用于骨骼再生的胶原凝胶组合物的制备方法技术

本文公开了用于骨骼再生的胶原凝胶组合物的制备方法，该方法包括从动物组织收集骨髓并从所述骨髓分离有核细胞；以及将该有核细胞和由Ｉ型胶原和磷灰石组成的生物基质混合。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及。更具体地，本专利技术能够 通过将骨髓衍生有核细胞和胶原基的基质组合物共注射到受试者的骨骼缺陷病变处，赋予 骨传导性(osteoconductivity)、骨发生性(osteogenicity)和成骨细胞分化诱导能力，从 而促进骨发生。进一步地，本专利技术能够通过用于医药应用的使用基质组合物的过程和质量 控制确保产品的高质量。此外，本专利技术使得产品能够批量生产，使得产品能够单独使用或如 果需要，与患者的骨髓衍生有核细胞组合使用，且与常规细胞治疗试剂相比，使得产品能够 在短时期内方便且经济地应用于患者。因此，本专利技术显著实现了产品质量和可靠性的改进，由此可极大提高用户满意度。
技术介绍
本专利技术是对本申请人提交的名称为“用于骨骼再生的骨发生促进细胞组合物及其 制备方法”的韩国专利申请No. 2006-0091325 (专利注册No. 0834718)的改进。众所周知，骨质疏松是造成骨质量和密度的逐渐丧失并由此伴随着对在骨骼内形 成大量小孔，就类似于在粗糙的浮石或海绵中所见的那样，而导致的骨折的高度敏感性的 医学病状。即，骨质疏松是一种进行性的骨丧失疾病，其与正常骨骼相比，涉及许多小洞或 小孔的形成，骨质量的降低，骨微结构的变薄变弱，从而引起骨骼变脆并即使仅受轻微撞击 也易于折断。因为骨质疏松是默默进行地无疼痛感或症状，人们不能感知到他们患上骨质 疏松直至突然摔倒或被撞击并转而易于骨折。即使轻微摔倒，骨质疏松的人也可能会腕关 节骨折，盆骨骨折和脊椎骨折，并伴随剧烈疼痛。特别地，盆骨骨折和脊椎骨折剧烈疼痛并 需要外科手术，并且患者必须忍受甚至长达数月的卧病在床的痛苦。甚至手术完全康复之 后，由于手术后遗症或者骨质疏松并发症，仍会留下身体缺陷。骨骼不断地经历着分解和置换过程。即，在所有骨骼中不断发生结构重塑。在骨 骼结构重塑期间，破骨细胞破坏和吸收老的骨骼，而成骨细胞形成新骨骼。如果由于骨骼组 织的动态失衡，骨骼吸收超过骨骼再生，这可能导致骨质疏松的发生。已知骨质疏松的发病 率与各种危险因子的组合有关系，例如女性性别，瘦和/或小的身体骨架，年龄的增大，骨 质疏松的家族病史，绝经(包括子宫切除)，月经不调(闭经)，神经衰弱，肾上腺皮质激素 或抗惊厥药物的使用，男性的高雄性素血症(hypoandrogenemia)，锻炼不足，吸烟，酗酒，亚 洲和高加索人(非洲和西班牙裔美洲人风险较低)，早期绝经(45岁之前)，咖啡因和酒精 消费过度，和低钙饮食。亚洲人骨质疏松的发病率高于美洲人。据估计超过28，990，000的美洲人受骨 质疏松的影响(受此影响的80%是女性)。在美国，一千万人已经患有骨质疏松。多于 一千八百万人骨质量低，使他们处于骨质疏松的高风险中。在50岁以上的美洲高加索人中 有1/2的女性和1/8的男性在其一生中将经历与骨质疏松相关的骨折。1/10的50岁以上 的非洲裔美洲人患有骨质疏松；还有额外1/3的人骨密度低，处于发生骨质疏松的风险中。 骨质疏松每年造成了多于一百五十万的骨折，包括300，000髋骨骨折，700，000脊椎骨折，250，000腕关节骨折和300, 000其他部位的骨折。在美国，每年发生12，000, 000例骨折， 其中147，000-250，000例是髋骨骨折，80%是由轻微创伤引起的。到80岁时，约40%的女 性会经历至少一次脊椎骨折。三分之一女性和六分之一男性在80岁之后会经历髋骨骨折。 25-50%髋骨骨折患者甚至在髋骨修复手术之后没有其他人协助就不能走路，并且已知这 种骨折与死亡率相关。在各种用于治疗骨质疏松的开发的治疗方法中，常规确立的骨质疏松疗法，例如 通过使用双磷酸盐或选择性雌激素受体调节剂(SERMs)，首先关注于抑制骨吸收，并且已知 是通过预防骨质量的进一步丧失抑制骨质疏松的发展。