鱼类催熟激素缓释微球注射剂及其制备方法技术

鱼类催熟激素缓释微球注射剂，其特征是：微球中含有激素与缓释剂，激素与缓释剂的质量比等于、小于０．０１％。由于缓释剂微球已经具有明显的缓释作用，可以达到激素在鱼体内缓慢释放的效果。优化方案是将激素粉状微球放入棉籽油中混匀，制成悬浮液。本注射剂的制备方法是：先将缓释剂以蒸馏水溶化，按激素与缓释剂的质量比为小于０．０１％的比例加入鱼类催熟激素，将含鱼类催熟激素的缓释剂制成Ｗ／Ｏ型乳状液，加入化学交联剂固化。由于棉籽油也有缓释作用，这样，激素从明胶微球释放，才从棉籽油释放到鱼体内，进入鱼体内循环，双重的缓释作用延续更好地延续了激素释放时间，从而加强了激素对鱼体的作用。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种鱼类催熟激素缓释微球注射剂，以及这种注射剂的制备方法。激素缓释技术有胆固醇埋植法、W/O/W复乳法制备激素缓释剂，对鳗鲡进行催熟和催产，获得成功。国外学者使用胆固醇埋植、合成聚合物微球注射、EVAc埋植进行海洋鱼类的繁殖。埋植法操作时需要特定的埋植器，由于植入物为固体，药物装载量固定，而鱼大小不定，故剂量控制较难。合成聚合物物理性质稳定，近来使用很多，尤其是聚乳酸类聚合物，由于其生物体内的相容性和可降解性，国内外均研究较多。但此类合成聚合物聚合过程精细复杂，国内价格比较昂贵，如PLGA近年来在医学上广泛应用，但PLGA价格昂贵，且难以获得。国外sigma-aldrich公司、伯明翰公司等有售，价格十分昂贵。国内仅中国科学院成都有机化学研究所等几家单位合成，难以推广普及。许多现代医学、药学方面的缓释技术没有向鱼类人工繁殖中转化。为此，国内鱼类人工繁殖市场急需一种长效、方便、制作价格低廉的激素缓释技术。实现上述专利技术目的的方案是鱼类催熟激素缓释微球注射剂，其特征是微球中含有激素与缓释剂，激素与缓释剂的质量比等于、小于0.01％。由于缓释剂微球已经具有明显的缓释作用，可以达到激素在鱼体内缓慢释放的效果。进一步的优化方案是注射剂中除微球外，还含有植物油，例如棉籽油、食用色拉油、花生油(椰子油也可以使用，但椰子油在低温时凝固，注射时容易堵塞针孔，且鱼注射后容易发生死亡)。即将激素粉状微球放入植物油中混匀，制成悬浮液。即在使用时，将微球加入适量植物油中，用注射器反复抽射混匀，根据鱼体重量及注射剂量进行注射，从胸鳍基部注入腹腔。这里所说的“鱼类催熟|激素”包括现有技术中常用的水溶性多肽与蛋白类。所说的“缓释剂”主要包括两大类(1)天然聚合物，如明胶、葡聚糖、白蛋白、甲壳素等。(2)合成聚合物，如聚乳酸、聚丙交酯、聚乳酸-羟乙酸(PLGA)、聚丙交酯乙交酯(PLCG)、聚己内酯、聚羟丁酸等。鱼类催熟激素缓释微球注射剂的制备方法，步骤如下 先将缓释剂以蒸馏水溶化，按激素与缓释剂的质量比为小于0.01％的比例加入鱼类催熟激素，将含鱼类催熟激素的缓释剂制成W/O型乳状液，加入化学交联剂固化。这里所说的“化学交联剂”是指醛类与异丙醇。醛类如戊二醛，还可以用甲醛，但要调pH值到8.5，而LHRHa在碱性条件下容易降解。所用的乳化剂包括span-80、Tween-80等。对以上步骤，推荐以下具体优化方案先将明胶放入蒸馏水，开水水浴，使明胶完全溶化，降温至50℃左右，按激素与明胶的质量比为小于0.01％的比例将激素加入，混匀，取液体石蜡，加入span-80，水浴至60℃，均匀搅拌，将激素明胶乳化液加入搅拌状态的液体石蜡中，搅拌数分钟，然后迅速降温至5℃以下，加入戊二醛，继续搅拌，然后加入异丙醇，继续搅拌，将液体倒入抽滤漏斗，抽滤，先后用丙酮和无水乙醇洗涤，即可得粉状微球。所需设备烧杯，水浴锅，搅拌器，抽滤机，抽滤瓶及其配套漏斗，滤纸。所需药品与试剂药物明胶，蒸馏水，液体石蜡，冰块，戊二醛，异丙醇，丙酮，无水乙醇。所制微球放入4℃冰箱保存，3月内使用。在注射时再用棉籽油混匀，由于棉籽油也有缓释作用，这样，激素从明胶微球释放，才从棉籽油释放到鱼体内，进入鱼体内循环，双重的缓释作用延续更好地延续了激素释放时间，从而加强了激素对鱼体的作用。药物明胶价格低廉，容易获得，且明胶微球制作工艺简单，具体使用时只需普通注射器即可进行。