用于感染或炎症病灶位点造影的标记趋化肽制造技术

一种检测个体中感染或炎症位点的方法，其包括： ａ．给予该个体诊断有效量的可检测标记的趋化肽Ｘ－Ｙ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ－［Ｚ］↓［ｎ］－Ｗ 其中： Ｘ为氨基保护基， Ｙ为氨基酸残基， Ｚ为间隔序列， ｎ为０或１，和 Ｗ为下式结构的标记或连接取代基 －［Ｋ］↓［ｖ］－Ｍ↑［１］ 其中： Ｋ为中间功能团， ｖ为０或１， Ｍ↑［１］是诊断学上可检测的标记；及 其中趋化肽在感染或炎症位点显著积累，而在无感染或炎症的位点不显著积累；和 ｂ．检测该趋化肽。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及趋化肽和它们在检测个体中感染和炎症位点及治疗组织损伤中的应用。相关技术的描述对各种形式的组织损伤应答而发生炎症。这种组织损伤可以是由微生物侵入、自身免疫过程、组织或器官同种移植排斥、或诸如热、冷、放射能量、电或化学刺激、或机械创伤的伤害性外部影响造成的。无论其原因和躯体位点，随后的炎症反应是很相似的，由一系列复杂的功能和细胞调节组成，包括微循环、液体运动的变化、及炎症细胞(白细胞)的流入和激活。这种应答方式构成了宿主抗感染的固有防卫机制的重要部分，虽然这带来了由炎症过程自身造成进一步组织损伤的“代价”，但它最终促进了随后的修复过程。当微生物感染时或受到某种形式的组织损伤后，会合成可溶性化学物质，它们引发炎症的级联反应，包括一系列复杂的过程。炎症位点血流增加，并因毛细血管通透性增加，有液体从血液渗出。在受伤位点的这种液体渗出包括正常时离开毛细血管速度相当慢的血浆蛋白。通过被动或主动过程，白细胞也通过毛细血管进入炎症位点。炎症细胞渗出物起始主要由多形核(PMN)白细胞(也称为中性白细胞或粒细胞)组成。随后，在炎症浸润物中可见单核细胞、淋巴细胞和浆细胞。感染和炎症位点的鉴别和鉴定对人类医学和兽医中的诊断很重要。在早期局部感染时，常常需要搜寻个体中的“隐藏的炎症位点”，其临床症状无特异性，只是发热和体重减轻。与此相似，在患自身免疫疾病如类风湿性器节炎的病人中，或在排斥组织或器官同种移植物的受体中，确定炎症位点、限定其范围、及在治疗开始后监视其变化的能力对有效的临床医护都很重要。因而，已付出很大努力并开发了许多技术以确定炎症位点并估计炎症过程的程度，这一点就不足为奇了。这些技术包括传统X-射线技术、CAT扫描、和各种放射核扫描。(Sutton，A Textbookof Radiology and Imaging，3rd Ed.，Churchill Livingston(1980)；Maysey et al，Clinical Nuclear Medicine Ed.，W.B.Sanders(1983))。已使用的放射核扫描技术的例子包括1.67Ga(镓)，注射后其与浆蛋白结合并趋于定位在慢性炎症位点； 2.111In(铟)标记的粒细胞，当重新注入宿主时，其在炎症位点累积；3.放射标记的螯合物，其进入细胞外液中然后在液体聚积点累积；和4.铊扫描或所谓的首过放射核素血管造影，以估测血流增加的面积。传统的核医学技术使用下列放射性药物用于感染炎症造影67Ga柠檬酸盐，111In标记白细胞，99mTc标记的白细胞，和111In标记的人多克隆IgG。虽然这些试剂中每种在特定情况下可产生有用的结果，但仍有相当大的待改进之处。67Ga柠檬酸盐在机制上可与111In-IgG(Mw150KD)一起归类为标记蛋白，因为静脉注射后67Ga柠檬酸盐立即转而与血浆中的循环运铁蛋白(MW100KD)和乳铁蛋白(MW～100KD)螯合。用标记蛋白进行炎症造影是其在炎症位点的积累率和从正常组织清除的速率不同所造成的(Juweid，M.，et al.，Eur.J.Nucl，Med，19159-165(1992))。由于从正常组织优先洗出和血液清除的原因，用这些试剂进行损伤检测的最佳时间一般是注射后≥24小时。Thakur等人广泛分析和讨论了基于中性白细胞体外标记的方法(Sem.Nucl.Med.14107-117(1984))。在此方法中，个体的中性白细胞用γ发射性放射核素(选择111In核素)标记。这样标记的中性白细胞可用于体内动力学研究和炎症病灶的造影。