此外，通过使用骨移植术或自体成 骨细胞基治疗剂，在由各种因素包括骨质疏松引起的局部骨折中或在要求骨骼再生的目标 病变处实现骨愈合或骨骼再生。但是，常规治疗方法通过抑制破骨细胞活性预防骨吸收拦阻了骨质疏松的进一步 发展，却因此遭遇了与无法实质促进骨再生相关的问题。进一步地，使用上述骨移植技术或 自体成骨细胞基治疗剂不利的是难以实现大面积的生物骨骼再生。尽管为了克服经典骨移植技术遭遇的骨骼再生的不利已经推动了细胞治疗剂的 发展，但难以实现贴壁细胞的系统应用或贴壁细胞通过血液流动的治疗。这是因为不可能 通过血液流动执行细胞注射，因为如果贴壁细胞未附着在适当基底上他们可能会死亡。纵观常规方案的更多细节，为了局部应用使用同种异体骨移植，自体骨移植或自 体成骨细胞基治疗剂的移植的治疗方法已经用于局部病变处发生的骨骼缺陷或骨骼坏死， 或使用骨吸收抑制剂例如双磷酸盐等的治疗方法已经用于在大范围病变处发生的骨骼缺 陷，例如骨质疏松。同种异体骨移植仍遭遇问题，例如传播疾病的可能性，植入材料的供应 不足，非期望免疫反应例如移植排斥的发生，和进入受试者自体组织中的植入物难以完全 再生。同时，自体骨移植解决了或缓解了同种异体骨移植技术所遭遇的这些问题，但是也 有不利，例如难于为骨移植提供骨骼保证足够的供体部位，难于保证供体部位的发病率等。 利用自体成骨细胞的细胞治疗剂是为了解决常规骨骼移植技术的问题和不利而开发的一 种治疗方法，被认为是能够通过从骨髓分离的骨原细胞的大量增殖，使骨原细胞分化成成 骨细胞以及将成骨细胞移植至需要进行骨骼再生的目标部位，实现局部骨骼再生的一种技 术。但是，所有上述常规技术仅可用于局部骨骼再生并简单地用于填充骨骼空的空间，且仍 遭遇难以治疗广泛分布在全身的骨骼缺陷的不利，例如由于骨质疏松的系统骨骼缺陷和由 于骨骼坏死的大面积骨骼缺陷。进一步地，用于治疗骨质疏松的骨吸收抑制剂不具有促进 骨骼再生的能力，并由此在骨质疏松引起的大面积骨骼损伤的治疗上遭遇许多限制。为了克服常规疗法的上述问题和不利，本申请人提交的韩国专利No. 0834718公 开了一种用于骨骼再生的骨发生促进细胞组合物。但是，本申请人的上述常规技术仍遭遇了细胞培养期长的突出问题。更具体地，使用同种异体移植，自体移植或局部自体成骨细胞基治疗剂的移植的 治疗方法已经用于治疗局部骨骼缺陷或坏死。但是，如上文所讨论的，同种异体移植技术遭 遇了问题，例如传播疾病的风险，植入物的供应不足，可能的免疫反应，和进入自体组织中 植入物难以完全再生。同时，自体移植技术解决或减缓了同种异体移植所遭受的这些问题， 但仍存在不利，例如难以保证供体部位，供体部位可能的病理集(pathological episodes) 等。自体成骨细胞基的细胞治疗剂是为了解决这些骨移植技术的问题而开发的一种治疗方法，它被认为是能够通过从骨髓分离的骨原细胞的大量培养，使骨原细胞分化成成骨细胞 并将分化的成骨细胞移植到需要进行骨骼再生的目标病变处，实现局部骨骼再生的一种技 术。但是，自体细胞基的治疗方法有利于患者特异性治疗，但显示出许多短处，例如昂贵，复 杂的过程和大于一个月生产治疗产品的长时期，并因此难以在诊断患者骨骼缺陷或骨折的 现场立即使用产品。为了克服通过常规骨骼移植技术进行骨骼再生的不利，加速了细胞基治疗药物的 发展，但生产这种治疗药物要花大于一个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于骨骼再生的胶原凝胶组合物的制备方法，该方法包括：从动物组织收集骨髓并从所述骨髓分离有核细胞；以及将所述有核细胞与由Ⅰ型胶原和磷灰石组成的生物基质混合。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：张在德，金勋，柳志喆，吕世根，金泰亨，朴炫信，金善爱，金壮勋，金成洙，
申请(专利权)人：世元世龙技术株式会社，
类型：发明
国别省市：KR