激素自明胶微球、棉籽油释放到鱼体内后，由于释放缓慢，释放量少，进入体内血液循环，可持续刺激鱼脑垂体合成和释放GtH，又不易使鱼体产生抗体。GtH正反馈于性腺，从而促进性腺发育和成熟。实施例1，先将1g明胶以10mL蒸馏水，开水水浴，使明胶完全溶化，待其温度下降至50℃左右时，按激素与明胶的质量比为小于0.01％的比例将激素加入，混匀，取100mL液体石蜡，加入1mL的span-80，水浴至60℃，均匀搅拌，搅拌速度为700r/min，将激素明胶溶液加入搅拌状态的液体石蜡中，搅拌10-15分钟，然后迅速转入冰浴状态，继续搅拌，直到液体温度降至5℃以下，将搅拌速度调至500r/min左右，加入20mL戊二醛，继续搅拌60min，然后加入100mL异丙醇，继续搅拌10min，将液体倒入抽滤漏斗，抽滤，丙酮洗涤三次，无水乙醇洗涤一次，即可得粉状微球。所制微球放入4℃冰箱保存，3月内使用。在注射时再用棉籽油混匀。实施例2，与实施例1基本相同，但缓释剂采用葡聚糖。化学交联剂采用甲醛与异丙醇，并调pH值到8.5。同时以色拉油代替棉籽油。乳化剂采用Tween-80。实施例3，与实施例1基本相同，但缓释剂采用白蛋白。以花生油代替棉籽油。实施例4，与实施例1基本相同，但缓释剂采用甲壳素。实施例5，与实施例1基本相同，但缓释剂采用聚乳酸。实施例6，与实施例1基本相同，但缓释剂采用聚丙交酯。实施例7，与实施例1基本相同，但缓释剂采用聚乳酸-羟乙酸(PLGA)。实施例8，与实施例1基本相同，但缓释剂采用聚丙交酯乙交酯(PLCG)。实施例9，与实施例1基本相同，但缓释剂采用聚己内酯。实施例10，与实施例1基本相同，但缓释剂采用聚羟丁酸。权利要求1.一种鱼类催熟激素缓释微球注射剂，其特征是微球中含有激素与缓释剂，激素与缓释剂的质量比等于、小于0.01％。2.按照权利要求1所述的鱼类催熟激素的粉状微球注射剂，其特征是注射剂中除微球外，还含有植物油。3.按照权利要求1或2所述的鱼类催熟激素的粉状微球注射剂，其特征是缓释剂是指明胶、葡聚糖、白蛋白、甲壳素、聚乳酸、聚丙交酯、聚乳酸-羟乙酸、聚丙交酯乙交酯、聚已内酯、聚羟丁酸中的一种或几种。4.一种权利要求1所述的鱼类催熟激素的粉状微球注射剂的制备方法，步骤是先将缓释剂以蒸馏水溶化，按激素与缓释剂的质量比为小于0.01％的比例加入鱼类催熟激素，将含鱼类催熟激素的缓释剂制成W/O型乳状液，加入化学交联剂固化。5.按照权利要求4所述的鱼类催熟激素的粉状微球注射剂的制备方法，具体步骤为先将明胶放入蒸馏水，开水水浴，使明胶完全溶化，降温至50℃左右，按激素与明胶的质量比为小于0.01％的比例将激素加入，混匀，取液体石蜡，加入span-80，水浴至60℃，均匀搅拌，将激素明胶乳化液加入搅拌状态的液体石蜡中，搅拌数分钟，然后迅速降温至5℃以下，加入戊二醛，继续搅拌，然后加入异丙醇，继续搅拌，将液体倒入抽滤漏斗，抽滤，先后用丙酮和无水乙醇洗涤，即可得粉状微球。6.按照权利要求4或5所述的鱼类催熟激素的粉状微球注射剂的制备方法，其特征是增加有以下步骤激素粉状微球放入植物油中混匀，制成悬浮液。全文摘要鱼类催熟激素缓释微球注射剂，其特征是微球中含有激素与缓释剂，激素与缓释剂的质量比等于、小于0.01％。由于缓释剂微球已经具有明显的缓释作用，可以达到激素在鱼体内缓慢释放的效果。优化方案是将激素粉状微球放入棉籽油中混匀，制成悬浮液。本注射剂的制备方法是先将缓释剂以蒸馏水溶化，按激素与缓释剂的质量比为小于0.01％的比例加入鱼类催熟激素，将含鱼类催熟激素的缓释剂制成W/O型乳状液，加入化学交联剂固化。由于棉籽油也有缓释作用，这样，激素从明胶微球释放，才从棉籽油释放到鱼体内，进入鱼体内循环，双重的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鱼类催熟激素缓释微球注射剂，其特征是：微球中含有激素与缓释剂，激素与缓释剂的质量比等于、小于０．０１％。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：华元渝，顾志峰，王凤明，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]