这一技术的一个缺点是在体外标记前需要取出并分离中性白细胞。白细胞产生许多介质控制炎症反应的范围和持续时间，并在其表面带有许多受体，可与这些化学介质和存在于炎症液中的其他蛋白结合并反应。这种受体一介质相互作用对控制炎症位点白细胞功能很重要。炎症介质中有趋化因子(也称为化学引诱物)，其具有诱导PMN和巨噬细胞定向迁移和活化的能力(综述和讨论见Roitt等等，Immunology，Gower Medical Pub.，London(1985))。111In标记的白细胞已是很成功的造影剂，但需要较长的准备时间和血液操作。研究时间还要进一步延长，因为放射标记细胞注射后需要数小时去定位，因为它们必须先寻找趋化信号，然后迁移到炎症位点。另外，剂量测定法方面的考虑限制了可施用的放射活性量，常导致造影质量差。虽然可使用剂量高得多的99mTc标记白细胞，但放射活性在非靶标器官中的积累限制了其普遍实用性。通过发展低分子量放射药物可显著降低从注射到损伤检测间的时间，这种放射药物与循环炎症细胞以及已存在于炎症位点的细胞结合。具有这些特征的候选分子包括IL-8(Baggiolini，M.等，J.Clin.Invest.84(4)1045-1049(1989))，血小板因子-4(Deuel，T.F.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78(1)4584-4587(1981)和肽N-甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(For-MLF)(MW437)(Showell，H.J.等，J.Fxper，Med.1431154-1169(1976)；Schiffmann，E.等，Proe.Natl Acad.Sci.USA 721059-1062(1975)；Williams，L.T.等，Proc.Nat.Acad.Sci.USA 741204-1208(1977))。For-MLF是一种细菌产物，它通过与白血细胞膜上高亲和力受体结合而引发白细胞趋化性(Williams，L.T.等，Proc.Nat.Acad.Sci USA 741204-1208(1977)；Showell，H.J.等，J.Exper.Med.1431154-1169(1976)；Schiffmann，E.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 721059-1062(1975))。这些受体既存在于多形核细胞上也存在于单核吞噬细胞上。虽然许多体外结构-活性研究已证明这些小的N-甲酰-甲硫氨酰肽的许多合成类似物结合中性白细胞和巨噬细胞，与此天然肽相比亲和力相等或更强(Niedel.J.等，J.Biol.Chem.2557063-7066(1980)；O’Flaherty，J.J.等，J.Immunol.1201326-1332(1978)；Rot，A.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 847967-7971(1987)；Iqbal，M.等，FEBS 165171-174(1984))，但体内生物分布和生物活性研究相当有限。因为粒细胞与化学引诱物梯度应答；随着额外的受体被表达，受体的亲和力下降，直到细胞到达炎症位点，在那里化学引诱物的浓度最高(Snyderman，R.等，RevInfect.Dis.9S 562-S569(1987)；Fletcher，M.P.，J.Immunol.128941-948(1988)；Niedel，J.，等，J.Biol.Chem.10700-710(1979))。由于For-MLF(MW 437)非常小，其分子结构易于掌握以设计最佳的造影剂。许多种类的的细菌可产生一类或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：A·J·菲什曼，H·F·所罗门，C·K·德里安，G·J·布里杰，J·D·希金斯，S·K·拉森，P·E·赫南德兹，R·H·鲁宾，H·W·斯特拉斯，A·J·福瑟洛，D·J·克龙，D·里尔辛格，
申请(专利权)人：综合医院有限公司，奥瑟药物有限公司，约翰逊·马思公司，
类型：发明
国别省市：