的组合物在制备用于促进受试者中创伤愈合的药物中的应用，其中所述组合物包含水溶性天南星(Rhizomaarisaematis)提取物和/或一种或多种选自由分离得到的3-O-(9,12-十八碳二烯酰基)-甘油基-β-D-吡喃半乳糖苷、N-(β-D-呋喃核糖-1-基)-苯丙氨酸及其任意盐组成的组中的化合物。2.根据权利要求1的应用，其中所述组合物包含天南星根的水溶性提取物。3.根据权利要求1的应用，其中所述组合物包含一种或多种选自由分离得到的3-O-(9,12-十八碳二烯酰基)-甘油基-β-D-吡喃半乳糖苷、N-(β-D-呋喃核糖-1-基)-苯丙氨酸及其任意盐组成的组中的化合物。4.根据权利要求3的应用，其中所述组合物包含分离的化合物3-O-(9,12-十八碳二烯酰基)-甘油基-β-D-吡喃半乳糖苷或其盐，和分离的化合物腺苷或其盐。5.根据权利要求1的应用，其中所述组合物局部施用至创伤区域。6.根据权利要求1的应用，其中所述受试者具有皮肤创伤、切除伤、撕裂伤、烧伤、擦伤、贯通伤、挤压伤或溃疡。7.根据权利要求6的应用，其中所述受试者患有糖尿病性溃疡。8.根据权利要求5的应用，其中所述组合物配制成创伤敷料、乳膏剂、泡沫剂、洗剂、硬膏剂、凝胶剂、乳剂或皮肤贴剂。9.根据权利要求1的应用，其中所述受试者具有外科创伤。10.根据权利要求5的应用，其中所述组合物配制成软膏剂。11.根据权利要求5的应用，其中所述组合物配制成水凝胶。12.治疗有效量的包含于溶剂中的天...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶玉如，叶翠芬，郭圣君，伍儒邦，
申请(专利权)人：香港科技大学，
类型：发明
国别省市：中国香港;81